香蕉内生菌多样性分析及广谱拮抗菌筛选

【摘要】香蕉种植区气候普遍潮湿高温,易发生各种病害,多发的香蕉病害轻则造成香蕉果实品质和产量降低,重则对香蕉的生产造成毁灭性打击,其中香蕉枯萎病(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)是香蕉病害中最严重的一种。生物防治则是一种高效且安全的防治香蕉枯萎病的重要方法。植物内生菌由于长期寄生于植物体内和植物协同进化而建立了紧密和谐的结合关系：植物为内生菌提供生长所需要的能量及营养,内生菌则通过相关的信号传导作用和自身的代谢产物对植物生长产生影响。因此,研究内生菌多样性与香蕉感病与否的关系以及内生生防菌的开发和利用对防治香蕉枯萎病具有重要的现实意义。本研究采集海南省临高和皇桐两地蕉园内的易感品种巴西蕉与抗病品种南天黄、农科一号的健康株与病株的根、球茎、假茎和叶片,以T-RFLP技术研究不同品种香蕉健康株与病株内生菌的多样性,分析健康株与病株各组织内生菌多样性的变化,并对各品种内生菌的优势种群进行定性分析；此外,采用植物表面消毒法、研磨预培养法、稀释涂布平板法、分离培养法、平板对峙培养法分离、筛选对香蕉枯萎病菌4号小种有拮抗活性内生菌,通过平板生长抑制法、抑制孢子萌发法及抑制菌丝生长法研究拮抗内生菌的广谱活性(香蕉枯萎病菌1号小种、香蕉大灰斑病菌、香蕉长形斑病菌、香蕉棒孢霉落叶病菌、香蕉叶缘枯斑病菌、香蕉果尖腐烂病菌、香蕉炭疽病菌、粉蕉叶枯病菌、香蕉树木溃疡病菌),并对菌株进行形态学及培养特征、生理生化特征与16SrDNA序列的分子生物学鉴定。主要结论如下：(1)通过选用HhaI酶和MspI酶在对香蕉做T-RFLP酶切分析时发现选用HhaI酶切能获得较多的有效TRFs片段,更适合用于香蕉的T-RFLP分析。(2)由于病原菌的侵染,各品种香蕉内生细菌在健康株与病株中的多样性都有明显的变化。其中,易感品种巴西蕉健康株的内生细菌多样性H最高为1.80,而其病株中最低仅为0.65；在抗病品种南天黄与农科一号中,内生细菌的多样性指数表现则正好相反,其中病株中H值最高为1.94,而在健康株中最高仅为0.20。内生细菌的种类和数量稳定性欠佳。(3)不同品种香蕉存在相同的优势种群共7个,大部分优势种群在不同品种中分布各不相同,具有一定的优势种群差异性。总体表现为,在易感品种中,健康株的优势种群要比病株中的多；而在抗病品种中,病株中的优势种群比健康株中的多。并且出现同品种香蕉健康株的优势种群在病株中被其它新种群占据优势地位的变化。(4)从不同香蕉品种的不同部位共分离得到内生菌438株,其中细菌240株,放线菌142株,真菌56株,故细菌是香蕉内生菌中的优势种群。内生真菌在各品种病株中的分布最广泛。(5)筛选出具广谱活性的放线菌10株、细菌2株。其中内生放线菌菌株041的广谱拮抗活性最强,最大抑菌带宽为28.13±1.89mm,其发酵滤液对FOC4的孢子萌发抑制率为9.85%。对广谱拮抗内生放线菌菌株041、04-1、19-1、03A-1进行的形态学、生理生化特性和16SrDNA序列分析表明,它们属于链霉菌属。
【作者】王梦颖；
【导师】戚春林；
【作者基本信息】海南大学，生态学，2014，硕士
【关键词】香蕉；植物内生细菌；T-RFLP；广谱拮抗菌；生物防治；

【参考文献】
[1]罗修筠.从符号学角度看我国旅游文本的英译[D].苏州大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[2]王维民.甘肃省人口老龄化对寿险需求的影响研究[D].兰州商学院,金融学,2013,硕士.
[3]李旭方.压缩感知在MRI重建中的应用[D].北方工业大学,应用数学,2014,硕士.
[4]方涛.低应变反射波法桩底反射信号问题的探讨[D].西南交通大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[5]杨冰浩.交通指路标志的极限信息量与最大前置距离研究[D].西南交通大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[6]李瑞敏.基于同步辐射X射线的乳腺癌及肿瘤新生血管成像的实验研究[D].复旦大学,影像医学与核医学,2013,博士.
[7]乌云.阿拉善双峰驼驼峰的品质特性研究[D].内蒙古农业大学,食品科学,2013,硕士.
[8]邵倩.SUR1和KCNJ11基因多态性与磺脲类药物继发性失效的相关性研究[D].山东大学,内科学,2013,硕士.
[9]姚霞.南京铁路货运站向现代物流发展的模式及策略研究[D].浙江工业大学,2011.
[10]薛家锋.杏1-3区表外储层剩余油描述及注表活剂挖潜技术研究[D].大庆石油学院,2004.
[11]安丽娟,庞志远.硼化氮-石墨烯杂化单原子层电学性质的第一原理[J].吉林大学学报(理学版),2013,06:1160-1163.
