TIF1γ基因启动子区域突变和甲基化与非小细胞肺癌发生关系的研究

【摘要】背景与目的：TIF1γ(Transcriptionintermediaryfactor1gamma)属于转录中介因子1家族的成员,可干扰TGF-β/Smad信号通路,抑制TGF-β介导的信号传导,且TIF1γ在多种肿瘤细胞的表达减弱和缺失表明TIFlγ在癌症的发生发展过程中起到抑癌的作用。本研究旨在探索TIF1γ在non-smallcelllungcancer(NSCLC)与组织中的表达差异以确定TIF1γ与肺癌发生关系以及肺癌细胞中TIF1γ表达调控的潜在机制。方法：选取13例NSCLC患者癌组织以及对应的癌旁组织样本,培养正常支气管上皮细胞HBE和NSCLC细胞株:A549和95C.运用Real-timePCR和westernblot检测细胞与组织中TIF1γ基因的表达,并用ImageJ灰度扫描软件计算TIF1γ的相对表达量。通过DNA测序的方法检测TIFlγ基因启动子区域突变情况,并采用Bisulfite-sequencingPCR(BSP)克隆测序方法检测TIF1γ基因启动子区域甲基化情况。结果：相对于HBE,TIF1γmRNA和蛋白在A549和95C中显著下调(P<0.05),对13对组织样本中的TIF1γmRNA的表达量检测结果发现在9对(69.2%)癌旁组织样本里TIF1γmRNA的表达量高于癌组织样本(P<0.05)。启动子活性分析结果表明TIF1γ基因核心启动子位于启动子-282–30区段。突变检测包含核心启动子的TIF1γ基因-287–5区段发现在各细胞株中该区段没有突变发生。经BSP克隆测序方法分析发现在TIF1γ基因启动子-287–5区域里存在5个可被甲基化的CpG位点(-214、-128、-124、-65和-55)。但这些CpG位点的甲基化频率在NSCLC细胞株中相比HBE没有显著差异。结论：TIF1γ在NSCLC的发生中可能起抑癌的作用,TIF1γ基因核心启动子位于启动子-282-30区段,TIF1γ基因启动子区域-287–5在正常细胞和NSCLC细胞中都没有发生突变,但在-287–5区域中存在5个可被甲基化的CpG位点。
【作者】汪龙强；
【导师】张洪涛；
【作者基本信息】苏州大学，遗传学，2014，硕士
【关键词】非小细胞肺癌；TIF1y；甲基化；bisulfite-sequencingPCR(BSP)；

【参考文献】
[1]黄昊天.基于SWOT分析的大学生网络交往研究[D].长安大学,思想政治教育,2014,硕士.
[2]钟力.公民平等权视域下的学前教育公共政策研究[D].福建师范大学,公共人力资源管理（专业学位）,2012,硕士.
[3]尹许梅.基于MFCC和矢量量化的说话人识别算法研究[D].湖南大学,信息与通信工程,2011,硕士.
[4]王金霞.论法律在社会结构中的定位[D].中国政法大学,法学理论,2013,硕士.
[5]徐凌鸿.“绿色信贷”背景下的中小企业环境风险管理研究[D].宁波大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[6]牛怡然.汉语道德概念亮度隐喻表征及其对亮度知觉的影响[D].河北师范大学,基础心理学,2014,硕士.
[7]周晓芳.中国银行业分业经营及其风险性问题的研究[D].吉林大学,数量经济学,2004,硕士.
[8]左蓓蓓.我国党报微博的运营研究[D].南昌大学,传播学,2014,硕士.
[9]徐凌.城市绿地生态系统综合效益研究—以大连市为例[D].辽宁师范大学,自然地理学,2003,硕士.
[10]胡中平.利用反射波的相关特性拟合零炮检距剖面──剔除追踪拟合方法[J].石油地球物理勘探,1999,02:218-226+248.
[11]马末.新中国不同时期板胡艺术的特点分析[D].中国音乐学院,音乐学,2012,硕士.
[12]安伊凡.吉林省冰雪体育用品产业发展对策研究[D].吉林大学,体育人文社会学,2014,硕士.
[13]李卓群.马克思人权思想研究[D].西北大学,马克思主义哲学,2014,硕士.
[14]郭向金.基于可重构系统的任务放置与任务复制方法研究[D].湖南大学,软件工程,2011,硕士.
[15]李珉.武汉城市社区文化建设研究[D].湖北工业大学,马克思主义中国化研究,2013,硕士.
[16]陈清礼,严良俊,付志红,苏朱刘.长偏移距瞬变电磁法全区视电阻率的二分搜索数值算法[J].石油地球物理勘探,2009,06:779-783+650.
