遗传性全白甲症相关致病基因扩增及突变位点分析

【摘要】目的：目前对于遗传性全白甲症研究较少。国内有学者分别研究了角蛋白17基因突变与遗传性全白甲临床表型的关系；同时，还分析了常染色体显性遗传全白甲病家系的候选基因KLF7和CPO的突变；选取V晶状体蛋白基因-CRYGA、CRYGB、CRYGC、CRYGD作为候选基因进行基因扩增为后续突变筛查做准备，探讨四种基因与遗传性全白甲家系发病的相关性。排除了基因编码区域及附近内含子变异而导致此全白甲家系的致病基因突变。针对遗传性全白甲症致病基因尚未确定，本研究提出对3p22.2位点邻近硬角蛋白基因行突变筛查，以确定致病基因并行相关的形态学研究。方法：通过提取全基因组DNA，对3p22.2位点周围角蛋白基因进行引物设计、PCR扩增及扩增产物检测，然后测定其DNA序列，并与基因库中正常基因序列进行比较，若筛查到其中基因突变位点，会确定致病基因；同时，进行系列形态学研究，通过组织病理学、免疫组化等研究患甲形态及角蛋白表达方面的改变。结果：1、遗传性全白甲症相关基因PLCD1引物设计成功。2、遗传性全白甲症相关基因PLCD1扩增成功。3、遗传性全白甲症相关基因PLCD1在本家系未发现突变。结论：本研究提取了3p22.2位点中扩增的PLCD1产物，对于引物序列、扩增片段、长度及相应复性温度，设计成功。为下一步扩增产物测序，以及发现致病基因突变做了必要的、有效的前期工作。研究表明对于指甲生长的分子控制和开发3p22.2位点基因，以确定该基因参与了遗传性全白甲症，说明一个在人类的遗传基因中全新的指甲生长基因的重要性。通过设计3p22.2位点中扩增的PLCD1产物，从而研究遗传性全白甲症相关角蛋白基因基因突变筛查，对于我们研究整个角蛋白疾病都有一定作用，同时具有重大社会价值，尤其是为我国人群基因水平研究积累了基础资料。只有了解角蛋白广泛存在于人类的上皮细胞中，才能确定遗传性皮肤病与角蛋白基因突变有关。角蛋白表达及结构异常导致的遗传性及非遗传性疾病对人类健康有严重影响。综上所述，为本研究总结以下几点：1、本研究在所定位的遗传性全白甲致病基因范围内选取PLCD1的Exon2-15各外显子进行突变筛查，以遗传性全白甲家系内患者的血清DNA为模板，对以上15个外显子之间内含子区域内的碱基标准序列未见异常，扩增产物分别出现的纯合和杂合也未见异常，以上各类型碱基未参与编码氨基酸，故未检测突变位点。2、研究初步排除了PLCD1基因与该家系全白甲的相关性，未发现PLCD1基因的突变。3、遗传性全白甲的致病突变可能存在于所定位范围内的其他候选外显子之间的内含子区域内，需进一步的筛查分析。因此，提出对3p22.2位点基因邻近角蛋白基因进行基因突变筛查，尤其是对基因突变热点进行详细研究，确定遗传性全白甲症致病基因，为甲病及角蛋白相关性疾病的研究奠定基础。同时；对于其他疾病的发生、发展及治疗中起到重要作用，揭示在人类身上控制指甲的生长有关的基因。
【作者】董慧民；
【导师】张亚芹；
【作者基本信息】吉林大学，临床医学，2014，硕士
【关键词】遗传性全白甲症；PLCD1；基因测序；基因突变；

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