茄子单性结实基因连锁的SRAP分子标记

【摘要】茄子(SolanummelongenaL.)起源于亚洲南部热带地区,古印度为其最早的驯化地,中国栽培茄子的历史悠久,是茄子的第二起源地,拥有丰富的茄子种质资源。茄子是喜温蔬菜,在设施栽培及春季露地早熟栽培条件下开花期常常由于低温弱光或缺乏授粉传媒而引起授粉受精不良,引起落花落果,降低效益。茄子单性结实品种由于不需要授粉就能形成果实,克服了授粉不良、落花落果等不利影响。因此,进行茄子单性结实基因的筛选和定位,对指导茄子单性结实品种的育种工作具有重要的现实意义。找到与单性结实紧密连锁的的分子标记,就可以在幼苗期进行单性结实鉴定以及选育,从而缩短了育种进程,这对茄子单性结实辅助育种具有重要作用。本研究利用SRAP分子标记对茄子的单性结实基因进行连锁分析。以茄子的单性结实母本(D-6)、非单性结实父本(896)自交系和F2代群体为材料,用BSA法对其进行构建极端基因池即单性结实池和非单性结实池,得到的主要结论如下：1、运用了改良CTAB法提取茄子叶片基因组DNA,结果显示：改良CTAB法提取的基因组DNA片段较好,DNA浓度也比较高,DNA质量检测结果也在标准值范围内,完全适用于SRAP的研究分析。2、以茄子基因组DNA为模板,通过对Mg2+、dNTPs、引物浓度、模板DNA与Taq酶等几个影响因子进行组合检测,得到了优化的茄子SRAP-PCR反应体系(10μL)具体为：Mg2+浓度为2.0mmol/L、引物浓度为0.5mol/L、TaqDNA聚合酶浓度为0.75U.dNTPs浓度为0.20mmol/L、DNA模板浓度为50ng/μL。进一步选取10对SRAP引物进行验证,结果显示：该体系能应用于SRAP对茄子全基因组的扩增。3、本实验采用21个正向引物和25个反向引物,对正向引物和反向引物进行两两配对得到525对引物组合,经扩增显带分析后筛选出24对在双亲表现多态性的引物。进一步扩增茄子单性结实、非单性结实两个极端基因池,经显带分析其中6对能在两个极端池出现稳定差异的引物组合,利用这6对引物组合对2个极端基因池的6株单性结实单株和6株非单性结实单株分别进行SRAP.PCR验证,结果发现,只有引物对me13em17与茄子单性结实表型存在连锁关系。4、用me13em17引物扩增出了一条在全部非单性结实株出现而在全部单性结实株上没出现的约为327bp的特异条带；me13em17引物还扩增出了一条约为275bp的特异条带,这条特异带在单性结实株上出现而在非单性结实株上没有出现。将出现在非单性结实株上的标记命名327me13gm17;将出现在单性结实株上的标记命名275me13em17,利用JoinMap4.0计算出这两个标记与单性结实位点的连锁距离为15.89cM和11.43cM。5、用me13em17引物对对F2群体200株进行单株检测,检测结果发现,在200株单株中非单性结实株143株,单性结实株57株,x2测验后可知F2代非单性结实株与单性结实株分离比例接近3：1,符合单基因分离比例,推测茄子D-6单性结实性的遗传由单隐性核基因控制。
【作者】张念；
【导师】宋明；王志敏；
【作者基本信息】西南大学，植物学，2014，硕士
【关键词】茄子；单性结实；F2群体；SRAP；分子标记；

【参考文献】
[1]刘莹.构式语法视角阐释翻译中的形式与意义[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[2]陈云,罗挺,李力,彭晓东.入侵检测系统研究及其发展[J].内江师范学院学报,2005,S1:332-334.
[3]赵燕菲.针刺奇经四脉治疗围绝经期综合征的临床研究[D].云南中医学院,针灸（专业学位）,2012,硕士.
[4]许可纯.广东省职校学前教育专业师资供求问题研究[D].广东技术师范学院,职业技术教育学,2014,硕士.
[5]唐春.基于纳米金颗粒/石墨烯/聚苯胺的DNA电化学生物传感器[D].南京理工大学,2012.
[6]张笑.焦炉工外周血淋巴细胞微核率与尿中多环芳烃代谢物、血浆BPDE-白蛋白加合物的关联及其在工人早期健康监护中的应用[D].华中科技大学,劳动卫生与环境卫生学,2013,硕士.
[7]陈宽,阮殿波,傅冠生.轨道交通用超级电容器研发概述[J].电池,2014,05:296-298.
[8]吴士亮.面向行业的商品化管理信息系统框架构建与方法研究[D].南京理工大学,2005.
[9]唐琎,张闻捷,高琰,付明玉,蔡自兴.不同精度冗余数据的融合[J].自动化学报,2005,06:122-130.
[10]袁吉泽.桔皮、毛豆和小松菜中农药残留产后理化降解及其对品质影响的研究[D].江南大学,农产品加工及贮藏工程,2012,硕士.
