【摘要】第一部分先天性小耳畸形候选致病基因的筛选和验证目的：(1)应用AffymetrixSNP6.0芯片和直接测序验证相结合的方法,筛选先天性小耳畸形的候选致病基因。(2)检测中国TreacherCollins综合征患者TCOF1基因的突变情况。方法：(1)收集先天性小耳畸形患者112例,对其中的3例患者血液基因组进行AffymetrixSNP6.0芯片分析获得候选致病基因,然后在112例患者中 […]

【摘要】大肠癌(Colorectaladenocarcinoma,CRC)是人类消化系统最常见且主要的致死性肿瘤之一。大肠癌是一个多基因、多阶段、长期形成的复杂的病变过程。早发现、早诊断、早治疗对提高结直肠癌的存活率有显著的意义。因此,探索大肠癌早期病变及其演进过程中的分子机制显得尤为重要。近来,微小RNA(microRNA,miRNA)由于其在调控基因表达方面的重要作用,成为关注的焦点。micr […]

【摘要】第一部分SLE患者外周血CD4+T细胞miRNA的表达谱及靶基因预测目的：检测SLE患者外周血CD4+T细胞中miRNA的表达情况,并对差异表达的miRNA进行靶基因预测和功能分析。方法：高通量qPCR方法分别检测9例SLE患者和9例正常对照外周血CD4+T细胞中miRNA的表达水平,TargetScan/miRanda/PicTar等靶基因预测软件和go-pathway分析对差异miRN […]

【摘要】背景:石骨症（Osteopetrosis）是一类以骨密度异常增加为主要特征的罕见骨发育障碍性疾病。该病一般临床表现为骨吸收活动障碍或减弱，钙化的软骨或其他异常骨样组织堆积，骨质脆性增加、硬化，导致骨髓腔变窄甚至消失而出现贫血等症状。自从1904年国外首次报道该病以来，人们研究发现该病的发生和发展与破骨细胞发育及功能障碍存在着密切的关系。多年来，石骨症致病基因诊断以及治疗是该病研究的重点。迄 […]

【摘要】第一部分发育期惊厥性脑损伤后海马miRNA差异表达谱分析目的筛选发育期惊厥性脑损伤后海马差异表达的miRNAs,为进一步探讨miRNA在发育期惊厥性脑损伤发生机制中的作用提供依据。方法健康清洁20日龄SD大鼠16只,随机分为正常对照组和惊厥组,每组8只大鼠。三氟乙醚反复吸入(每天一次,连续6天)制作发育期惊厥模型,对照组除不吸入三氟乙醚外,其他处理同惊厥组。反复惊厥后1d大鼠断头取脑,分离 […]

【摘要】第一章正常胆囊上皮细胞及胆囊癌细胞miRNA差异表达谱的建立目的：通过miRNA芯片技术比较正常胆囊上皮细胞与胆囊癌细胞GBC-SDmiRNA的差异表达谱。方法：培养正常胆囊上皮细胞及胆囊癌细胞GBC-SD,提取细胞总RNA,制作完成芯片,用LuxScan10KA双通道激光扫描仪进行芯片扫描,采用LuxScan3.0图像分析软件对芯片图像进行分析,对差异表达的miRNA进行筛选。选定miR […]

【摘要】第一部分TWIST过表达及干扰稳定细胞系的构建目的：针对不同骨肉瘤细胞中TWIST的表达水平差异,分别构建稳定高表达TWIST基因和稳定干扰TWIST基因的骨肉瘤细胞系,用于后续的功能研究。方法：采用基因克隆构建TWIST真核表达载体pCDNA3.1(+)-TWIST,转染骨肉瘤细胞Saos-2细胞,G418筛选稳定表达细胞系,Westernblot检测获得TWIST稳定高表达细胞系Sao […]

【摘要】第一部分miR-29b在前列腺癌组织中的表达及临床意义目的：探讨miR-29b在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：用实时定量PCR技术检测10例前列腺癌(PCa)及癌旁非肿瘤组织中miR-29b的表达情况,研究其与PCa病理分期、分级之间的关系。结果：10例前列腺癌组织(prostatecancer,PCa)与配对的癌旁非肿瘤组织相比,miR-29b在PCa中的表达明显下调,有统计学 […]

【摘要】第一部分一个新microRNA的克隆及其在破骨细胞分化过程中作用的研究目的：筛选新的小鼠破骨细胞特异性表达或优势表达的microRNA,研究其在小鼠体内不同组织和细胞的表达谱及在破骨细胞分化过程中的作用。方法：将小鼠原代成骨细胞与骨髓细胞共同培养获得原代破骨细胞,分离并克隆细胞内所有小RNA,并与已知的小RNA进行比对鉴定了一个新的microRNA,提交miRBase数据库注册后命名为mi […]

【摘要】第一部分MiR-142-5p高表达或抑制转基因小鼠模型的建立目的：建立miR-142-5p在骨组织内特异性高表达及抑制的转基因小鼠模型,以进一步分析miR-142-5p在小鼠体内对骨折愈合的影响。方法：(1)、首先合成pre-miR-142和miR-142-5psponge序列,序列两端包含SalⅠ和EcoRⅠ酶切位点,插入到本实验室保存的含骨钙素启动子的表达质粒(pOG2-Cre-hGH […]