奥氮平通过诱导自噬抑制胶质瘤增殖

【摘要】目的：本文旨在探讨奥氮平（olanzapine）的抗胶质瘤作用及其可能的作用机制。方法：体外实验选用胶质瘤T98和LN229细胞。MTT法检测不同浓度的奥氮平（0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mΜ），作用不同时间后对两个胶质瘤细胞株的增殖的影响。Westernblot检测自噬相关蛋白LC3、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2的变化，免疫荧光检测自噬荧光颗粒的形成与分布情况。Hoechst33258染色以及AnnexinV-FITC/PI实验检测不同浓度奥氮平处理后，两个细胞凋亡的情况。MTT和集落形成实验分析自噬抑制剂3MA对奥氮平抑瘤作用的影响。LN229细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型，口服给以奥氮平，绘制肿瘤体积生长曲线，观察奥氮平抑制肿瘤生长的作用。Westernblot检测肿瘤组织中自噬相关蛋白LC3、p62和凋亡相关蛋白Bcl-2的表达的情况。免疫组化分析法分析各组移植瘤中增殖指数Ki-67和凋亡相关蛋白caspase-3的表达情况。结果：MTT结果显示，奥氮平对两株胶质瘤细胞LN229和T98均有抑制作用，且呈剂量依赖性和时间依赖性。LC3、p62的蛋白表达情况以及免疫荧光检测LC3的颗粒形成与分布情况都显示奥氮平能够在这两株细胞中诱导自噬。Westernblot分析Bcl-2蛋白表达、Hoechst33258染色实验以及V-FITC/PI染色实验表明，奥氮平能够促进LN229和T98细胞凋亡。MTT和集落形成实验表明，自噬抑制剂3MA减弱了奥氮平对这两株细胞的增殖抑制作用。裸鼠皮下移植瘤体积曲线说明，奥氮平能够在体内抑制胶质瘤的生长。Westernblot分析移植瘤的Bcl-2蛋白表达，显示奥氮平能够促进移植瘤凋亡；LC3和p62蛋白表达显示，高剂量奥氮平在体内皮下移植瘤中诱导自噬。免疫组化分析移植瘤组织中Ki-67和caspase-3阳性表达结果显示，奥氮平抑制裸鼠皮下移植瘤的增殖并且促进其凋亡。结论：奥氮平在体外、体内都能够抑制胶质瘤的生长。其抗胶质瘤作用的机制与自噬诱导相关。自噬的诱导促进了胶质瘤细胞的死亡。
【作者】王逸璇；
【导师】梁中琴；
【作者基本信息】苏州大学，药理学，2014，硕士
【关键词】奥氮平；自噬；凋亡；胶质瘤；移植瘤；

【参考文献】
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