体外受精—胚胎移植过程中卵泡液血小板激活因子的研究

【摘要】研究目的：通过体外受精-胚胎移植(InVitroFertilizationembryoTransfer,IVF-ET)助孕的患者卵泡液中血小板激活因子(PlateletActivatingFactor,PAF)水平及其与年龄、体重指数(Bodymassindex,BMI)、双侧卵巢窦卵泡数(Antralfolliclecount,AFC)、性激素及实验室参数的关系研究，以此来评价PAF在卵子发育、受精、胚胎发育中的作用及对妊娠结局的影响，为寻找一种能够客观、准确评价卵子质量及胚胎发育潜能的新方法提供理论依据。材料和方法：选择2013年7月1日~2013年8月31日于河北医科大学第四医院生殖中心首次接受IVF-ET（包括常规IVF和卵泡浆内单精子注射Intracytoplasmicsperminjection,ICSI）并在本周期移植患者共162例，作为研究对象，并排除女性既往患有结核、子宫内膜异位症及宫腔病变，近3个月未应用过激素类药物，既往无自然流产史，夫妻双方染色体正常，未发生卵巢过度刺激综合征（Ovarianhyperstimulationsyndrome,OHSS）等。根据患者的情况选择标准长方案或微刺激方案进行控制性卵巢刺激。根据患者采集的精液情况选择常规IVF或ICSI方法授精。取卵后48h、72h观察胚胎发育情况。优质胚胎标准：取卵后72h胚胎细胞数≥7且≤12个，卵裂球大小均匀或略不均匀，碎片≤20%的胚胎为优质胚胎。为了研究卵泡液PAF水平与年龄、BMI、基础卵泡刺激素（Basalfollicle-StimulatingHormone,bFSH）、基础卵泡刺激素/基础黄体生成素（Basalluteinizinghormone,bLH）、AFC、注射绒毛膜促性腺激素(Humanchorionicgonadotropin,HCG)日血清雌二醇(Estradiol,E2)和孕酮(Progesterone,P)、获卵数的关系，将162例患者以35岁为临界，分析年龄≤35岁和年龄＞35岁患者卵泡液中PAF水平的差异；以BMI=25kg/m2为临界，分析BMI＜25kg/m2和BMI≥25kg/m2患者卵泡液中PAF水平的差异；以bFSH=10IU/L为临界，分析bFSH≤10IU/L和bFSH＞10IU/L患者卵泡液中PAF水平的差异；以bFSH/bLH=2为临界，分析bFSH/bLH≤2和bFSH/bLH＞2患者卵泡液中PAF水平的差异；以AFC=7个为临界，分析AFC≤7个和AFC＞7个患者卵泡液中PAF水平的差异；以HCG日血清E2=1000pg/ml为临界，分析HCG日血清E2≤1000pg/ml和HCG日血清E2＞1000pg/ml患者卵泡液中PAF水平的差异；以HCG日血清P=2.6ng/ml为临界，分析HCG日血清P≤2.6ng/ml和HCG日血清P＞2.6ng/ml患者卵泡液中PAF水平的差异；以获卵数=4个为临界，分析获卵数≤4个和获卵数＞4个患者卵泡液中PAF水平的差异。为了进一步研究卵泡液中PAF水平对相同条件人群卵子质量及胚胎发育的影响，将同时满足非多囊卵巢综合症（Polycysticovarysyndrome,PCOS)、年龄≤35岁、BMI＜25kg/m2、AFC＞7个及应用标准长方案的68例移植患者，按卵泡液中PAF水平分为三组：①PAF≤5.9ng/ml组（17例），②5.9＜PAF＜11ng/ml组（34例），③PAF≥11ng/ml组（17例），在三组的年龄、不孕年限、BMI等基础情况及Gn天数、Gn用量、获卵数及移植日子宫内膜厚度等COS情况均处于同一水平的前提下比较三组患者受精率、双原核(Pronuclear,2PN)形成率、优胚率、植入率及妊娠率的差异。