海南尖峰岭及佳西热带雨林抗根结线虫芽孢杆菌的筛选、鉴定及发酵工艺的初步优化

【摘要】根结线虫(Meloidogynespp.)是一类植物内寄生线虫,无严格的宿主特异性,能侵染多种农作物,造成减产,甚至绝收,严重危害农业生产。目前,以化学杀线剂为主的防治措施存在很多弊端,破坏环境、危害人体健康、易产生耐药性等,正逐步被限制使用。生物防治以其安全无污染的优点愈来愈受到人们重视。芽孢杆菌在自然界分布广,遗传类型多,且能产生抗逆性极强的孢子,是根结线虫生防资源开发的重点。本研究对本实验室保存的海南省尖峰岭和佳西热带雨林芽孢杆菌资源进进行了抗线虫活性筛选,最后对筛选出的活性菌株进行鉴定和初步的发酵优化。主要研究内容如下：对291株芽孢杆菌进行了抗根结线虫的活性测定。采用松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)初筛获得16株具有较高拮抗活性的菌株,其校正死亡率均在80%以上；再用南方根结线虫(Meloidogyneincognita)二龄幼虫(J2)对初筛中活性较多菌株进行复筛,获得6株依然具有较高拮抗活性的菌株,发酵液稀释10倍后校正死亡率在50%以上,其中活性最高的三株为DB13136、DB13170、DB13184,其校正死亡率分别为63.6%、58.1%、56.7%。对筛选出的三个活性菌株进行了分类鉴定,包括培养特征、形态特征、生理生化特征、基于16SrDNA的系统发育分析。最终将菌株DB13136鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus),将菌株DB13184鉴定为Bacillustoyonensis,将菌株DB13170鉴定为芽孢杆菌属(Bacillusspp.)中的一种,但其具体分类地位有待进一步分析。对活性菌株DB13184进行了初步的发酵优化,结果表明该菌株最适于利用的碳源为葡萄糖和乳糖,在浓度分别为1.5%和2%时有最高活性,分别为98.2%和97.8%且葡萄糖比乳糖活性更高；最适宜利用的氮源为蛋白胨、牛肉浸粉、酵母提取物,浓度分别在1.5%-2.5%、2%-2.5%及2%时有最高的活性,分别为100%、100%和94.5%,其最适氮源依次为蛋白胨>牛肉浸粉>酵母提取物。
【作者】张立强；
【导师】鲍时翔；
【作者基本信息】海南大学，微生物学，2014，硕士
【关键词】根结线虫；芽孢杆菌；分离筛选；生物防治；

【参考文献】
[1]黄维华,廖东升,卢洁辉.浅谈城市轨道交通乘客满意度调研[J].现代城市轨道交通.2008(02)
[2]朱黎纳.基于群智能算法的多机器人编队技术研究[D].南京理工大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[3]柴志峰.养老地产经营模式分析[D].上海交通大学,高级工商管理（EMBA）,2013,硕士.
[4]吴小燕.超细含能硝基配合物的制备及其性能研究[D].南京理工大学,材料学,2013,硕士.
[5]程养和.1986年度美国陆地棉质量概况与我国陆地棉质量比较[J].纤维标准与检验.1988(04)
[6]吕殿臣.青岛青少年校园足球活动开展现状的调查研究[D].山东师范大学,运动训练学（专业学位）,2013,硕士.
[7]党莹.陕西省延安市县级公立医院补偿机制研究[D].西北大学,行政管理学,2013,硕士.
[8]魏巍.西部凹陷南部沙河街组储层孔隙度计算与有利区预测[D].东北石油大学,矿产普查与勘探,2013,硕士.
[9]罗哲文.解决历史文化名城交通问题的良策[J].城市发展研究.1996(01)
[10]张艳欣.导数—原子捕集—火焰原子吸收光谱法在中草药微量元素分析中的应用研究[D].河北大学,分析化学,2002,硕士.
[11]王美玲.“可爱风格”在现代标志设计中的应用与研究[D].东北师范大学,设计艺术学,2012,硕士.
[12]王迎宁.董事会资本宽度和深度对企业战略投资的影响研究：政治不确定性和董事会薪酬激励的调节作用[D].浙江大学,创业管理,2014,硕士.
[13]郜爽.新时期我国教育硕士培养目标探究[D].沈阳师范大学,教育学原理,2014,硕士.
[14]吴丹.人源性乳腺微环境小鼠模型的移植物功能研究[D].南京医科大学,外科学,2013,硕士.
[15]曹彬.阈下启动对不同人格大学生内隐攻击性的影响[D].河北大学,发展与教育心理学,2014,硕士.
[16]姚保卫.不确定多重交替更新过程[D].上海师范大学,应用数学,2013,硕士.
[17]喻佳丽,辛斌杰.铜基底化学气相沉积石墨烯的研究现状与展望[J].材料导报,2015,01:66-71.
