Ⅳ和Ⅵ型胶原在皮肤创伤再生和瘢痕愈合中的表达差异

【摘要】背景和目的皮肤损伤后愈合方式包括再生修复(完全愈合)和瘢痕增生(不完全愈合)。创面愈合是一个复杂有序的过程,有多种细胞、细胞因子、胶原及信号分子均参与这一过程,并对创伤后炎性反应、细胞增殖、结缔组织形成、创面收缩和重新塑造等起重要作用。瘢痕形成不仅影响外观,而且常常导致功能障碍,如关节部位,严重者可导致器官功能部分丧失或全部丧失。Ⅳ型及Ⅵ型胶原作为细胞外基质的主要组成分,在创面愈合中发挥重要作用。Ⅳ型对创面愈合具有双重作用：一方面,参与基底膜的形成,使表皮与乳头真皮层粘附促进创面愈合；另一方面,可抑制血管内皮细胞粘附于血管基底膜,阻止新血管形成,延迟创面愈合。Ⅵ型胶原可形成微纤丝促使Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积,并促使细胞粘附,激活基质金属蛋白酶的活性使创面组织重塑[3]而促进创面愈合。然而,Ⅳ型及Ⅵ型胶原在皮肤创伤再生修复及瘢痕愈合中的变化仍不清楚。本研究采用耳兔皮肤再生和瘢痕愈合一体化模型,使用HE染色法及免疫组织化学技术,检测Ⅳ型及Ⅵ型胶原在皮肤从浅到深层损伤区愈合和瘢痕演变过程中的表达,了解Ⅳ型及Ⅵ型胶原蛋白在皮肤再生修复和瘢痕形成中的变化规律。材料和方法选用健康日本大耳白兔26只,(购于兰州市兽医研究所,普通级动物,合格证号：SCKX甘2004-0005),雌雄不拘,体重在2.0kg-3.0kg之间。单只分笼饲养,普通饲料喂养,自由进食水,适应性饲养一周后,采用含8%硫化钠的自制脱毛剂行兔耳腹侧脱毛,脱毛后饲养3天,以减少硫化钠对兔耳腹侧皮肤的损伤。采用2%的戊巴比妥钠(30mg/kg)耳缘静脉注射麻醉,麻妥后,采用自制模具充分展平兔耳腹侧皮肤,分别于两侧兔耳各制作两个创面(10mm×10mm,创面为由浅至深的斜面,浅层仅伤及表皮,深层至软骨表面),共84个。分别于伤后即刻、伤后3天、伤后6天、伤后9天、伤后27天、伤后50天切取创面及创周组织。实验前经兰州大学第二医院实验动物伦理委员会审批同意,所有实验动物给予人文关怀。标本使用HE染色法及免疫组织化学检测Ⅳ型及Ⅵ型胶原在兔耳腹侧皮肤损伤区深、浅两层的表达情况。沿斜形创面由浅入深的方向,将其分为10等分,每等分1.0mm×10mm,采用Image-Pro—Plus6.0图像分析软件检测每等分组织区域内的10个视野中的平均光密度。浅层创面定义为距浅表皮肤损伤侧向创面中心3mm范围,深层创面定义为距软骨暴露侧向创面中心3mm范围内。所检测测到的数据采用x±s表示,统计学分析使用SPSS18.0软件包：若方差齐性时,多组间均数比较则采用方差分析,两两比较时使用最小显着差异法,方差补齐时则采用秩和检验法,P<0.05为差异有统计学意义。结果1.伤后3天创面结痂。浅层创面伤后6天痂脱落,第9天再生修复；而深层创面于伤后第9天痂大部分脱落,伤后12-14天上皮化。伤后27天瘢痕增生显著,瘢痕质硬,伤后50天瘢痕成熟软化,创面肤色与周围不能分辨。2.Ⅳ型胶原主要表达于皮肤及血管BMs。伤后第3天创面开始表达,上皮化时达高峰,伤后27天时明显减少。伤后27天内浅层创面表达量较深层多(p<0.05)。伤后50天时深浅创面无明显区别(p>0.05)。3.Ⅵ型胶原广泛表达于整个真皮层。伤后第3天创面开始表达,随后逐渐增加,伤后27天开始减少。伤后6天内浅层创面表达量较深层创面多(p<0.05)。伤后第9、12、27天深层表达量均多于浅层Q<0.05)。伤后50天深浅创面表达量无明显差异(p>0.05)。结论1.创面Ⅳ型胶原表达量伤后27天内浅层高于深层创面。2.Ⅵ型胶原表达量伤后6天内浅层创面较深层多；9-27天深层较浅层高。
【作者】姚东刚；
【导师】张选奋；
【作者基本信息】兰州大学，外科学，2014，硕士
【关键词】创伤愈合；胶原蛋白；再生；瘢痕；

【参考文献】
[1]胡雪平.不同施钾量对烤烟产量和品质的影响[D].湖南农业大学,种植,2003,硕士.
[2]赵川.连锁零售精益物流供应链多级库存协同决策[D].北京工商大学,控制工程,2012,硕士.
[3]高曼曼.吉林省寿险业营销策略研究[D].吉林大学,工商管理,2012,硕士.
[4]牛毓君.“反规划”视角下的城乡结合部土地利用规划研究[D].中国地质大学（北京）,土地资源管理,2013,硕士.
[5]胡小琴.隐性冲突话语的发展模式研究[D].华中科技大学,英语语言文学,2013,硕士.
[6]任朝军.基于细观层次混凝土静、动力学性能的数值模拟[D].河海大学,2005.
[7]王文宾,达庆利.考虑市场细分的闭环供应链生产与定价策略[J].控制与决策,2009,05:675-679+686.