应用电化学发光法(Electro-ChemiluminescenceImmunoassay,ECLIA)检测上述患者血清中的E2、P、LH、FSH及HCG水平；应用酶联免疫吸附法(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测患者取卵日第一个穿刺的成熟卵泡液的PAF水平。统计学处理：数据统计分析采用SPSS13.0版软件包，计量资料结果以均数±标准差(x±s)表示，比较采用t检验、方差分析、秩和检验、x2检验，相关性分析采用pearson及spearman相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。结果:1年龄＞35岁患者卵泡液中PAF水平明显低于年龄≤35岁患者（P＜0.05）。2BMI＜25kg/m2和BMI≥25kg/m2患者之间的卵泡液中PAF水平，无统计学差异（P＞0.05）。3bFSH≤10IU/L和bFSH＞10IU/L患者之间的卵泡液PAF水平无统计学差异（P＞0.05）。4bFSH/bLH≤2患者卵泡液中PAF水平高于bFSH/bLH＞2患者，但无统计学差异（P＞0.05）。5AFC≤7个和AFC＞7个患者卵泡液中PAF水平无统计学差异（P＞0.05）。6HCG日血清E2水平＞1000pg/ml患者卵泡液PAF水平高于HCG日血清E2≤1000pg/ml，但无统计学差异（P＞0.05）。7HCG日血清P≤2.6ng/ml和HCG日血清P＞2.6ng/ml患者卵泡液中PAF水平无统计学差异(P＞0.05)。8获卵数≤4个患者卵泡液中PAF水平低于获卵数＞4个患者，但无统计学差异(P＞0.05)。9卵泡液中PAF水平与年龄、BMI、bFSH、bFSH/bLH、AFC、HCG日血清E2和P水平、获卵数的相关性分析：卵泡液中PAF水平与年龄呈明显负相关（r=-0.197，P＜0.05）；PAF与BMI(r=0.006，P＞0.05)、bFSH(r=0.097，P＞0.05)、bFSH/bLH(r=0.039，P＞0.05)、AFC(r=0.098，P＞0.05)、HCG日血清E2水平(r=-0.101，P＞0.05)、HCG日血清P水平(r=0.066，P＞0.05)、获卵数(r=0.015，P＞0.05)无明显相关性，但发现HCG日血清E2以1000pg/ml为界，PAF与之有不同相关性，当HCG日血清E2≤1000pg/ml时，卵泡液中PAF水平与之呈明显正相关（r=0.567，P＜0.05）；而HCG日血清E2水平＞1000pg/ml时，卵泡液中PAF与之呈明显负相关（r=-0.242，P＜0.05）。10年龄、不孕年限、BMI等基础情况及应用促性腺激（Gonadotrophin,Gn)天数、Gn用量、获卵数及移植日子宫内膜厚度等COS情况均无统计学差异的68例移植患者按卵泡液中PAF水平分为PAF≤5.9ng/ml、5.9＜PAF＜11ng/ml和PAF≥11ng/ml三组。三组的受精率和植入率随着PAF水平的升高而升高，但无统计学差异（P＞0.05）。11三组的2PN形成率有统计学差异，PAF≥11ng/ml组患者的2PN形成率在三组中最高，为71.16%（P＜0.05），且明显高于PAF≤5.9ng/ml组的59.81%，两组比较有统计学差异（P＜0.05），而PAF≥11ng/ml组和5.9＜PAF＜11ng/ml组、PAF≤5.9ng/ml组和5.9＜PAF＜11ng/ml组比较无统计学差异（P＞0.05）。12三组的优胚率有统计学差异，PAF≥11ng/ml组患者的优胚率在三组中最高，为64.96%（P＜0.05），明显高于PAF≤5.9ng/ml组的46.09%，两组比较有统计学差异（P＜0.05），也明显高于5.9＜PAF＜11ng/ml组的50.63%，两组比较有统计学差异（P＜0.05），但PAF≤5.9ng/ml组和5.9＜PAF＜11ng/ml组比较无统计学差异（P＞0.05）。