[11]李春雷,陈瑞华.演变、转向与趋势:新媒体时代下的中国传播学研究——中国传播学会2014年年会暨新世纪的中国传播学学术研讨会综述[J].现代传播(中国传媒大学学报),2014,06:139-140.
[12]吴斌.基于应变能敏感度的树状结构形态创构研究[D].哈尔滨工业大学,结构工程,2013,硕士.
[13]魏菲娅.徽州民间图形符号的传承与发展[D].安徽工程大学,设计艺术学,2012,硕士.
[14]王凯.驾驶员可靠性调查与定量测评研究[D].中国地质大学（北京）,安全工程,2014,硕士.
[15]孔令芳.无芒隐子草CsLEA基因克隆及其转化拟南芥的研究[D].兰州大学,草坪生物学,2013,硕士.
[16]徐瑶.我国网络信息行政监管问题研究[D].中国人民解放军军事医学科学院,情报学,2013,硕士.
[17]赖崎.标准化、结构化技术及其在信息系统建设中的应用[D].天津大学,电路与系统,2004,硕士.
[18]杨庆文.俄汉双关语对比研究[D].吉林大学,俄语语言文学,2013,硕士.
[19]袁俊美.液相还原法制备导电浆料用银粉研究[D].东北大学,材料学,2010,硕士.
[20]曹凤超.电流辅助钛合金波纹管成形及质量控制[D].哈尔滨工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[21]钟红利,蒲仁海,吴聿元,吴群,赵红旭.腰英台油田青山口组沉积特征与储层预测[J].石油地球物理勘探,2011,03:471-476+500+330-331.
[22]闫丽.ERCC1基因在食管鳞状细胞癌中的表达及和Survivin、Ki-67表达的相关性研究[D].山东大学,临床医学（专业学位）,2014,博士.
[23]吴琼.谨防误读“中国梦”——传播话语策略研究[J].人民论坛,2014,10:48-49.
[24]牛铭奎.干式DCT离合器温度模型及其灰色预测控制研究[D].吉林大学,2008.
[25]刘文俊.法律援助制度比较研究[D].东北大学,宪法学与行政法学,2009,硕士.
[26]杨红霞.南山学院毕业生信息管理系统设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[27]徐雅静.黎锦晖儿童歌舞作品与“五四”精神[D].南京师范大学,音乐学,2012,硕士.
[28]柏建普,高美霞,杨文君,高志成.某厂条形码数据库管理系统[J].冶金自动化,2003,S1:325-326.
[29]邢大伟.我国国债的适度规模及其控制的实证研究[D].苏州大学,金融学,2003,硕士.
[30]王婉君.分布式应用系统的编址解析与规约技术研究[D].南京邮电大学,计算机系统结构,2013,硕士.
[31]李璐.从非语言交际视角看中法文化之差异[D].浙江大学,法语语言文学,2013,硕士.
[32]李振兴.siRNA抑制ZNF139对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖影响的研究[D].河北医科大学,外科学,2013,硕士.
[33]张红艳.胰岛素基因突变导致糖尿病机制的实验研究[D].天津医科大学,内科学（专业学位）,2014,博士.
[34]鄢梦萱.操纵证券交易价格罪研究[D].中国政法大学,刑法学,2004,硕士.
[35]苏娇.新一代的新声音[D].上海外国语大学,德语语言文学,2013,硕士.
[36]任明仑.企业级智能决策支持系统体系结构研究[D].合肥工业大学,2003.
[37]赵林娜.河北机电产品出口竞争力及影响因素分析[D].河北师范大学,世界经济,2014,硕士.
[38]向莉.供应链返利与惩罚契约研究[D].华中科技大学,系统工程,2013,硕士.
[39]刘德纲.晚期肺腺癌患者EGFR基因突变检测及化疗疗效观察[D].南方医科大学,胸心外科学,2012,硕士.
[40]刘峰.AspC介导的天冬氨酸代谢协调大肠杆菌细胞周期[D].内蒙古大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[41]周会杨.基于群众视角的新农村建设项目沟通管理研究[D].中国地质大学（北京）,项目管理,2013,硕士.
[42]王志浩.独柱墩梁桥的抗倾覆分析及加固对策研究[D].长安大学,建筑与土木工程（专业学位）,2014,硕士.
[43]云翔.新建综合社区中老人居住组团的规划设计研究[D].清华大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[44]李明涛.目的论视角下的电影字幕翻译研究[D].福建师范大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[45]顾幸生,蒋慰孙.线性大系统递阶控制的一种新型逼近方法[J].自动化学报,1994,06:750-754.
[46]赵冬娇.基于石墨烯的若干新型电化学传感器的制备及应用研究[D].浙江理工大学,应用化学,2013,硕士.
[47]孙强,秦威,孙睿頔.基于Sagnac干涉的新型光缆径路探测方法研究[J].铁道学报,2014,04:60-64.
[48]邓斌.外电场作用下神经纤维的混沌与同步[D].天津大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[49]管成伟.来源于中国东海的溶藻细菌Bacillus sp.LP-10的溶藻特性及溶藻机制研究[D].厦门大学,微生物学,2014,硕士.
[50]杨波.AT牵引供电和综合接地系统综合仿真研究[D].北京交通大学,2014.