【摘要】链霉菌通过自身的次级代谢能够产生许多重要的天然复合物,特别是能够合成具有生物活性的抗生素。目前,与抗生素生物合成相关的基因功能的研究主要是通过基因打靶载体的同源重组手段来实现的。本研究中,我们设计了一种快速高效的构建基因打靶载体的方法。该方法是建立在链霉菌噬菌体φBT1整合酶系统的基础上,通过多位点间的一步特异性重组反应来完成的。这种方法省时高效,能够快速的完成靶标基因的替换。另外,由于预 […]

【摘要】人胚胎干细胞(HumanEmbryonicStemCells,hESCs)因其具有高度的自我更新特性和多向分化潜能,在再生医学、组织工程、基因治疗等领域都有着巨大的研究和应用潜力。近年来,随着基因打靶技术在人胚胎干细胞中的不断尝试,使得经基因组精确修饰后的干细胞有望成为实现遗传病治疗的有效方式。然而要充分实现联合基因打靶和干细胞两种技术在临床应用的可能,我们还需面对一些潜在的困难,例如自发 […]

【摘要】乳房炎是奶牛最重大的疾病,每年给乳制品行业造成数十亿美元的经济损失。转基因奶牛分泌的抗菌肽表现出抗乳房炎的特性。体细胞基因打靶与核移植技术相结合为生产转基因动物提供了强大的方法。最近的研究发现,锌指核酸酶诱导的精确的双链断裂可以促进外源的DNA片段整合到已知的基因组位点,导致高效的位点特异性的基因整合。锌指豁口酶是一种可编辑的核酸酶,它可以通过对锌指核酸酶的改造来诱导在基因组DNA上产生位 […]

【摘要】近几年发现的抑制骨骼肌生长的负调控因子–肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN),在遗传突变后,导致基因功能的失活,进而引起动物肌肉过度发育,肌纤维数量增多,直径增加,肌肉量急剧增加,动物表现为“双肌”眭状。于是,研究者们通过对肌抑素基因进行敲除、缺失,突变等基因修饰,来获得基因敲除的动物模型和克隆动物,以达到医学上和农业上的需求。对于本研究来说,蒙古羊是内蒙古自治区的优 […]

【摘要】FGF5基因是FGF基因家族中的一员,在毛发生长周期中具有重要的调控作用。FGF5基因突变可以导致毛发生长周期中生长期的延长,从而使毛发的长度增加。本研究拟靶除内蒙古白绒山羊的FGF5基因,利用核移植方法创造高产绒量山羊。以我区的白绒山羊为对象,建立胎儿皮肤成纤维细胞系；设计pLOX-EGFP-FGF5、RNAi-FGF5、TALEN-FGF5,三种FGF5基因靶除载体；分别将三种敲除载体 […]

【摘要】CRISPR/Cas系统作为细菌和古细菌的获得性免疫系统,通过RNA介导,特异性的切割外源遗传物质,用以对抗入侵的病毒和质粒。利用Cas9来摧毁入侵DNA的TypeⅡCRISPR/Cas系统,被证明可以在试管中高效切割任一给定的DNA。我们通过密码子优化,合成Cas9基因,通过注射Cas9mRNA和chiRNA到斑马鱼受精卵,发现Cas9可以在斑马鱼受精卵中切割真核基因。在Cas9N端加上 […]