13三组的妊娠率有统计学差异，PAF≥11ng/ml组患者的妊娠率在三组中最高，为70.59%（P＜0.05），且明显高于PAF≤5.9ng/ml组的23.53%，两组比较有统计学差异（P＜0.05），而PAF≥11ng/ml组和5.9＜PAF＜11ng/ml组、PAF≤5.9ng/ml组和5.9＜PAF＜11ng/ml组比较无统计学差异（P＞0.05）。结论：PAF是可以促进卵子发育的细胞因子，卵泡液中PAF水平受年龄影响。卵巢功能正常的患者取卵日卵泡液PAF水平较高。HCG日血清不同的E2水平对卵泡液PAF水平有不同影响，PAF不仅可以促进颗粒细胞E2的分泌，E2过高会导致PAF水平的下降，在IVF助孕过程中，要适度控制COS程度，减少过高E2产生及获卵数的过多，从而改善IVF结局。取卵日卵泡液PAF水平可以作为预测妊娠结局的指标，也可以作为一种评价卵子质量及胚胎发育潜能的新方法。
【作者】白小双；
【导师】甄秀丽；张娜；
【作者基本信息】河北医科大学，妇产科学，2014，硕士
【关键词】PAF；卵泡液；体外受精-胚胎移植；卵子质量；优质胚胎；胚胎植入；临床妊娠；

【参考文献】
[1]郑春宇.生物氧化提金废液中单质砷的回收及高值化利用研究[D].东北大学,化学工艺,2010,硕士.
[2]丁春峰.不同频率、气体成份条件下气泡发光阈值声压研究[D].华南师范大学,光学,2004,硕士.
[3]王敏.重载列车荷载下路基长期累积变形损伤特性研究[D].哈尔滨工业大学,岩土工程,2014,硕士.
[4]战静钰.美国华裔文学中华裔种族身份的历史嬗变[D].沈阳师范大学,英语语言文学,2013,硕士.
[5]戴玉明.氧化锰超电容电极材料的制备及其电化学性能[D].南京大学,2014.
[6]兀晓文.喜树碱插层LDHs纳米杂化物的制备、修饰及性能研究[D].山东大学,胶体与界面化学,2014,博士.
[7]邵幼英.符号位检测地层参数——多层介质速度分析[J].石油地球物理勘探,1981,01:27-42.
[8]董存,余贻鑫.功率大扰动下电压稳定域的研究[J].电力系统自动化,2005,02:13-19.
[9]刘霞,袁新苗.先秦至隋唐时期浙商发展概况及商人社会地位综述[J].现代物业(中旬刊),2013,02:18-20.
[10]高红星.铁道车辆空气弹簧动态特性研究[D].西南交通大学,交通运输工程,2014,硕士.
[11]熊章强,毛承英.声波数值模拟中改进的非分裂式PML边界条件[J].石油地球物理勘探,2011,01:35-39+164+168-169.
[12]刘伟.读图时代的阅读研究[D].安徽大学,文艺学,2013,硕士.
[13]张强.复合材料颤振模型的模态频率误差修正方法[D].大连理工大学,机械制造及自动化,2013,硕士.
[14]潘芹芹.产业集聚与出口贸易的互动机制研究[D].安徽大学,国际贸易学,2013,硕士.
[15]宋立焘.当前中国城市更新运行机制分析[D].山东大学,行政管理,2013,硕士.
[16]朱海艳.FZ医院融资租赁项目的风险管理探析[D].南京大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[17]伊小飞.长江口外海域悬沙浓度垂向分布的实用模型[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）,物理海洋学,2012,硕士.
[18]张玉荣,王伟宇,周显青,陈赛赛.基于外观特征识别玉米不完善粒检测方法[J].河南工业大学学报(自然科学版),2015,02:1-7+12.
[19]苏洁,张顶立,高自友,黄俊,肖丛苗.盖挖逆作法施工地铁车站结构变形及其控制[J].中国铁道科学,2010,01:59-65.
[20]郝秀利.NaYF_4:Yb~(3+)，Ho~(3+)/PbF_2:Er~(3+)上转换材料的制备及发光特性的研究[D].郑州大学,凝聚态物理,2013,硕士.
