【摘要】自噬，是细胞分解胞内废用的细胞器及蛋白进行重新再利用的过程，细胞通过这种作用维持细胞内的稳态，实现自我平衡。研究表明，自噬对多种实体肿瘤的发生、发展、侵袭及转移发挥重要的作用。当细胞在面对乏氧、饥饿、病原体感染、电离辐射（IonizingRadiation，IR）及药物作用等应激条件下，就会诱导自噬发生，通过分解细胞内废用细胞器及长寿蛋白后重新利用，从而维持细胞的正常功能。在实体肿瘤的研究 […]

【摘要】研究背景：糖尿病肾病（diabeticnephropathy,DN）作为糖尿病的主要并发症之一，是危及糖尿病患者生命的主要因素。糖尿病肾病临床早期主要表现为尿微量白蛋白的排出，随之发展为慢性肾功能不全，进而导致肾衰，但糖尿病肾病发生的机制非常复杂，所以探索糖尿病肾病的具体机制具有重要的意义。研究显示，糖尿病肾病发病机制与细胞自噬（autophagy）及细胞外基质沉积密切相关。TGF-β1是 […]

【摘要】目的：研究miR-30d对未分化型甲状腺癌（ATC）细胞顺铂治疗敏感性的影响，并探讨其内在分子机制。方法：利用miR-30dmimic使miR-30d低表达的ATC细胞过表达miR-30d，采用细胞生物学、分子生物学、药理学和动物实验学等多种方法研究：1）miR-30d对细胞自噬的影响及其内在调控机制；2）在体外（细胞水平）和体内（动物水平）研究miR-30d介导的自噬激活对化疗药物顺铂治 […]

【摘要】目的：本文旨在探讨奥氮平（olanzapine）的抗胶质瘤作用及其可能的作用机制。方法：体外实验选用胶质瘤T98和LN229细胞。MTT法检测不同浓度的奥氮平（0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mΜ），作用不同时间后对两个胶质瘤细胞株的增殖的影响。Westernblot检测自噬相关蛋白LC3、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2的变化，免疫荧光检测自噬荧光颗粒的形成与分布情况。H […]

【摘要】目的：本实验室前期工作发现RIP1K特异性抑制剂Necrostatin-1(Nec-1)及RIP1K基因沉默均可显著减少大鼠及小鼠永久性大脑中动脉阻塞(permanentmiddlecerebralarteryocclusion,pMCAO)诱导的脑梗塞体积，明显改善神经症状。本文进一步探讨RIP1K是否通过激活自噬-溶酶体信号途径参与缺血性脑中风诱导的神经元necroptosis。方法： […]

【摘要】目的：我们的前期研究发现内质网应激诱导自噬介导了缺血预适应的神经保护作用，本研究旨在探索在神经细胞缺血预适应模型中，内质网分子伴侣GRP78与自噬激活之间的内在联系。方法：培养大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤(pheochromocytomacells,PC12cells)细胞系和原代鼠皮层神经元，建立缺血预适应(ischemicpreconditioning,IPC)和缺氧缺糖(oxygen-g […]

【摘要】目的：研究奥氮平（Olanzapine,OLA）对rotenone诱导多巴胺（dopamine,DA）能神经元损伤的保护作用及其可能的机制。方法：（1）细胞实验：首先检测olanzapine对PC12细胞的毒性作用，采用Westernblot检测olanzapine对p-AMPK以及自噬相关蛋白LC3，p62，p70-s6k的影响，免疫荧光染色检测LC3的变化。采用0.5μMrotenon […]

【摘要】第一部分Beclin1基因的选择性剪接研究目的：研究儿童急性B淋巴细胞白血病697细胞系中的Beclin1基因的选择性剪接及其对自噬的调控作用。方法：（1）提取697细胞系的总RNA，逆转录成cDNA。（2）在Beclin1基因的ORF区的起始密码子上游和终止子的下游设计引物，以cDNA为模板，进行PCR扩增、测序和比对。（3）分析剪接体Del-E11产生的分子机制。（4）构建GFP-剪接 […]

【摘要】目的：自噬是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制而被降解的过程，其中包括细胞器、衰老及错误折叠或破损的蛋白质等。在不同的状况下，自噬可以引起细胞的死亡，也可以促进细胞生存。研究表明，自噬在脑出血（intracerebralhemorrhage,ICH）后被激活。造成脑出血后继发的神经功能缺损的主要原因包括脑出血后脑血肿周边脑水肿的形成和继发的神经细胞死亡。本研究中，我们分别应用了自噬的抑制 […]

【摘要】目的：在小鼠脑出血模型中，研究程序性坏死的特异性抑制剂necrostatin-1对脑出血引起的大脑损伤作用，探讨necrostatin-1对另外两种程序性细胞死亡方式（凋亡和自噬性细胞死亡）的影响。方法：采用胶原酶IV注入雄性ICR小鼠左侧纹状体建立脑出血（intracerebralhemorrhage,ICH）模型。在术前15min分别通过单侧侧脑室给药，并在伤后不同时间处死。首先利用组 […]