茶多酚结合壳聚糖对冷藏大黄鱼肌肉蛋白质的影响

【摘要】大黄鱼(Pseudosciaenacrocea,largeyellowcroaker)是我国近海重要的经济鱼类。大黄鱼肉质细嫩鲜美,肌肉中蛋白质和不饱和脂肪酸含量高,深受人们喜爱。但由于其较高的含水量容易导致腐败变质。所以如何客观、快速评价鱼类新鲜度,以及如何延长其货架期已成为水产领域亟待解决的课题。鱼类等水产品传统的评价方法主要包括感官评价及微生物、物理、化学小分子物质等指标的检测。众所周知,蛋白质是构成鱼类肌肉的重要组成部分,水产品的品质劣变在很大程度上和蛋白质的变性、降解密切相关。目前关于鱼类等水产品在贮藏过程中蛋白质变性及降解规律研究仍较少,将蛋白质作为水产品鲜度评价方法鲜有报道。本课题以养殖大黄鱼为研究对象,分析茶多酚结合壳聚糖复合保鲜剂对冷藏大黄鱼肌肉蛋白质的影响,研究内容如下：(1)研究大黄鱼在贮藏过程中肌原纤维蛋白的生化特性和肌肉组织微观结构的变化,为有效开发水产品保鲜剂以及肌肉品质变化提供依据和参考；(2)用SDS-PAGE分析大黄鱼肌肉中各类蛋白质的变化,探讨茶多酚和壳聚糖对大黄鱼在贮藏过程中蛋白质的影响；(3)运用蛋白质组学技术研究大黄鱼肌肉中蛋白质的变化规律,筛选并鉴定新鲜度指示蛋白。主要结论如下：1.随着贮藏时间的延长,大黄鱼肌肉中肌原纤维蛋白的溶出量,Ca2+-ATPase舌性,“4℃”、“0℃”组的巯基含量显著下降,“4℃+保鲜剂”和“0℃+保鲜剂”组的巯基含量基本保持不变；“4℃”和“0℃”组的肌原纤维蛋白表面疏水性在贮藏初期迅速增加,然后趋于平缓,而“4℃+保鲜剂”和“0℃+保鲜剂”组在前期变化不显著,后期显著增加。肌原纤维蛋白溶出量及其Ca2+-ATPase活性的下降可能是由于巯基氧化生成二硫键引起的；表面疏水性的增加,使蛋白质分子内部疏水基团上的巯基暴露而发生氧化。茶多酚和壳聚糖能直接或间接地延缓疏水基团的暴露和巯基的氧化,且温度越高,肌原纤维蛋白变性越快。另外,大黄鱼肌肉组织微观结构也发生了明显变化,肌纤维面积比例减少,间隙面积比例增加,特别是贮藏初期变化较快,之后趋于平缓。表明低温结合茶多酚和壳聚糖对大黄鱼肌肉肌原纤维蛋白的变性和组织微观结构的劣变具有一定抑制作用。2.大黄鱼肌肉中的蛋白质分子量主要分布在6.5-200.0kDa之间。总可溶蛋白中24.1kDa、21.2kDa和高盐溶性蛋白中40.3kDa、33.4kDa、30.3kDa、25.4kDa处条带的相对光密度值到贮藏末期都出现了不同程度的下降。在水溶性蛋白中85.6kDa和22.2kDa处条带的相对光密度值也在减小,“4℃”和“O℃”组的77.7kDa和33.5kDa处条带的相对光密度值在初始阶段迅速减小,然后趋于平缓。在低盐溶性蛋白中,94.9kDa、41.7kDa、36.6kDa、26.6kDa和19.8kDa处条带的相对光密度值随着贮藏时间延长,其含量明显减小。这些条带代表的蛋白质或肽类都可以作为大黄鱼冷藏过程中潜在的新鲜度指示蛋白。TCA可溶性肽含量随着贮藏时间延长而逐渐增加,且与贮藏时间呈现较好的线性正相关,可以作为评价大黄鱼新鲜度品质变化的潜在指标。总之,低温、茶多酚和壳聚糖在抑制蛋白质降解上表现出一定的选择性。3.运用双向电泳技术分别筛选到“4℃+保鲜剂”和“0℃+保鲜剂”两组大黄鱼在贮藏过程中的19个和21个差异蛋白点,总体来说,多数差异蛋白质的含量随着贮藏时间的延长显著减少,只有部分蛋白质出现增加,从这些条带的变化趋势中可以推断出茶多酚和壳聚糖能抑制蛋白质的变性和降解。通过质谱鉴定出两种蛋白,与红鳍东方鲀(Takifugurubripes)的结蛋白(Desmin)、斑马鱼(Daniorerio)的84-锌指蛋白(ZincFingerProtein84-like)同源性高。这两种蛋白以及未能鉴定出的其它差异蛋白点均有望作为大黄鱼冷藏过程中的新鲜度指示蛋白。