[18]仇亮.郑东新区地税网络发票推广管理调查报告[D].郑州大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[19]郭书鹏.石墨烯表面增强拉曼散射效应的探究[D].哈尔滨工业大学,光学,2013,硕士.
[20]张树卿,梁旭,童陆园,洪潮.电力系统电磁/机电暂态实时混合仿真的关键技术[J].电力系统自动化,2008,15:89-96.
[21]韩建祥.UV固化聚氨酯丙烯酸酯疏水涂料的研制及其应用[D].广西科技大学,生物化工,2013,硕士.
[22]柯勇,万雅竞,周卫东.铜液中氧含量的自动化检测[J].冶金自动化,2000,05:67-68.
[23]孟瑞婷.《现代汉语词典》“名+动”偏正式复合动词释义研究[D].河北师范大学,汉语言文字学,2012,硕士.
[24]蔡得水.微带缝隙天线的研究与设计[D].西安电子科技大学,电磁场与微波技术,2012,硕士.
[25]胡振伟.AO锁骨钩钢板与克氏针张力带钢丝治疗锁骨远端骨折的疗效分析[D].大连医科大学,骨外科学,2012,硕士.
[26]国家辉.聚乙烯/蒙脱土纳米复合材料结构形态与介电性能仿真[D].哈尔滨理工大学,2014.
[27]张袁媛.科技特派员激励机制研究[D].江西农业大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[28]陈媛媛.新型农村养老保险制度在实施中遇到的若干问题及解决方法[D].华中师范大学,社会保障,2012,硕士.
[29]朱学文.基于多平台集成环境的注塑成型工艺多目标优化[D].宁波大学,机械工程,2013,硕士.
[30]袁萌萌.地源热泵系统运行测试与性能分析[D].山东建筑大学,动力工程（专业学位）,2013,硕士.
[31]杨青,郑涛,肖仕武,黄少锋,刘万顺.快速识别转换性故障的变压器差动保护新判据[J].电力系统自动化,2007,20:61-64+107.
[32]肖楠.中国女性新媒体艺术的身份研究[D].北京服装学院,艺术学,2012,硕士.
[33]吴轶宏.数字化奶牛场岗位技能培训系统设计开发[D].西北农林科技大学,养殖,2012,硕士.
[34]纪雁.利用味精废水培养普通小球藻以及养藻废水的生物强化处理[D].山东大学,环境工程,2014,博士.
[35]侯博峰.矿山企业资产管理系统的设计与实现[D].厦门大学,软件工程,2014,硕士.
[36]刘庆波.新民特低渗透油藏酸化解堵技术研究与应用[D].东北石油大学,石油与天然气工程（专业学位）,2013,硕士.
[37]朱伟兴.恢复及演替过程中的土壤生态学考虑(英文)[J].植物生态学报,2005,03:379-386.
[38]刘明学.碳纤维布提高剪力墙延性的试验研究[D].天津大学,结构工程,2004,硕士.
[39]郭丹,曾解放,范国荣,王鹏,陈尚钘.樟树精油的化学成分及生物活性研究进展[J].生物质化学工程,2015,01:53-57.
[40]王晓雅.安徽省蒙城县农村养老模式的调查报告[D].安徽大学,社会工作,2013,硕士.
[41]刘萌成,谢波,高玉峰,詹小丽.长期循环荷载作用下路基土累积残余变形模拟[J].土木工程学报,2013,10:135-142.
[42]朱晓艳.基于联吡啶钌的电致化学发光新方法研究[D].南昌大学,2011.
[43]王庆利.先进控制策略在单元机组协调控制系统中的应用研究[D].东北大学,2008.
[44]尚金成,张兆峰,韩刚,张森林.区域电力市场竞价交易模型与交易机制的研究(二)电价机制及其稳定制度、市场风险及其规避、结算机制与市场盈余公平分配模型[J].电力系统自动化,2005,13:5-12.
[45]向咸宁.校园文化建设视域下的大学生创新素质培养研究[D].湖北工业大学,思想政治教育（专业学位）,2013,硕士.
[46]李昕,张娟,李全福,楚朋志,王小力,刘卫华.面向集成电路的大尺寸单晶石墨烯的可控制备方法[J].西安交通大学学报,2014,06:103-109.
[47]屈慧敏.带数词的汉语成语俄译策略[D].黑龙江大学,翻译,2013,硕士.
[48]王德志.基于现场总线技术的井下铁路信号PLC联锁控制系统研究与应用[D].辽宁工程技术大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[49]臧义光.当代大学生礼仪教育研究[D].辽宁师范大学,思想政治教育,2012,硕士.
[50]肖庆来,曾松伟,黎章矩,喻卫武.香榧研究现状与展望[J].浙江林业科技,2014,03:93-97.