【摘要】APC复合体(促后期复合物,Anaphase-PromotingComplex/Cyclosome)参与了很多细胞周期调节因子的泛素化作用。它参与的蛋白质降解系统的功能失调可能导致细胞增殖紊乱、基因组不稳定和肿瘤的发生。APC11是APC复合体中具有泛素连接酶E3催化结构域的蛋白质,本论文包括两部分,第一部分是关于siRNA干扰沉默Apc11对于细胞功能影响以及APC11L功能的初步研究； […]

【摘要】蛋白质乙酰化是一种重要的蛋白翻译后修饰,由于其在生命活动中的重要作用受到日益关注。我们和其他的实验室用质谱鉴定的方法,发现了很多核外蛋白质存在乙酰化修饰。值得一提的是,几乎所有的细胞代谢循环中的代谢酶,均存在不同程度的乙酰化调控。此外研究表明肿瘤的发生发展与细胞代谢的异常密不可分。我们的研究工作旨在通过对肿瘤代谢途径中关键酶的研究,阐述代谢酶的乙酰化修饰在肿瘤生长增殖调控中的作用,从而为肿 […]

【摘要】蛋白质翻译后修饰参与调控多种生物学行为,近年来对蛋白质翻译后修饰与肿瘤信号转导机制的研究已成为肿瘤学研究的热点。泛素化是蛋白质翻译后修饰的一种重要形式。泛素化修饰在细胞周期调控,细胞生长,凋亡,DNA损伤修复及免疫反应中发挥着重要作用。研究表明,与Lys48结合的多聚泛素链(Ubk48)作为一种信号,介导泛素修饰底物进入26S蛋白酶体,执行降解功能；与Lys63结合的多聚泛素链(Ubk63 […]

【摘要】背景：肺癌是人类肿瘤的头号杀手,其复发和转移是肺癌患者五年生存率得不到有效改善的主要原因。肿瘤抑制基因的过度失活与癌基因的异常活化在肺癌的发生发展中起着至关重要的作用。超过60%的肺癌中出现了肿瘤抑制基因p53的突变与功能异常；超过25%的肺癌中检测到了原癌基因c-erbB1(EGFR)的扩增。近年来,肿瘤的化学预防日益受到人们的关注,绿茶多酚EGCG是目前已知的最有效的天然抗肿瘤化合物之 […]

【摘要】杂种优势是生物界的一种普遍现象，利用杂种优势可以显著地提高作物的产量和品质。目前在水稻、玉米、高梁、油菜等作物被广泛应用并获得了前所未有的成功。大量研究和生产实践亦表明，小麦也具有明显的杂种优势，深入研究与开发利用是大幅度提高小麦产量和品质的一种重要途径。小麦杂种优势利用的基础是雄性不育，因此小麦雄性不育的创制和不育机理的研究成为杂种优势充分利用的前提。特别是化学杂交剂诱导不育途径，如新型 […]

【摘要】DNA2是一种核酸酶／解旋酶,首先在酵母中被发现。作为重要的工具酶在DNA复制和修复中,参与不同的信号通路。例如在冈崎片段成熟过程中能够去除RNA引物,双链DNA断裂修复中进行末端剪切,以及最近报道的,DNA2能够稳定并重新起始鸡爪状复制叉。2008年,我们实验室首先发现人DNA2也具有保守的核酸酶和解旋酶结构域,但是缺少经典的核定位信号肽序列。所以免疫荧光和蛋白杂交实验表明,人DNA2主 […]

【摘要】目的：人丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus,HCV)感染已成为一个全球性的健康问题,通过蛋白结构软件对非结构蛋白4B(non-structuralprotein4B,NS4B)进行分析,发现其C末端可能存在一个工类PBM基序(PDZ-bindingmotif,PBM),类似于一些致病病毒蛋白,然而目前对NS4B中PBM区域的鉴定以及其与PDZ极性蛋白的作用影响未见报道。本课题拟研 […]

【摘要】第一章视紫红质T17M突变体的亚细胞定位目的：研究视紫红质T17M突变体的亚细胞定位及意义。方法：构建pCDNA-3.1-T17Mrhodopsin-myc质粒和pCDNA-3.1-WTrhodopsin-myc质粒,使用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法进行鉴定,基因测序。将构建成功的质粒转染到HEK293细胞,采用Westernblot检测视紫红质T17M突变体和野生型的蛋白表达差异。免疫 […]

【摘要】本研究构建了原核表达载体pET32a-hCD80/anti-CD19scFv,在大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中经IPTG诱导表达了基因工程蛋白hCD80/anti-CD19scFv(双功能蛋白抗CD19/B7)。所表达蛋白为N端含有Histag和TrxTagTM标签的可溶性蛋白,产量较前期研究的表达系统显著提高。初步纯化产物经过肠激酶切除其N端的Histag标签和TrxTag […]

【摘要】Cullin3是泛素化连接酶E3蛋白,属于Cullin蛋白家族。已有的研究工作表明,Cul3在拟南芥、线虫、果蝇以及小鼠等动物模型中的缺失或者突变都具有胚胎致死的表型,说明Cul3在进化上的保守性及其可能存在的重要功能。与其他Cullin家族蛋白类似,Cullin3能够和具有BTB结构域的蛋白结合形成E3连接酶复合物,并与通过BTB蛋白与特异性底物结合并介导其底物的降解。但目前的研究对Cu […]