供肝冷保存不同时限对肝内胆管上皮细胞凋亡及Bcl-2、Fas表达的影响

【摘要】目的：观察供肝不同冷保存时限对胆管上皮细胞凋亡的影响；检测凋亡相关蛋白Bcl-2与Fas在不同冷保存时限供肝胆管上皮细胞表达的变化；探讨Bcl-2与Fas在胆管上皮细胞凋亡中的意义；探索冷保存下供肝的安全时限，为减少肝移植中胆道系统并发症的发生，提高肝移植成功率提供依据。方法：健康雄性SD大鼠36只，随机分6组，每组6只，未冷灌注的1组设为对照组，根据供肝灌注后冷保存时间分5组分别为1h、3h、6h、12h和24h组。UW液灌注腹主动脉及胆总管后，活体取肝脏组织保存于4℃的UW液中，按照分组分别保存不同时限。显微镜和透射电镜观察胆管上皮细胞及细胞内线粒体、内质网、高尔基体等细胞器的变化；免疫组织化学方法检测胆管上皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Fas的表达。结果：1、显微镜下结果：对照组、1h组、3h组的胆管立方上皮细胞均无明显变化，6h组的胆管立方上皮细胞出现轻度肿胀，12h组的胆管立方上皮细胞出现肿胀，同时存在胞浆空泡化，细胞核出现轻度增大，24h组的胆管立方上皮细胞出现肿胀，胞浆空泡化，细胞核出现肿大，汇管区出现少量炎细胞浸润；2、透射电镜观察结果：对照组、1h组、3h组胆管立方上皮细胞表面绒毛清晰可见，排列整齐，胞质内存在大量的内质网及线粒体，存在少量的高尔基体，内质网、线粒体、高尔基体形态规整，无明显变化，6h组的胆管立方上皮细胞的表面绒毛稍有紊乱，较丰富，较对照组有所减少，胞质内的线粒体、内质网、高尔基体形态规整，无明显变化，12h组的胆管立方上皮细胞绒毛减少，排列出现轻度紊乱，细胞质内的线粒体轻度肿胀，内质网扩张，高尔基体增大，24h组的胆管立方上皮细胞表面绒毛减少，排列紊乱，部分线粒体嵴出现断裂，部分线粒体空泡化改变，内质网肿胀严重，部分内质网出现空泡，少量内质网出现破裂，高尔基体大部分出现了扁平囊的扩张，同时伴随着扁平囊、大泡和小泡的崩裂溶解；3、免疫组化结果：Bcl-2在对照组、1h组、3h组、6h组的胆管立方上皮细胞中的表达较低，12h组高表达，24h组低表达；Fas在对照组、1h组、3h组、6h组的胆管立方上皮细胞中的表达低，12h组高表达，24h组低表达。结论：1、随着冷保存时间的延长，胆管上皮细胞对缺血、缺氧耐受性较肝细胞更差，提示在肝移植中胆管上皮细胞变化的要早于肝细胞。2、缩短供肝冷保存时间，可有效的降低肝移植术后胆道并发症的发生，12h内可能是肝移植的安全时限。3、凋亡相关蛋白Bcl-2和Fas在肝移植供肝冷保存胆管细胞的损伤中可能发挥着重要的作用。
【作者】杨士明；
【导师】杨玉龙；
【作者基本信息】大连大学，外科学，2014，硕士
【关键词】肝移植；冷保存；胆道并发症；Bcl-2；Fas；

【参考文献】
[1]刘原厂.基于DSP的调试系统的研究与实现[D].西安电子科技大学,计算机软件与理论,2011,硕士.
[2]韩星宇.人民币实际汇率变动对我国外商直接投资的影响[D].山西财经大学,金融学,2014,硕士.
[3]赵扬,胡传刚,曲良体.三维纳米网络多孔状结构的石墨烯泡沫的制备及其应用[A].中国化学会.中国化学会第29届学术年会摘要集——第27分会：多孔功能材料[C].中国化学会:,2014:1.
[4]崔乃松.针康法对脑缺血大鼠运动功能及缺血区皮质Nogo-A表达的影响[D].黑龙江中医药大学,康复医学与理疗学,2013,硕士.
[5]沙学富,王维国,李文涛.喷焊辊子加工技术研究[J].一重技术.2002(Z1)
[6]汪永喜.海绵钛中硅、铁、锰、镁的原子光谱分析方法研究[D].兰州大学,化学工程,2014,硕士.
[7]王新宇,杜孝平,谢昆青.FP-growth算法的实现方法研究[J].计算机工程与应用,2004,09:174-176.
[8]王胜权.PDI单抗对创伤性深静脉血栓形成大鼠体内组织因子活性的影响[D].山西医科大学,血管外科学,2013,硕士.
[9]李伟.论WTO争端解决机制的发展与改革[D].中国政法大学,国际法学,2004,硕士.
[10]苏健.基于GIS的交换机运行状态监测系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,软件工程,2011,硕士.
[11]孙世元.耐久型拒水PP/PE低熔点热粘合复合纤维的制备及性能研究[D].青岛大学,纺织工程,2004,硕士.
