环孢素A新型纳米胶束的研究及应用

【摘要】目的：目前临床常用的环孢素A注射液因含有大量的聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)而存在严重的过敏反应,本文着力于制备一种新型的环孢素A胶束冻干粉针剂,并对处方组成及制备工艺进行研究,同时考察了该制剂的理化性质及稳定性。除此之外,本文还建立了用紫外法测定环孢素A含量的方法。最后用稳态荧光探针法测定了溶液的临界胶束浓度(CMC)及胶束聚集数(Nm),为研究最优处方下的胶束化行为提供了一定的参考依据。方法：1.紫外分光光度法测环孢素A冻干粉针剂含量方法的建立用紫外分光光度计法测定环孢素冻干粉针剂的含量,测环孢素A的最大吸收波长,绘制标准曲线,进行重复性检测；制备一批冻干样品,复溶后据以上方法测定环孢素A的含量。2.处方筛选及制备工艺优化本部分通过对SolutolHS15及乙醇用量,搅拌时间,水浴温度等单因素的考察,确定了环孢素胶束溶液的最佳处方组成；同时对胶束的制备过程进行了优化。由于环孢素A胶束水针剂长时间存放会出现浑浊,凝聚等现象,我们将其进行冷冻干燥,考察了冻干干燥过程中赋形剂的种类及使用量,并绘制冻干曲线。3.环孢素A冻干制剂的理化性质及稳定性研究对冻干样品进行初步理化性质考察,包括冻干剂外观、复溶情况、粒径大小及分布、zeta电位、pH值等；其次,对样品的稳定性进行考察,包括稀释稳定性、pH稳定性、加速(40。C)和长期(25℃)稳定性及影响因素试验。4.胶束化行为及其影响因素的考察用稳态荧光探针法测定了SolutolHS15的临界胶束浓度(CMC)及聚集数(Nm)。制备空白胶束样品考察乙醇用量对CMC的影响；制备载药胶束考察环孢素A的加入及冻干赋形剂对CMC的影响。再者,用不同稀释介质对环孢素A冻干样品进行复溶,考察SolutolHS15的临界胶束浓度(CMC)影响。结果：1.通过全波长扫描可知环孢素A的最大吸收波长为206nm,且处方中的辅料在此波长处无吸收。本文建立的紫外分光光度法,重复性好,准确度高,测定结果表明环孢素A质量浓度在6μg/mL-200μg/mL范围内可呈现良好的线性关系,且所制备的胶束溶液环孢素A的含量约为18.65mg/mL。2.通过单因素考察法,我们初步确定制备载药胶束的最优处方为环孢素A250mg、无水乙醇650mg、SolutolHS153300mg、加水定容至13mL。随后我们通过考察不同比例下山梨醇、葡萄糖、乳糖、蔗糖和其中两者的混合物等对冻干结果的影响,最终确定在上述处方条件下加入甘露醇300mg、山梨醇900mg作为冻干过程中的赋形剂。3.环孢素冻干样品用水复溶后平均粒径大小约为22nm,呈单峰分布且分布均匀；pH值在6.18左右；复溶所用时间及消泡时间均较短,大约2min左右。分别用四种不同稀释介质来溶解冻干样品,后测其粒径大小均为20nm左右。对其加速和长期试验表明样品稳定性好,可大规模制备；通过影响因素实验可已看出高温、光照对其含量及粒径虽有影响但是较微弱,可在常温条件下储存。4.稳态荧光探针法测定SolutolHS15的临界胶束浓度(CMC)为0.217g/L。加入处方用量的乙醇、环孢素A、冻干赋形剂等会引起SolutolHS15的CMC值显著增加,说明以上因素对表面活性剂形成的胶束的结构及性质存在一定的影响。对冻干样品用不同稀释介质稀释后测定其CMC值,通过比较可以得出以下结论,对SolutolHS15影响大小顺序依次为0.9%NaCl>5%C6H12O6>10%C6H12O6>H20,为临床用药提供一定的参考依据。
【作者】杨蕾；
【导师】刘红；
【作者基本信息】西南大学，微生物与生化药学，2014，硕士
【关键词】环孢素A；SolutolHS15；胶束；临界胶束浓度；胶束聚集数；

【参考文献】
[1]孙贵玉.急性重度肺炎患儿临床免疫及其医疗成本研究[D].大连医科大学,儿科学,2012,硕士.
[2]张浩.基于精益思想下施工企业质量成本管理研究[D].西安建筑科技大学,会计学,2013,硕士.
[3]李刘生.火电机组运行指标监管系统的研究与开发[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[4]张静.论对约定违约金的法律干预[D].山西大学,经济法学,2004,硕士.
[5]Scott.沈阳自动化所利用纳米操作机器人可控加工石墨烯获新成果[J].今日电子,2013,01:25.
[6]华小芳.双自由度天线控制系统[D].西安电子科技大学,电子与通信工程,2011,硕士.
[7]季爱兵.普洱茶叶片中内生菌的鉴定[D].吉林大学,生物工程,2013,硕士.
[8]孟京朝.主题模型在论文推荐系统中的应用研究[D].河北大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[9]周海朝.碳化钛衍生碳的微观结构及摩擦学性能研究[D].燕山大学,2012.
[10]刘倩.盐酸埃克替尼对人胃癌SNU-1细胞增殖抑制作用的研究[D].河北医科大学,肿瘤学,2013,硕士.
