PP2A抑制剂通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胰腺癌细胞株PANC-1迁移和增殖的机制研究

【摘要】目的：斑蝥素（Cantharidin）是传统抗癌中药斑蝥的活性成分，且为蛋白磷酸酶2A（proteinphosphatase2A，PP2A）的选择性抑制剂。PP2A可以使诸多激酶去磷酸化而失活，由于激酶通路的激活通常会促进肿瘤细胞生长，因此PP2A被认为是抑癌因子，而PP2A抑制剂被认为是诱癌剂。然而研究发现PP2A抑制剂Cantharidin和冈田酸（Okadaicacid，OA）对胰腺癌细胞的生长有显著抑制作用，而对其迁移的作用尚不清楚。-catenin是Wnt/-catenin信号通路的关键蛋白，PP2A可使-catenin去磷酸化而激活Wnt/-catenin通路，PP2A抑制剂可促进-catenin磷酸化而阻断Wnt/-catenin信号通路。激活Wnt通路在某些情况下可诱导迁移和增殖，因此在本研究中，我们拟验证PP2A抑制剂是否通过Wnt/-catenin通路对胰腺癌细胞的迁移和增殖产生抑制作用。方法：1、用四种不同方式处理PANC-1细胞，分别为:对照组，PP2A抑制剂处理组，Wnt/-catenin通路抑制剂处理组，Wnt/-catenin通路抑制剂与PP2A抑制剂联合处理组。2、应用划痕实验检测Cantharidin对胰腺癌细胞株PANC-1迁移能力的影响。3、应用Westernblot法检测PP2A抑制剂对Wnt/-catenin通路的作用。4、应用划痕和MTT法检测Cantharidin、去甲斑蝥素（Norcantharidin）和OA通过Wnt/-catenin通路对胰腺癌细胞迁移和增殖能力的影响。5、应用基因芯片和real-timePCR技术检测Cantharidin和OA对Wnt/-catenin通路下游基因表达的调控。结果：1.Cantharidin可抑制胰腺癌细胞系PANC-1的迁移能力。2.Cantharidin等PP2A抑制剂可介导-catenin持续磷酸化降解，入核减少，提示PP2A抑制剂可下调胰腺癌细胞中Wnt/-catenin通路的活性。3.Wnt/-catenin通路抑制剂FH535能削弱PP2A抑制剂对胰腺癌细胞迁移和增殖的抑制作用，说明PP2A抑制剂对胰腺癌细胞株PANC-1迁移和增殖的作用有可能依赖于Wnt/-catenin信号通路。4.PP2A抑制剂可调控Wnt/-catenin通路下游基因的表达。5.PP2A抑制剂通过Wnt/-catenin通路调节基因VEGFB、NRP1、DKK3、KRT8、Cacnalg和WISP2的表达，这些基因多参与细胞迁移与增殖的调控。结论：PP2A抑制剂能抑制胰腺癌细胞株PANC-1的迁移和增殖，其作用机制可能是通过促进-catenin蛋白的磷酸化降解，抑制了Wnt/-catenin信号通路的活性，PP2A是潜在的胰腺癌治疗靶点。
【作者】吴梦瑶；
【导师】陶敏；
【作者基本信息】苏州大学，肿瘤学（专业学位），2014，硕士
【关键词】PP2A抑制剂；胰腺癌；迁移；Wnt/β-catenin；

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