VHL-/-肾细胞癌肿瘤形成过程中HIF2α靶基因作用研究

VHL-/-肾细胞癌肿瘤形成过程中HIF2α靶基因作用研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-06-28 分类:开题报告 喜欢:4133
师大云端图书馆

【摘要】研究目的:约70%的肾透明细胞癌存在VHL等位基因的失活、表达缺失(表现为基因突变、缺失及启动子甲基化等),表明VHL基因突变(VHL-/-)在肾细胞癌的形成过程中具有重要的作用。VHL基因蛋白产物(pVHL)可与HIF结合,使HIF泛素化被蛋白水解酶降解。VHL-/-肾细胞癌细胞系786-O由于VHL的表达缺失而导致细胞内HIF-2a大量累积,后者可进一步诱导百余种缺氧适应基因(HIF-2α下游靶基因)的表达。本研究的目的在于探讨VHL-/-肾细胞癌肿瘤形成过程中HIF-2a下游靶基因的作用,寻找潜在的治疗靶点,为肾细胞癌诊断、治疗及预后提供理论依据。研究方法:1.应用半定量QPCR技术在1nRNA水平验证在786-0细胞(786-OVHL+/+,786-0VHL-/-,786-0HIF2adepleted[VHL-/-HIF566],786-OHIF2adepleted[VHL-/-HIF1631],VHL+/+HIF2a-dPA[active],VHL+/+HIF2a-PA-dTA[inactive])由单一的有活性的HIF-2a诱导表达升高的基因;2.应用RNAi技术,慢病毒介导shRNA沉默特定HIF下游靶基因;3.对稳定转染相应shRNA的细胞进行WesternBlot,RealTimeRCR或者Elisa验证其是否成功抑制该基因的表达;4.体外增殖实验及裸鼠体内成瘤实验,研究特定HIF2a下游靶基因对VHL-/-肾细胞癌肿瘤形成的作用。结果:1.体内及体外实验证实HIF对VHL-/-的肾细胞癌成瘤十分重要。2.在786-0细胞中,HIF转录活性紧密调控着VEGF,CCND1,EN02,EglN3,ANGPTL4,Glut-1,IGFBP3,HIG2,CA12,MTUS1,ZNF395,CP,MXI-1,ARRDC3,Serpinel,Apol1,DDIT4,DUSP1等基因的表达。3.抑制VEGF,CCND1的表达可以抑制VHL-/-肾细胞癌生长,提示它们是促癌基因;抑制ANGPTL4,EGLN3或EN02的表达并不影响VHL-/-肾细胞癌生长;GLUT1或IGFBP3表达缺失明显促进VHL-/-肾细胞癌生长,提示它们有一定的抑瘤作用。4.抑制IGF1R蛋白表达导致IGFBP3在mRNA和蛋白水平表达的显著增加,并抑制肿瘤生长,提示IGF1R是潜在的肾细胞癌治疗靶点。结论:1.HIF-2α对VHL-/-肾细胞癌成瘤至关重要,但HIF下游靶基因的表达对肾癌细胞生长的作用则可表现为促进、抑制亦或没有影响;通过对HIF-2α下游靶基因的研究可以发现潜在的VHL-/-肾细胞癌治疗靶点或诊断及预后指标。2.沉默IGF1R能够抑制肾细胞癌细胞系786-0成瘤,提示IGF1R是潜在的肾细胞癌治疗靶点,其作用的发挥可能通过上调IGFBP-3而实现,为进一步明确VHL-HIF-HRGs调节肿瘤发生发展的机制提供了新的思路。
【作者】张婷;
【导师】畅继武;
【作者基本信息】天津医科大学,外科学,2011,博士
【关键词】VHL;HIF;肾肿瘤;肿瘤形成;RNA干扰;