[8]徐游.葡南一断块葡I组构造精细解释与砂体预测[D].东北石油大学,地球探测与信息技术,2013,硕士.
[9]吴伟康,凌云.三维叠后零相位同态反褶积[J].石油地球物理勘探,1995,06:749-756+848.
[10]黄亚峰.大容量光伏逆变系统接入弱电网运行可行域研究[D].华北电力大学,电力系统及其自动化,2014,博士.
[11]彭斌,张楠,杨静静.线路加固体系基于车线耦合与有限元的分析[J].铁道工程学报,2014,07:62-68.
[12]雷春雨.风力发电叶轮转速的控制方法与实现[D].江苏科技大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[13]韩正泽.齿轨车液压系统故障诊断方法研究[D].大连理工大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[14]陈尔学,李增元,田昕,李世明.尺度不变特征变换法在SAR影像匹配中的应用[J].自动化学报,2008,08:861-868.
[15]韩伟威.大型建设项目团队知识学习能力支撑体系研究[D].中南大学,土木工程,2013,博士.
[16]卢正本.肇东公司IS022000体系实施过程中的改进研究[D].吉林大学,工业工程,2014,硕士.
[17]李凯.禽网状内皮组织增生病基因工程亚单位疫苗及DNA疫苗的研制[D].中国农业科学院,预防兽医学,2014,博士.
[18]宋刚.蓄热式加热炉炉温建模方法研究[D].东北大学,控制理论与控制工程,2009,硕士.
[19]贺志雄.某斜塔斜拉桥设计施工技术研究[D].河北工业大学,建筑与土木工程,2012,硕士.
[20]王思成,刘保延,熊宁宁,谢琪,张润顺,周雪忠,乔洁.真实世界临床研究伦理问题及策略探讨[J].中国中西医结合杂志,2013,04:437-442.
[21]彭黎明.氩氦冷冻/微波消融序贯~(131)I-chTNT瘤内注射治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究[D].南方医科大学,肿瘤学,2012,硕士.
[22]袁文娟.会计盈余信息含量研究[D].河北经贸大学,会计学,2012,硕士.
[23]李小平.嵌入式多功能网络通信终端的设计和研究[D].浙江大学,计算机应用,2004,硕士.
[24]姬生星.火电系统风机用钢的焊接试验研究[D].西南交通大学,材料加工工程,2014,硕士.
[25]鞠剑,陈卫.石墨烯量子点负载银纳米粒子制备及氧还原电催化活性[J].电化学,2014,04:353-359.
[26]李今,陈家宽,周进,何国庆.迁地保护中普通野生稻和长喙毛茛泽泻种群动态及评价[J].植物生态学报,1999,03:84-91.
[27]王海南.基于纳米复合材料的电化学生物传感器研究[D].大连理工大学,2012.
[28]伍倩昀.袁、岑之政途分歧与清末政局[D].华中师范大学,经济—社会史,2014,硕士.
[29]叶玮.我国内资商业银行零售业务服务质量测译方法研究[D].上海外国语大学,国际贸易学,2012,硕士.
[30]郭晓宇.服务贸易类型新论[D].东北财经大学,国际贸易学,2003,硕士.
[31]罗多群.哈代眼中的“纯洁女性”—苔丝形象面面观[D].湖南师范大学,英语语言文学,2004,硕士.
[32]李康.我国廉租房保障的退出机制研究[D].沈阳师范大学,社会保障,2013,硕士.
[33]李鹏.基于FFCA和模糊概念相似度的模糊本体构建研究[D].新疆大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[34]徐晓初,章巧芳,彭伟,宫林林,翁金学.气动钉枪内部流场PIV实验测量系统的设计[J].中国制造业信息化,2012,01:64-67.
[35]胡志恒.非接触式手部运动识别研究[D].哈尔滨理工大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[36]韩文娟.液压支架三维CAD系统的研究与开发[D].河北工程大学,机械设计及理论,2012,硕士.
[37]张舒博.数据挖掘在通信行业品牌建设中的应用[J].移动通信,2005,01:97-98.
[38]李仁伟.现代派美术与信息传达[D].山西大学,美术学,2004,硕士.
[39]乔玉娇.山东省农产品出口贸易战略研究[D].山东财经大学,国际贸易学,2012,硕士.
[40]张雯.多天线固定中继系统干扰抑制算法研究[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[41]龙明梅.重庆山区高速公路生态恢复及景观美感对交通状况的影响研究[D].重庆交通大学,自然地理学,2011,硕士.
[42]林珊玲.《浮士德》人物形象浅析[D].吉林大学,比较文学与世界文学,2004,硕士.
[43]马嵘.新疆少数民族中学“体育与健康”课程教学的现状及对策研究[D].新疆师范大学,2004.
[44]胡文睿.齿轮损伤磁记忆检测的数值模拟及试验研究[D].国防科学技术大学,机械工程,2012,硕士.
[45]董雷刚.民族地区与东南沿海地区上市公司并购绩效比较研究[D].中南民族大学,企业管理,2013,硕士.
[46]黄鲁成,成雨,吴菲菲,苗红,李欣.关于颠覆性技术识别框架的探索[J].科学学研究,2015,05:654-664.
[47]吴笑吾.认知抑制对中国英语学习者句法移位加工的影响[D].扬州大学,英语语言文学,2012,硕士.
[48]王伟,张庆山,王国才.软土基坑复合土钉支护变形特性的数值模拟研究[J].四川建筑科学研究,2013,06:127-130.
[49]肖明伟.基于数据挖掘与数理统计的电信集团客户价值评估研究与应用[D].成都理工大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[50]黎巍.票据时效问题研究[D].吉林大学,民商法学,2004,硕士.