[12]林伟.LFMCW警戒雷达信号处理算法分析及硬件设计[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[13]张立峰.落叶松体细胞胚TCTP与NFYA基因克隆及其在ABA调控过程中的表达机制[D].中国林业科学研究院,林木遗传育种,2014,博士.
[14]赵莎.钢铁业上市公司债务融资对企业绩效的影响研究[D].河北经贸大学,会计学,2013,硕士.
[15]刘凯辉.集体林权制度改革的利益相关者博弈研究[D].新疆农业大学,土地资源管理,2012,硕士.
[16]吕智林,范炳全,刘娟娟,周永华.城市快速路网匝道与污染控制双层多目标规划模型[J].控制与决策,2006,01:64-67+87.
[17]曾杰南.基于文件访问模式的重复数据删除方法研究[D].华中科技大学,计算机系统结构,2013,硕士.
[18]张颍.由膨润土制备三聚磷酸铝和硅溶胶的工艺研究[D].合肥工业大学,化学工艺,2013,硕士.
[19]奚小玲,周新亮,吴胜田.热连轧多加热炉设定模型自学习参数计算及优化[J].冶金自动化,2014,02:71-75.
[20]刘丹.基于EVA率的建筑企业绩效评价研究[D].内蒙古大学,高级管理人员工商管理,2014,硕士.
[21]沐连顺,范建忠,李蓓.IEC61850标准中ACSI的原型设计与实现[J].电力系统自动化,2006,03:71-75.
[22]吴懿琳.人参皂甙Rb_3分离纯化的研究[D].天津大学,化学工艺,2004,硕士.
[23]周文龙.关于财政分权与中国经济增长关系的进一步研究[D].中共上海市委党校,国民经济学,2014,硕士.
[24]王喆.竹器连接结构设计的研究[D].中央美术学院,设计艺术学,2013,硕士.
[25]吴知音,倪乃顺.我国财政科技支出研究[J].财经问题研究,2012,05:75-79.
[26]张翠.水溶性沥青基多孔炭的制备及其在双电层电容器中的应用[D].天津大学,化学工艺,2013,硕士.
[27]张子阳,任国斌,周定安,吴家梁.下陷层辅助单模光纤的弯曲损耗研究[J].激光与光电子学进展,2014,02:82-87.
[28]曾来海.民国时期报业管理学术思想研究[D].南京师范大学,新闻学,2014,博士.
[29]王超超,王万良,岑跃峰,姚信威,姚晓敏.HEVC快速编码深度选择算法[J].计算机工程与应用.
[30]郭娜.一类李超代数的表示[D].杭州电子科技大学,基础数学,2012,硕士.
[31]刘洋.柔性石墨烯复合电极的制备及其结构与性能的研究[D].上海师范大学,2012.
[32]谢静.论专利权利要求解释中等同原则的适用[D].天津大学,经济法学,2013,硕士.
[33]王云超.链式挖沟机挖沟器动态特性研究[D].吉林大学,2004.
[34]谌青青.我国绿色专利发展的政策保障机制研究[D].中国矿业大学,行政管理,2014,硕士.
[35]宋莹.地下水区域化变量时空变异函数构建及其应用研究[D].北京林业大学,环境科学,2013,硕士.
[36]马守臣,李凤民,徐炳成,黄占斌.返青期根修剪对冬小麦后期耐旱性及水分利用效率的影响[J].植物生态学报,2008,05:1194-1200.
[37]邵兴慧.盐酸关附甲素对SCN5A基因突变中晚钠电流的作用评价[D].北京协和医学院,内科学,2014,博士.
[38]廖黎琼.小分子在PLA/PET中的扩散及PLA/PA11的多尺度模拟研究[D].中北大学,材料工程,2013,硕士.
[39]刘阳京.基于GPRS农网台区变压器防盗报警监控系统研究[D].湖南大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[40]周联华.SKY科技公司的市场定位与竞争战略研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[41]生潇.我国军事复权制度的构建[D].吉林大学,法学,2014,硕士.
[42]王晓英,刘长姣,段连海,霍岩.毛酸浆开发利用的研究进展[J].中国酿造,2014,02:5-8.
[43]毕秋燕.李清照词的量词修辞研究[D].扬州大学,汉语言文字学,2011,硕士.
[44]庞瑞江.“后大集中时代”的年终盘点[J].中国金融电脑,2003,12:3-6+8.
[45]桂浩,冯玉才,李又奎.面向流数据的数据管理系统的研究[J].计算机应用研究,2005,01:88-90+133.
[46]丁智1,张涛2,魏新江1,张孟雅1.排水条件对不同固结度软粘土动力特性影响试验研究[J].岩土工程学报.
[47]高祥宇.波浪潮流共同作用下的流场数学模型[D].南京水利科学研究院,水力学及河流动力学,2003,硕士.
[48]阎冲.支持数据自动备份及共享的新一代网盘技术研究[D].中北大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[49]袁向琳.心音信号的合成模型及特征分析[D].南京邮电大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[50]胡珍新.面向用户的查询扩展研究与实现[D].江西师范大学,计算机软件与理论,2004,硕士.