烟盲蝽卵黄原蛋白基因的克隆及其表达的营养调控

烟盲蝽卵黄原蛋白基因的克隆及其表达的营养调控

作者:师大云端图书馆 时间:2018-09-04 分类:硕士论文 喜欢:3201
师大云端图书馆

【摘要】营养是影响天敌昆虫繁育的关键因素之一。卵黄原蛋白表达的营养调控对天敌昆虫扩繁具有一定作用。通过分析昆虫卵黄原蛋白的结构,找到影响昆虫生长发育的主要部分,可更好地控制昆虫的繁殖。本研究克隆出烟盲蝽的卵黄原蛋白基因,分析烟盲蝽卵黄原蛋白序列与其它昆虫卵黄原蛋白之间的进化关系;用荧光定量的方法比较饲喂不同饲料的烟盲蝽卵黄原蛋白基因的表达量发现,营养可影响烟盲蝽卵黄原蛋白的表达量。本文的主要结果与结论总结如下。1.烟盲蝽卵黄原蛋白基因的克隆比较不同昆虫的Vg基因,设计兼并引物,进行PCR扩增Vg基因片段,利用RACE技术克隆出Vg基因的两端。克隆的卵黄原蛋白基因长度为6310bp,开放阅读框(ORF:57-5985),长为5919bp,编码1972个氨基酸,推测该基因的第1-17个氨基酸残基为信号肽序列,预测蛋白质分子量为216KD,等电点约为9.12。丝氨酸(S)占15.5%,天冬氨酸(N)占5.22%,谷氨酰胺(Q)占7.09%,丙氨酸(A)占9.83%。2.饲喂不同饲料的烟盲蝽卵黄原蛋白基因的表达量运用荧光定量PCR分析饲喂米蛾卵(A)、柞蚕蛹(B)、酵母提取液(C)的烟盲蝽Vg基因表达量。荧光定量得到的卵黄原蛋白的相对表达量分别为:A为1.40904;B为0.00615;C为0.000225,饲喂A的Vg表达量明显高于饲喂人工饲料B、C的,同时B饲料的表达量明显高于C。亦即,饲喂米蛾卵的烟盲蝽的产卵量高于饲喂柞蚕蛹匀浆液的,饲喂柞蚕蛹匀浆液的表达量高于添加酵母的,由本实验可以得出饲喂不同饲料的烟盲蝽卵Vg的表达量明显的不同,说明烟盲蝽卵黄原蛋白对烟盲蝽的繁殖有直接影响。
【作者】刘丽平;
【导师】孟玲;陈红印;
【作者基本信息】南京农业大学,农业昆虫与害虫防治,2013,硕士
【关键词】人工饲料;卵黄原蛋白;基因克隆;荧光定量;

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