土沉香组织培养再生体系的建立

【摘要】土沉香再生体系的建立是缩短沉香育种年限,保持优良性状的必要保证。愈伤组织的诱导是发展转基因的良好材料,再生体系的建立同时能为进一步的土沉香遗传改良等提供基础。本实验系统研究了土沉香不同组织部位外植体的再生体系,诱导得到胚性愈伤组织、体细胞胚状体和生根无菌苗,为土沉香遗传转化体系和基因工程的研究提供了基础,也为土沉香组织培养技术的推广应用提供了支持。主要结果如下：1筛选出了土沉香不同材料的消毒方法。(1)对于叶片和茎段作为外植体时最佳的消毒方式均为0.1％HgCl2处理8min较好,存活率分别为31.11%和65.56%。(2)对于种子作为外植体时最佳的消毒方式为0.2％HgCl2处理8min,存活率为96.67%。2筛选出了茎段出芽培养基。在设计浓度范围内土沉香茎段出芽的最佳培养基为：7/10MS+6-BA0.35mg/L+NAA0.01mg/L。土沉香出芽诱导率为93.33%。最佳外植体为3月采摘的枝条中部(即从顶芽数第3-4位腋芽的茎段)。3筛选出了茎段芽增殖培养基。在设计浓度范围内土沉香茎段芽增值的最佳培养基为：7/10MS+KT1.27mg+NAA0.2mg/L.土沉香芽的增值倍数为3.53。4筛选出了土沉香叶片、茎段、胚(子叶)、根愈伤组织诱导和增殖培养基。(1)在设计浓度范围内通过叶片诱导土沉香愈伤组织与增殖的最佳培养基为：MS+6-BA0.30mg/L+2,4-D0.34mg/L+CW10％(V/V).土沉香叶片愈伤组织诱导率为44.83%。(2)在设计浓度范围内通过茎段诱导土沉香愈伤组织与增殖的的最佳培养基为：1/2MS+6-BA1.50mg/L+2,4-D1.50mg/L+CW10％(V/V)。土沉香茎段愈伤组织诱导率为86.21%。且采用剥皮的手段进行处理为通过茎段诱导愈伤组织的最佳的处理手段。(3)在设计浓度范围内通过胚(子叶)诱导土沉香愈伤组织与增殖的的最佳培养基为:MS+6-BA0.30mg/L+2,4-D0.30mg/L+CW10％(V/V).土沉香胚(子叶)愈伤组织诱导率为93.10%。(4)在设计浓度范围内通过根诱导土沉香愈伤组织与增殖的最佳培养基为：1/2MS+6-BA1.53mg/L+2,4-D1.40mg/L+CW10％(V/V)。土沉香根的愈伤组织诱导率为20.00%。5筛选出来茎段愈伤组织分化培养基。在设计浓度范围内筛选出的培养基：7/10MS+KT1.60mg/L+NAA0.20mg/L+CW20%(V/V)。茎段愈伤组织分化分化率为6.67%。6筛选出了茎段生根培养基在设计浓度范围内诱导土沉香茎段生根的最佳培养基为7/10MS+6-BA0.02mg/L+IBA1.23mg/L+CW25%(V/V).土沉香茎段的生根率为33.33%,平均根长5Cm。7对组织培养苗移栽技术进行了初步探索。通过将无菌苗植入经灭菌蛭石：细河砂(1：1)的混合基质中,用透明塑料杯覆盖以达到保湿保温的作用,对提高土沉香生根无菌苗移栽成活率具有一定的作用。
【作者】贾贤；
【导师】陈雄庭；
【作者基本信息】海南大学，林木遗传育种，2014，硕士
【关键词】土沉香；愈伤组织；分化；再生体系；

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