[12]姜静.从《西游记》两个英译本看汉语熟语的翻译[D].青岛大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[13]晏利姣.中医医院护士中医药素养评价指标体系的构建研究[D].北京中医药大学,中医护理学,2014,硕士.
[14]彭小凡.反思式外语教师培训的效果研究[D].华南师范大学,英语语言文学,2004,硕士.
[15]温兆奇.无线路灯监控终端的设计与实现[D].杭州电子科技大学,微电子学与固体电子学,2013,硕士.
[16]贾戎.中国西北城市园林景观建设研究[D].西北农林科技大学,风景园林,2012,硕士.
[17]李丹.高中代数的研究式教学探究[D].东北师范大学,学科教学,2012,硕士.
[18]张玲,王文聪,倪江锋.两电子反应体系硅酸铁锂的研究进展[J].中国科学:化学,2015,06:571-580.
[19]王芳,梁春生,徐大亮,曹慧群,孙宏元,罗仲宽.锂空气电池的研究进展[J].无机材料学报,2012,12:1233-1242.
[20]王新,王勇.基于Web的数据挖掘技术及其应用[J].云南民族学院学报(自然科学版),2002,02:80-83.
[21]李鹏,刘思峰,朱建军.基于直觉模糊数的GM(1,1)预测模型[J].控制与决策,2013,10:1583-1586.
[22]田贝贝.债务重组准则修订对盈余管理影响的实证研究[D].河北经贸大学,会计学,2013,硕士.
[23]郑昕.“9·11”后美国反恐话语的构建和运用[D].复旦大学,国际政治,2012,硕士.
[24]欧海林.张中行散文翻译初探[D].复旦大学,英语笔译,2012,硕士.
[25]党辉.新疆广告产业发展研究[D].新疆大学,新闻传播,2013,硕士.
[26]李英伟.PLA2G2A基因过表达对卵巢癌细胞生物学行为影响的研究[D].山东大学,妇产科学,2013,硕士.
[27]刘军.LTE与WLAN数据跨层交换仿真[D].北京交通大学,2014.
[28]吴家明.城市交通出行结构关键影响因素辨识及干预对策研究[D].哈尔滨工业大学,交通运输规划与管理,2014,硕士.
[29]蒲仁海,杜金虎,崔永谦,沈建石.湖相退积反射的几个例子[J].石油地球物理勘探,2003,01:67-71+117-118+112.
[30]陈钧.咪唑啉类、硫脲类、胺类以及胺基膦酸类有机缓蚀剂的构效关系研究[D].西北大学,化学工程（专业学位）,2012,硕士.
[31]郭曼.我国的食品召回制度研究[D].苏州大学,宪法学与行政法学,2013,硕士.
[32]郭海歌.基于拓扑感知的P2P邻居节点选择机制研究[D].华东师范大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[33]王金华.Li-C_6H_6体系电子性质的理论研究[J].天津职业技术师范大学学报,2013,04:25-27.
[34]秦光,徐子才.现代摩阻材料摩擦磨损性能探讨[J].四川冶金.1990(04)
[35]陈丽娜.不同囊袋处理方法在永久性起搏器更换术中的应用[D].浙江大学,临床医学,2014,硕士.
[36]曾凡传.南海诸岛主权归属的法理研究[D].燕山大学,政治学理论,2013,硕士.
[37]ZhouDa.英汉体育新闻报道中概念隐喻认知对比研究[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[38]杜洁.司显柱翻译质量评估模式下的张培基《英译中国现代散文选》研究[D].华中师范大学,英语语言文学,2014,硕士.
[39]张继国,施国洪,宦娟.我国石墨烯产业的现状及发展思路[J].经济纵横,2014,02:39-42.
[40]高蔡联.创始人个人资源和人格特质对新创企业创新绩效的影响：社会网络的中介作用[D].浙江工业大学,2013.
[41]张驰.7岁前儿童先天性胫骨假关节治疗方法选择的初步探讨[D].苏州大学,临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[42]张忆雪.酶法制磷脂酰丝氨酸[D].北京化工大学,微生物与生化药学,2013,硕士.
[43]臧长海.上皮性钙粘附蛋白和β-连环素的表达与胆囊腺癌预后的关系[D].山西医科大学,免疫,2003,硕士.
[44]杨贵军,张继贤.专题知识引导下土地利用遥感变化自动识别方法[J].测绘信息与工程,2005,01:35-37.
[45]李宏刚.电气化铁道牵引网故障测距装置的研究[D].华北电力大学（北京）,高电压与绝缘技术,2004,硕士.
[46]梁英超.骨桥蛋白调节间质—上皮转化促进肝癌转移的研究[D].第二军医大学,肿瘤学（专业学位）,2013,硕士.
[47]李廉.以计算思维培养为导向深化大学计算机课程改革[J].中国大学教学,2013,04:7-11.
[48]乌云达来.Lactobacillus acidophilus 130B4在大白鼠消化道内生存状态及其对血脂和血压的作用研究[D].内蒙古农业大学,动物营养与饲料科学,2004,硕士.
[49]黄维.复苏促进因子在结核病接触者筛查及临床诊断中的应用[D].安徽医科大学,免疫学,2014,博士.
[50]赵一哲.农业银行乌兰察布分行中小企业贷款业务的现状及对策研究[D].内蒙古大学,工商管理,2013,硕士.