[17]顾巍巍.农业植物新品种权转让中的保护问题研究[D].南京农业大学,农村与区域发展,2013,硕士.
[18]金秋池.马克思恩格斯人权理论及其启示[D].渤海大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[19]刘莎.γ-癸内酯高产酵母基因工程菌的构建[D].大连理工大学,生物化工,2013,硕士.
[20]王平亚.近晶格匹配InAlN/GaN材料结晶质量和电学特性相关性研究[D].西安电子科技大学,微电子学与固体电子学,2012,硕士.
[21]李文一.郑州市跨境贸易电子商务发展战略研究[D].北京交通大学,2014.
[22]李斌.49.3MW风电场工程可行性研究[D].吉林大学,工程管理,2013,硕士.
[23]李少华.美国对华反补贴问题研究[D].河北经贸大学,国际法,2013,硕士.
[24]安世真.中药治疗肝肾阴虚型卵巢储备功能下降及卵巢早衰的临床观察[D].北京中医药大学,中医临床,2013,硕士.
[25]李庆胜.金诚电子公司发展战略研究[D].大连理工大学,工商管理,2004,硕士.
[26]刘锫.基于专利许可限制的专利添附研究[D].西南交通大学,经济法学,2013,硕士.
[27]王丽云.我国上市公司自愿性信息披露研究[D].首都经济贸易大学,会计学,2014,硕士.
[28]岳东奎.杜密克山东市场营销策略研究[D].西安科技大学,工商管理,2013,硕士.
[29]杜彬.从影像到物像——产业化背景下动画电影衍生产品的问题与对策探究[J].当代电影,2014,09:180-182.
[30]孙平.巨噬细胞对贫铀颗粒的吞噬及吞噬后上清对支气管上皮细胞的作用研究[D].苏州大学,公共卫生（专业学位）,2014,硕士.
[31]马妍.氮功能化对蒄结构与载流子迁移率的影响及含氮杂蒄吸电子基光伏电池供体材料的分子设计[D].陕西师范大学,2013.
[32]寿建鸿.成都荷花池中药材价格指数系统设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[33]孙少鹏.碲化铋热电薄膜的热传导及力学性能的分子动力学研究[D].哈尔滨工业大学,材料工程,2013,硕士.
[34]罗星.健脾消癌方对裸鼠大肠癌肝转移模型VEGF以及VEGFR-2表达的影响[D].湖南中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[35]金政财.学校愿景领导及其对学校管理绩效影响的研究[D].首都师范大学,教育,2013,硕士.
[36]吕海军.哈梅内伊—哈塔米时期伊朗对美国政策研究[D].兰州大学,世界史,2013,硕士.
[37]徐达宇,杨善林,罗贺.云计算环境下多源信息资源管理方法[J].计算机集成制造系统,2012,09:2028-2039.
[38]王子明,阮家聚,魏国显,骆飞,左海,卫林.柴达木盆地东部高分辨率地震勘探应用研究与效果[J].石油地球物理勘探,2002,06:569-577+660.
[39]韩觉明.310例恶性肿瘤患者凝血指标与临床病理特征关系的分析[D].山东大学,临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[40]杨忠云.中国烟草行业工商协同营销研究[D].云南财经大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[41]舒文琼,覃庆玲,管黛,项方伟.移动博客专题报道(二)移动博客宜走融合之道[J].通信世界.2008(07)
[42]高秉杰.数控仿形控制系统的设计与研制[J].电讯技术.1989(04)
[43]刘鹰.基于信息技术范式山西旅游产业电子商务发展研究[D].山西大学,科学技术哲学,2004,硕士.
[44]石劲松,肖成祥,王力,高雪梅,李少刚,徐飞.宝钢大客户通道系统设计与应用(下)[J].冶金自动化,2008,03:1-5.
[45]卢福广.新型分子印迹聚合物的制备及在药物与食品分析中的应用研究[D].济南大学,分析化学,2012,硕士.
[46]郑嘉欣.STIM1和TRPC1基因多态性与闽西南地区泌尿系含钙结石患者相关性的研究及结石成分分析[D].南方医科大学,泌尿外科（专业学位）,2014,博士.
[47]朱智军.复杂电气信号相量测量方法研究[D].湖南大学,电力系统及其自动化,2012,硕士.
[48]郑方.两种可生物降解高分子纳米复合材料的制备和表征[D].山东农业大学,2014.
[49]吴志刚.数据仓库技术在企业中的应用[J].天津职业技术师范学院学报,2003,02:15-18.
[50]刘庆声.21世纪航天事业展望(续)[J].质量与可靠性.1998(01)