[11]金盼盼.汽车非常规污染与甲醇含量测试方法研究[D].长安大学,载运工具运用工程,2013,硕士.
[12]刘铮.F汽车品牌4S店设施标准调查研究[D].河南科技大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[13]黑龙江奥宇石墨集团董事长韩玉凤.石墨:理顺资源做大做强[N].中国化工报,2015-06-22002.
[14]赵会艳.现代中国画特有色彩语言的探索与研究[D].曲阜师范大学,艺术学,2013,硕士.
[15]邓朴,皮显松,马世英,王青,张锐锋.高频事故下潮流转移性质和调速器状态转移控制[J].电力系统自动化,2014,11:123-129.
[16]朱万旭,黄颖,苏均.HVM大直径锚具的研究开发[J].海威姆预应力技术.2001(06)
[17]陈康.富马酸废水的资源化应用研究[D].淮北师范大学,应用化学,2013,硕士.
[18]高世卿.紧凑型六自由度振动台结构分析与优化[D].哈尔滨工业大学,机械工程,2014,硕士.
[19]李伟伟,耿秀梅,郭玉芬,刘立伟.基于石墨烯的高灵敏度一氧化氮气体传感器[A].中国化学会.中国化学会第28届学术年会第4分会场摘要集[C].中国化学会:,2012:1.
[20]林静怡.面向物联网协议的专用处理器指令集设计[D].北京理工大学,电子与通信工程,2014,硕士.
[21]李邦云,袁贵川,丁晓群.基于相似搜索和加权回归技术的短期电价预测[J].电力自动化设备,2004,01:42-45.
[22]徐燕,怀进鹏,王兆其.基于区分能力大小的启发式约简算法及其应用[J].计算机学报,2003,01:97-103.
[23]向因.磁场下热处理及有机无机复合对酞菁薄膜结构及性能的影响[D].浙江大学,材料物理化学,2004,硕士.
[24]伊玉雯.《开明国语课本》教材选文研究[D].山东师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[25]李亚平,李欢锋,王娟,钟黎声,叶芳霞,燕映霖.颗粒增强铁基复合材料热残余应力的有限元分析[J].热加工工艺,2014,20:72-76.
[26]殷利民.微合金非调质油井管钢中钒的析出行为研究[D].上海大学,材料学,2013,硕士.
[27]付玫.国有企业破产过程中银行债权保全研究[D].西南财经大学,MBA,2003,硕士.
[28]王兵,王长友,李越冬.社会转型与国家审计的治理功用:基于嵌入理论的视角[J].审计与经济研究,2014,04:14-21.
[29]孙冬梅.民间文学艺术知识产权保护研究[D].黑龙江大学,民商法学,2013,硕士.
[30]刘艳芳.压力测试在我国寿险业中的应用研究[D].北京工商大学,金融学,2012,硕士.
[31]曹常义.3G网络运营信息化建设思路探讨[J].移动通信,2005,10:69-73.
[32]徐琰琰.元代无名氏家庭杂剧及其角色模式研究[D].陕西理工学院,中国古代文学,2014,硕士.
[33]刘贞,张小真.基于最小聚类单元的商圈聚类方法研究[J].西南师范大学学报(自然科学版),2004,06:949-952.
[34]叶文龙.基于有限元法的某乘用车后轴结构分析及疲劳寿命预测[D].广西科技大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[35]安玲玲,常颖萃,杜江燕.三维有序石墨烯掺杂纳米二氧化钛酶生物传感器[J].应用化学,2013,02:171-177.
[36]郑树峰.基于射频信号的碰撞速度测量方法[D].中北大学,机械电子工程,2014,硕士.
[37]杨晓龙,吴秋峰,杨煜华.多代理技术及其在企业内部网中的应用[J].冶金自动化,2002,05:20-24.
[38]严子琴,黄海婵,王畅,赵雷,钟卫鸿.低分子肝素制备的研究进展[J].中国生化药物杂志,2012,06:913-916.
[39]陆青云.青少年慢性心理社会应激，认知控制和肥胖关系的2年队列研究[D].安徽医科大学,儿少卫生与妇幼保健学,2014,博士.
[40]俞美红.溶血葡萄球菌耐药性及同源性研究[D].浙江大学,内科学,2004,硕士.
[41]卢良.论我国商会立法及其模式选择[D].兰州大学,经济法学,2013,硕士.
[42]李昆霖.基于知识管理的网络课程设计与开发[D].广西民族大学,科学技术史,2013,硕士.
[43]唐帅.基于广义位势理论的敦化江源镇草炭土本构模型研究[D].吉林大学,地质工程,2013,硕士.
[44]郭梦慧.中国城乡收入差距研究[D].吉林大学,西方经济学,2014,硕士.
[45]陈慧银.南昌职业学院团员信息管理系统分析与设计[D].云南大学,软件工程,2012,硕士.
[46]汪青.土壤和沉积物中黑碳的环境行为及效应研究进展[J].生态学报,2012,01:293-310.
[47]张轲.基于UIO的NOP通信协议的设计与实现[D].兰州大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[48]刘丽娟.纳粹德国的知识分子与大屠杀[D].郑州大学,世界史,2013,硕士.
[49]尹茂振.离心铸造对过共晶Al-20wt.%Si合金组织及性能的影响[D].吉林大学,材料工程（专业学位）,2014,硕士.
[50]倪小涛.股指期货在我国保险资产管理公司中的运用[D].上海交通大学,工商管理,2013,硕士.