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古菌质粒pRN2的遗传分析与转化操作系统的构建 08月05日

【摘要】冰岛硫化叶菌(Sulfolobusislandicus)REN1H1分离出了两个隐蔽性质粒pRN1和pRN2,两个质粒可能来源于共同的祖先,但复制各自独立。这两个质粒构成有很多的相似之处,都有三个保守的基因:repA,copG和plrA。在质粒pRN1中,repA是一个大的复制蛋白,904个氨基酸,N端编码Primase/Pol活性,C端推测有Helicase活性。Lipps等将RepA克 […]

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利用CRISPR/Cas9进行基因编辑 09月17日

【摘要】CRISPR/Cas系统作为细菌和古细菌的获得性免疫系统,通过RNA介导,特异性的切割外源遗传物质,用以对抗入侵的病毒和质粒。利用Cas9来摧毁入侵DNA的TypeⅡCRISPR/Cas系统,被证明可以在试管中高效切割任一给定的DNA。我们通过密码子优化,合成Cas9基因,通过注射Cas9mRNA和chiRNA到斑马鱼受精卵,发现Cas9可以在斑马鱼受精卵中切割真核基因。在Cas9N端加上 […]