[21]梁晓辉.碳化硅磨削去除机理及亚表面裂纹研究[D].哈尔滨工业大学,航空宇航制造工程,2013,硕士.
[22]李峰.经皮肾镜治疗鹿角形结石的临床研究[D].南方医科大学,外科学,2012,硕士.
[23]张贵江,臧晓欢,周欣,王璐,王春,王志.磁性石墨烯纳米粒子固相萃取与气相色谱-质谱相结合测定环境水样中的三嗪类除草剂[J].色谱,2013,11:1071-1075.
[24]赵久长.热轧带钢表面氧化铁皮控制与消除[D].东北大学,材料工程,2009,硕士.
[25]郑福镇.浅析中国贫困现象和扶贫斗争[D].中央民族大学,民族学,2004,硕士.
[26]王珺楠.新形势下高校学生工作研究[D].长春工业大学,思想政治教育,2013,硕士.
[27]章晗.乳品中反式脂肪酸的快速检测和消解技术的研究[D].浙江工业大学,2008.
[28]安建东.熊蜂（Bombus Lucorum）的人工繁育技术研究[D].中国农业科学院,特种经济动物饲养学,2004,硕士.
[29]许慎.《易传》德育思想的当代意蕴[D].山东大学,思想政治教育,2013,硕士.
[30]邹奇芝.女装量身定制系统中的适体原型研究[D].上海工程技术大学,服装设计与工程,2011,硕士.
[31]罗晰旻,罗益锋.纳米纤维的新进展和发展趋势[J].高科技纤维与应用,2013,06:36-45.
[32]韩喆.导航接收机基带处理硬件系统的设计与实现[D].北京理工大学,电子与通信工程,2014,硕士.
[33]席小星.石墨烯干凝胶作为氧化还原反应的非贵金属催化剂研究[J].中外企业家,2013,29:256+260.
[34]陈昊.卫星光通信粗瞄反馈单元设计及故障诊断研究[D].哈尔滨工业大学,控制工程,2014,硕士.
[35]刘谦.中小型民营企业的激励机制与薪酬管理体系的构建[D].新疆大学,工商管理,2013,硕士.
[36]罗森.A集团公司发展战略研究[D].西南交通大学,工商管理,2012,硕士.
[37]刘纯金.交流同步电机矢量控制系统研究[D].北京交通大学,2009.
[38]王骁军.供应链金融中企业信用风险分析及信用保险[D].华东师范大学,精算学,2013,硕士.
[39]张春.中原经济区高级别旅游景区空间结构研究[D].郑州大学,旅游管理,2013,硕士.
[40]李亦婧,朱浩,侯晨,江宇,李彦锋.热液法制备磁性纳米材料[J].化学进展,2013,Z1:276-287.
[41]李婷兰.奇迹束丝放线菌的安丝菌素合成及其培养条件初探[D].华东理工大学,生物化工,2013,硕士.
[42]刘晓芳.汉族外鼻形态三维数据库的建立与计算机辅助形态调整的研究[D].第四军医大学,口腔临床医学,2004,硕士.
[43]蒋连升.中国上市公司并购绩效的研究[D].山东财经大学,会计学,2012,硕士.
[44]步志昊.我国贫困县政府公共服务能力研究[D].首都师范大学,政治学理论,2014,硕士.
[45]张玺.地层纵向性态对隧道衬砌结构的影响分析[D].兰州理工大学,结构工程,2013,硕士.
[46]沈杰.首届“两地高校研究生培养国际化研讨会”在香港举行[J].学位与研究生教育,2014,07:4.
[47]陆大雄.工业网络选择指南[J].冶金自动化,1987,03:60-61.
[48]孔祥征.我国预期违约制度研究[D].沈阳师范大学,民商法学,2014,硕士.
[49]黄桢.A职院全面预算管理体系的设计研究[D].西北大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[50]杜志斌,孙勇.工程保障信息资源的开发与利用[J].信息安全与通信保密,2005,07:207-210.