对虾消化道乳酸菌优势菌株的分离筛选及应用研究

【摘要】本研究于2012年9月至2013年9月期间,对海南省三个地区对不同生长阶段的健康凡纳滨对虾(LitoPenaeusvannamei)和健康的斑节对虾(Penaeusmonodon)成虾的消化道的乳酸菌优势菌分离筛选及鉴定。实验分离筛选出15株乳酸菌,对其中4株优势菌株展开药敏试验、最适宜生长条件的探究,并对一株土著优势菌进行了安全应用效果和弧菌拮抗作用效果的研究。实验研究结果表明,对虾肝胰脏内可培养总菌平均数量为4.25×108cfu/g,乳酸菌平均数量为1.3×108cfu/g;肠道可培养总菌平均数量为2.80×109cfu/g,乳酸菌平均数量为4.64×108cfu/g。乳酸菌是对虾消化道的重要菌群,乳酸菌与总细菌比例的变化范围为12.90%-27.98%。对4株乳酸菌最适宜生长条件探究表明,最适宜pH为5.0～6.5之间,最适宜温度为25～34℃,最适宜盐度为10-30,接种2×108cfu/ml菌液是最适宜接种比例。药敏结果显示,乳酸菌HN3对氯霉素、头孢哌酮和左氟沙星等药物高度敏感；乳酸菌HN5对链霉素、头孢西丁和头孢曲松等药物敏感；乳酸菌HN7对万古霉素、卡那霉素和头孢曲松等药物高度敏感；乳酸菌HN12对氯霉素、头孢哌酮和头孢曲松等药物敏感。对一株优势有益菌HN3进行形态特征和生理生化试验,初步鉴定乳酸菌HN3为芽孢乳杆菌。乳酸菌HN3拌料和浸染方式的凡纳滨对虾养殖试验结果表明,与对照组相比,拌料投喂乳酸菌4×106cfu/g或浸染5×104cfu/ml时能显著提高对虾的存活率、日增重和特定增长率(p<0.05)；实验还发现,消化道和养殖水体内的乳酸菌数量大幅上升,而弧菌数量显著性降低(p<0.05),说明乳酸菌可在对虾消化道环境适应而定植,并且可以抑制消化道内的弧菌数量,使弧菌维持在较低数量水平。乳酸菌对两株致病性弧菌的拮抗作用结果表明,乳酸菌原液及其胞外液以及中和酸性后的胞外液均能对两株弧菌有显著性的抑制效果(p<0.05)。拌料投喂乳酸菌为4×106cfu/g试验或浸染3×104cfu/ml后人工感染同等浓度弧菌养殖对虾,与对照组相比,能够不同程度上提高对虾成活率和日增重。
【作者】柯杨勇；
【导师】赖秋明；
【作者基本信息】海南大学，水产养殖学，2014，硕士
【关键词】乳酸菌；消化道；分离鉴定；凡纳滨对虾；弧菌；人工感染；应用效果；

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