【作者】倪渠峰；
【导师】傅玉颖；
【作者基本信息】浙江工商大学，食品科学与工程，2014，硕士
【关键词】养殖大黄鱼；壳聚糖；茶多酚；肌肉蛋白质；新鲜度指示蛋白；SDS-PAGE；双向电泳；蛋白质组学；

【参考文献】
[1]黄慧.空气中苯系物检测及其污染防治[D].中南民族大学,分析化学,2013,硕士.
[2]宋宝荣.肿瘤标记物在结直肠癌预后和疗效预测中的研究[D].复旦大学,肿瘤学,2012,硕士.
[3]齐瑞普,袁旭光.首钢水厂铁矿搭建技术信息管理平台[J].冶金自动化,2009,03:15.
[4]李素玉.新式非脱垂子宫经阴道全切术的临床应用[D].福建医科大学,妇产科,2013,硕士.
[5]欧阳玉,陈爱美,蔡祥,谭绍早,施庆珊,欧阳友生.PluronicF127-石墨烯-锌离子复合物的制备及表征[J].材料保护,2014,S1:16-19.
[6]谭荣华,袁有杰.应用数据仓库可以给我们带来什么[J].中国管理信息化,2005,09:48-51.
[7]杨彦海.波形钢腹板箱梁徐变分析[D].北京交通大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[8]那姝姝.罗布泊强氯盐渍土溶陷性、盐—冻胀性试验研究[D].新疆农业大学,水利水电工程,2012,硕士.
[9]李敏.PSE公司市场营销策略研究[D].华东理工大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[10]李霞.快速城市化地区人地相互作用的特征及其空间效应[D].湖南师范大学,人文地理学,2014,硕士.
[11]瞿骥杭.HIS中客户关怀系统设计和研究[D].浙江大学,管理科学与工程,2003,硕士.
[12]刘闯.基于生物矿化原理的纳米复合材料制备及其应用研究[D].天津大学,生物分子工程,2013,硕士.
[13]王爱军,康玉璞.房地产开发项目档案管理初探[J].档案学研究.1993(01)
[14]李婧.我国公共危机管理中政府信息公开问题研究[D].长安大学,行政管理,2014,硕士.
[15]陈焕.上市公司经营绩效的持续性[D].南京大学,金融学,2013,硕士.
[16]席清平.五倍子水提取物对菌斑生物膜影响的体外研究[D].第四军医大学,口腔临床医学,2004,硕士.
[17]康岸彬.A公司中层管理人员绩效考核方案优化研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[18]李霞.克尔凯郭尔理性与信仰关系的研究[D].西北师范大学,外国哲学,2013,硕士.
[19]徐少毅,秦新涛.基于LTE的窄带M2M通信系统覆盖增强研究[J].北京交通大学学报,2015,02:86-92.
[20]李嫱.干旱胁迫和旱后复水对翠菊生长发育影响的研究[D].吉林农业大学,园林植物与观赏园艺,2012,硕士.
[21]尚思薇.开发性金融对陕西省新型城镇化的支持研究[D].西北大学,金融（专业学位）,2014,硕士.
