犬草酸钙结石形成机理的研究

【摘要】草酸钙结晶在犬的尿液中检出率逐年升高,这几乎是世界各国都出现的问题。草酸或草酸根离子是形成含草酸钙结晶尿液的主要因素,草酸钙晶体继而可引起肾组织的严重损伤。坏死的。肾小管上皮细胞可作为晶体形成和聚集的核心,最终形成肾结石并且可导致肾衰。本研究通过给比格犬静脉注射KOX溶液,诱导草酸钙结晶尿和肾草酸盐沉积的模型,旨在探讨KOX对泌尿系统的损伤的作用。实验研究的内容如下：(1)KOX对犬血清和尿的生化指标影响,观测内容包括肝肾功能检测、尿沉渣检测和血清电解质浓度检测。(2)KOX对犬肾组织的形态学的影响,观测内容包括超声检查、病理组织学、扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察。(3)KOX对犬肾骨桥蛋白(OPN)和肾小管蛋白(THP)表达的影响,通过免疫组化定位法和实时荧光PCR(qPCR)法检测OPN和THP的蛋白含量和基因表达量的变化。主要结果如下：(1)与对照组相比,处理组犬血清肌酐和尿素氮的含量在实验的0、1、3、5天逐渐增加,而尿液中肌酐和尿素氮的含量却逐渐减少。处理组犬的尿沉渣可检测到二水草酸钙(COD)和一水草酸钙(COM)晶体。(2)超声图像显示肾皮质和髓质组织的回声略微增强,在处理组犬左侧和右侧肾脏的BPL和MW的回声都有显着增加。在肾小管中有结晶沉积,并导致肾小管的严重损伤。处理组的肾组织SEM观察结果显示,肾小管内有异物填充,经X-线能谱分析确定为草酸钙。经TEM观察显示,大量结晶侵入细胞质,并使胞浆空泡化,微绒毛缺损,线粒体溶解,并有草酸钙结晶残留在管腔内。(3)肾组织切片经免疫组化染色显示,处理组与对照组比较,在TAL内的皮质和外髓质,OPN染色的着色强度显著增加,但THP的着色强度相对下降。荧光定量PCR表明,OPNmRNA表达水平的显著上升,THPmRNA的表达水平的显著下降。结论：连续7天给犬静脉注射0.5MKOX溶液,可导致肾功能损害,其机制是析出的草酸钙结晶粘附肾小管上皮细胞,导致OPN的表达水平上调和THP的表达水平下调,以缓解草酸钙结晶对细胞膜的损害；持续性大面积的肾上皮细胞损害,最终导致肾功能下降,血液尿素氮和肌酐水平升高,尿液中尿素氮和肌酐水平下降。
【作者】WalaaIsmailKhalilMohamaden；
【导师】李建基；
【作者基本信息】扬州大学，临床兽医学，2013，博士
【关键词】犬；结晶尿；草酸钾；草酸钙；扫描电镜；透射电镜；骨桥蛋白；THP；

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