【参考文献】
[1]芮慧慧.安徽省农业产业升级及科技保障研究[D].安徽农业大学,产业经济学,2012,硕士.
[2]吉根林,赵斌,孙志挥.利用Hash树生成频繁项目集的新方法[J].小型微型计算机系统,2004,10:1841-1843.
[3]王辉.六种柴胡类药用植物生长动态与采收期研究[D].甘肃农业大学,药用植物资源利用,2013,硕士.
[4]许星.物流配送路径优化问题的研究[D].浙江大学,2006.
[5]秦利平.咔唑衍生物有机共轭共聚物的合成研究[D].山西大学,有机化学,2004,硕士.
[6]许建武.物联网核心技术的专利主体测度及其发展对策[D].大连理工大学,科学学与科技管理,2013,硕士.
[7]向飞.热熔胶自动装盒机关键部件的设计与研究[D].广东工业大学,机械工程(专业学位),2014,硕士.
[8]林鑫.基于视频的车流量检测系统研究[D].贵州民族大学,概率论与数理统计,2013,硕士.
[9]金斌华.网络隐私权—网站的角色[D].华东政法学院,法律,2004,硕士.
[10]高枫舒.基于语料库的高中英语教材词汇评估[D].沈阳师范大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[11]刘利国.基于XML的异构数据库系统集成[D].武汉理工大学,系统工程,2003,硕士.
[12]刘小进.原子力显微镜控制电路及其信号完整性研究[D].沈阳理工大学,2013.
[13]李宪英.面向BIRIS-Cloud的资源管理框架的研究与实现[D].哈尔滨工业大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[14]孙林.高速铁路复合地基沉降分析研究[D].西南交通大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[15]赵珊.路面车辙检测系统中结构光三维测量技术的研究[D].南京理工大学,光学工程,2013,硕士.
[16]雷军.非物质文化遗产保护中的政府管理研究[D].长安大学,行政管理,2013,硕士.
[17]伍振兴,胡炜.TD-SCDMA系统外环功控分析[J].现代电信科技.2006(06)
[18]靳凤侠,黄天民.区间数判断矩阵满意一致性的判定方法和方案的排序[J].控制与决策,2013,03:451-455.
[19]胡巍巍.密植超高产夏玉米冠层辐射特征及光合特性研究[D].河南农业大学,植物学,2012,硕士.
[20]阎崇光.新型无机非金属矿物材料作为绿色材料在工业4.0中的应用前景[A].中国科学技术协会、广东省人民政府.第十七届中国科协年会——分15 新兴绿色产业的科技创新与投融资国际研讨会论文集[C].中国科学技术协会、广东省人民政府:,2015:4.
[21]金静.篇章语言学对比研究德、汉家电产品说明书[D].青岛大学,德语语言文学,2013,硕士.
[22]汪满昌.大学生心理健康教育:成就、困境、出路[D].河海大学,高等教育学,2004,硕士.
[23]黄思敏.基于PDF文件的信息隐藏技术研究[D].湖南大学,计算机科学与技术,2011,硕士.
[24]闫帅军.石墨烯纳米器件的设计和电学性质研究[D].南京邮电大学,集成电路工程(专业学位),2013,硕士.
[25]蔡雪梅.夫妻家庭暴力的民事法律规制[D].大连海事大学,法律,2013,硕士.
[26]李娇.基于消费者意象的篮球鞋造型设计研究[D].华侨大学,机械工程,2014,硕士.
[27]钟杰.光伏并网逆变器MPPT及双闭环控制技术研究[D].西南交通大学,电力电子与电力传动,2013,硕士.
[28]王明达.论图式理论对口译教学的影响[D].上海外国语大学,英语语言文学,2012,硕士.
[29]洪文昕.重症登革热的预警指征及其发病影响因素研究[D].广州医科大学,内科学,2013,硕士.
[30]陈皓勇,付超.统一价格和PAB竞价的实验分析[J].电力系统自动化,2007,04:12-17.
[31]杭璐婷.案例视野下保险人说明义务司法适用研究[D].上海大学,民商法学,2014,硕士.
[32]张学平.会计诚信问题研究[D].四川大学,2004.
[33]张武军,何奔腾,张波.行波差动保护线路参数不确定性影响[J].电力系统自动化,2008,03:42-47+81.
[34]韩宇笛.基于GIS的长春市区域建设用地节约集约利用状况评价研究[D].吉林大学,土地资源管理,2014,硕士.
[35]梅俊雷.高中生数学学习动机的调查研究[D].西南大学,基础数学,2014,硕士.
[36]江广兰.有序大孔—介孔TiO_2复合材料的制备及其性能研究[D].大连理工大学,2014.
[37]杨曌照.基于轨道交通换乘的公共自行车租赁点选址与需求研究[D].华南理工大学,交通运输规划与管理,2014,硕士.
[38]李莹.驻缅中资企业档案数字化问题研究[D].山东大学,档案学,2013,硕士.
[39]魏巍.服务型政府视域下的我国公务员队伍建设对策研究[D].长春工业大学,行政管理,2013,硕士.
[40]乔飞.法律语体中的能愿动词研究[D].华中师范大学,语言学及应用语言学,2013,硕士.
[41]肖斌.自动机器人控制系统的研究[D].南昌大学,机械电子工程(专业学位),2012,硕士.
[42]邓晖飞.基于市场预测的生产计划优化研究[D].广东工业大学,机械工程,2014,硕士.
[43]徐娇.网织血小板与心房颤动关系的初步探讨[D].大连医科大学,内科学,2012,硕士.
[44]杨磊.矿质元素对半夏生长和品质的影响研究[D].南京农业大学,中药学,2009,硕士.
[45]黄静丽.旅游合同违约之精神损害赔偿问题研究[D].西南政法大学,民商法学,2012,硕士.
[46]秦露露.脂肪酸的表面性能及其在无机填料表面改性的应用研究[D].西北大学,分析化学,2014,硕士.
[47]张昕,郑晓东.裂缝发育带地震识别预测技术研究进展[J].石油地球物理勘探,2005,06:724-731+21.
[48]苟倩.乡村旅游背景下的传统村镇滨水景观设计研究[D].重庆大学,景观建筑学,2014,硕士.
[49]彭玉娟.酸枣镇魂汤治疗失眠症(心肝血虚型)的临床研究[D].湖南中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[50]段良峰.同频被动接收机测试系统研制[D].哈尔滨工业大学,仪器科学与技术,2014,硕士.

相关推荐
更多