[22]程蕾蕾.超声新技术评价心肌灌注与心脏同步性的实验和临床研究[D].复旦大学,内科学,2011,博士.
[23]周文渊.牛奶介质中混合菌生物被膜形成特性及其抑制的研究[D].广东工业大学,生物化工,2014,硕士.
[24]孙涌.三联印务公司经营战略研究[D].大连理工大学,工商管理,2003,硕士.
[25]周薇,胡晓龙,赵小蓉,贾漫珂,黄应平,方艳芬.石墨烯-溴氧化铋复合物的制备及可见光光催化性能研究[J].分子催化,2014,04:367-375.
[26]魏庆朝,闫松涛,时瑾,杨娜.基于GA-BPNN的铁路站房结构工程投资估测研究[J].铁道工程学报,2014,05:95-100.
[27]徐平.海面溢油数值模拟及其遥感图像处理的研究[D].江苏科技大学,电子与通信工程（专业学位）,2014,硕士.
[28]蔡晓林.我国政府审计体制问题研究[D].山东大学,公共管理（专业学位）,2012,硕士.
[29]葛赢超.金贝：一个东南畲村的社会与文化[D].厦门大学,中国少数民族史,2014,硕士.
[30]朱文龙.BDO蒸馏废液回收工艺的研发[D].重庆大学,化学工程与技术,2014,硕士.
[31]李燕.折衷法在大学英语教学中的探索和应用[D].华东师范大学,英语语言文学,2003,硕士.
[32]吴淼.基于数据挖掘技术的图书馆借阅记录分析研究[D].西安电子科技大学,计算机应用技术,2011,硕士.
[33]王晓阳.李白流夜郎遇赦心态与诗歌研究[D].首都师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[34]梅洋.一汽大众公司中国公益营销策略研究[D].吉林大学,工商管理,2012,硕士.
[35]汪洪涛,刘文才.数据挖掘技术关联规划算法在营销策略中的应用[J].工业控制计算机,2003,09:9-10.
[36]王云鹏.三相逆变器并网与孤岛运行控制技术研究[D].燕山大学,电气工程,2012,硕士.
[37]瞿寿德,穆志纯.随动系统的奇异最优控制[J].自动化学报,1986,01:76-81.
[38]罗佳怡.苏州市姑苏区街道办事处职能转变研究[D].苏州大学,公共管理（专业学位）,2014,硕士.
[39]李亚萍.从中华全国木刻界抗敌协会到中国木刻研究会[D].西南大学,美术学,2014,硕士.
[40]齐俊杰.水溶性刺激响应碳纳米角的制备与表征[D].天津大学,2010.
[41]孙伟.污染物的微生物降解动力学及定量结构性质关系预测的新概念、新算法研究[D].湖南大学,2004.
[42]郑红.论西方中世纪封建宪政思想[D].辽宁师范大学,政治学理论,2003,硕士.
[43]伍昭春.用DFT和ABEEMσπ对不同形状单层石墨烯结构的研究[D].辽宁师范大学,2011.
[44]杨磊.民族地区政治发展研究[D].内蒙古大学,政治学理论,2014,硕士.
[45]徐炜.大型空间光学遥感器反射镜及其组件的分析与优化[D].中国科学院研究生院（长春光学精密机械与物理研究所）,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[46]安海燕.试析连环画版《白鹿原》中的人物服饰刻画方法[D].河北科技大学,设计艺术学,2014,硕士.
[47]穆杉杉.重庆木洞“禾籁”研究[D].西南大学,音乐与舞蹈学,2013,硕士.
[48]张素转.Mg-8Gd-3Y-1Nd-0.5Zr镁合金均匀化及热变形行为研究[D].中北大学,材料工程,2014,硕士.
[49]龚炳铮.积极稳步推进企业信息化[A].中国电子学会.中国电子学会第七届学术年会论文集[C].中国电子学会:,2001:6.
[50]卞春晓.面对教学模式更新的高校教学建筑环境设计研究[D].大连理工大学,美术学,2013,硕士.