重组灵芝免疫调节蛋白对大鼠局灶性脑缺血作用的研究

【摘要】目的：本研究采用改良ZeaLonga线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型，通过大鼠神经功能评分，观察脑组织形态学变化，细胞凋亡以及活化小胶质细胞特异性标记物ED-1、血管生成因子VEGF、Ang-1和TGF-β1相关蛋白在脑组织中的表达情况，探讨重组灵芝免疫调节蛋白对缺血性脑梗死大鼠的作用，为进一步开发重组灵芝免疫调节蛋白临床治疗缺血性脑卒中提供依据。方法：健康成年Wistar大鼠，雌雄各半，体重250~300g，应用Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞大鼠局灶性脑缺血模型，实验设6组：假手术组、模型组、阳性药对照组、rLZ-8高剂量组、rLZ-8中剂量组、rLZ-8低剂量组，各组动物于造模当天开始给药，假手术组与模型组注射等体积生理盐水，采用腹腔注射方式给药，每天给药两次，连续给药7d，于第8d断头取脑。记录各组大鼠神经功能评分；利用HE染色，光学显微镜下观察脑组织损伤的病理学变化；TUNEL方法检测大鼠脑缺血后凋亡细胞数；免疫组织化学方法检测ED-1、VEGF在脑组织中的表达及定位，脑缺血后脑组织中微血管的数量；WesternBlot方法检测大鼠脑缺血后VEGF、Ang-1、TGF-β1蛋白的表达。结果：（1）神经功能评分结果显示，在造模第0d，rLZ-H组大鼠神经功能评分明显低于M组大鼠神经功能评分（p<0.01）；随后给药7d，期间，rLZ-H组大鼠仅在第4d就已恢复达到较低的神经功能评分效果，而M组大鼠于造模第6d到达较低的神经功能评分。（2）HE染色结果显示，M组大鼠脑组织顶颞皮层及基底节外侧部分可见面积较大的局限性坏死灶，rLZ-H组大鼠脑组织坏死情况较M组有有所改善。（3）TUNEL检测结果显示，M组大鼠脑组织凋亡细胞数增多，rLZ-H组与rLZ-M大鼠脑组织凋亡细胞数明显减少（p<0.01），rLZ-L组凋亡细胞数虽有减少，但未见统计学差异。（4）免疫组化结果显示，M组大鼠脑组织ED-1阳性细胞数增多，rLZ-H组ED-1阳性细胞数明显减少（p<0.05）。（5）Westernblot结果显示，M组大鼠脑组织VEGF、Ang-1及TGF-β1蛋白含量表达增多，rLZ-H组大鼠脑组织VEGF、Ang-1及TGF-β1蛋白表达含量明显高于M组（p<0.05），rLZ-M组与rLZ-L组大鼠脑组织蛋白表达虽增加，但未见统计学差异。结论：重组灵芝免疫调节蛋白能够降低脑缺血大鼠神经功能评分，通过减轻神经细胞凋亡和炎症反应，改善脑缺血所致脑损伤，对脑缺血大鼠具有积极的保护作用。重组灵芝免疫调节蛋白通过上调VEGF、Ang-1及TGF-β1蛋白表达，促进缺血半暗带的血管新生，以利于损伤组织的恢复。
【作者】杨秀娜；
【导师】任立群；
【作者基本信息】吉林大学，药理学，2014，硕士
【关键词】重组灵芝免疫调节蛋白；脑缺血；炎症反应；凋亡；血管生成；

【参考文献】
[1]郁葱葱.历史的变迁与生命的沉浮[D].沈阳师范大学,中国现当代文学,2013,硕士.
[2]贾丽男.国有商业银行中间业务发展的策略研究[D].吉林大学,高级管理人员工商管理,2012,硕士.
[3]刘水芬.生态美学与当代中国审美文化的价值倡导及建构[D].西安电子科技大学,马克思主义理论与思想政治教育,2004,硕士.
[4]金婷婷.中小企业电子商务关键成功因素探讨[D].杭州电子科技大学,国际贸易学,2014,硕士.
[5]金丽丽.动态生成的初中数学课堂的研究[D].山东师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[6]孙晶.新绛方言语音比较研究[D].山西师范大学,语言学及应用语言学,2013,硕士.
[7]熊树.我国人权保障视野下的强制隔离戒毒措施研究[D].华南理工大学,法律（专业学位）,2012,硕士.
[8]张蒙蒙.当代大学生网络行为培养研究[D].南昌航空大学,思想政治教育,2012,硕士.
[9]宋殿毅.何为物流的核心？[N].中国计算机报,2003/02/17D08.
[10]欧阳昱.Ethical and Practical Justification of Vegetarianism in Western Cultures[D].西安外国语大学,英语语言文学,2014,硕士.
[11]万聪.组合曝气复合MBR处理生活污水及在高速公路服务区的应用[D].华东交通大学,环境工程（专业学位）,2014,硕士.
[12]陈瑜婷.飞秒激光脉冲整形研究[D].华东师范大学,光学,2004,硕士.
[13]秦秀娟,陈宗海.汽油辛烷值神经网络预测模型的设计[J].控制与决策,1999,02:55-59.
[14]陆丹丹.O-取代烷基羟胺及其衍生物的合成研究[D].南京理工大学,化学工艺,2013,硕士.
[15]张锡滨.散货抓斗工作过程计算机仿真系统的开发[J].林业机械与木工设备,2004,10:32-34.
[16]郑子茹.车路协同系统中无信号交叉口优化控制方法研究[D].北京交通大学,2015.
[17]王庆征.3T MRI扩散张量成像在腰骶部脊神经根中的应用研究[D].泰山医学院,影像医学与核医学,2012,硕士.
[18]胡娟.江淮地区5—7月降水异常及其与我国近海海温异常的关系[D].南京气象学院,气象学,2004,硕士.
[19]杨彦平.网络成瘾中学生的团体心理辅导[D].华东师范大学,应用心理学,2004,硕士.
[20]区汉武.慢性鼻窦炎术后行鼻窦灌方冲洗的临床疗效分析[D].广州中医药大学,中医学（专业学位）,2013,硕士.
[21]于文娟.住房抵押贷款的风险与防范[D].中国海洋大学,金融学,2003,硕士.
[22]贾宗.散沫花素-HPMA共聚抗癌药物和支化聚乙烯载体合成[D].西北师范大学,高分子化学与物理,2013,硕士.
[23]徐俊斌.一种荧光手术导航目镜系统的设计与应用研究[D].中国科学技术大学,精密仪器与机械,2014,硕士.
[24]丁亚雷.巴底农神庙饰带浮雕与和平祭坛饰带浮雕的风格比较[D].南京艺术学院,美术学,2004,硕士.
[25]戴维迪.非监督知识发现过程中若干关键问题研究[D].天津大学,2005.
[26]周瑞敏.《现代汉语词典》（第五版）数字词语研究[D].新疆师范大学,汉语言文字学,2013,硕士.
[27]咸绪刚,杜伟,王美丽,曹焕苹,何涛.碳/导电聚合物复合电极材料的研究进展[J].材料导报,2014,13:141-144+148.
[28]钟红艳.安徽矿业企业海外投资环境的评价研究[D].安徽大学,技术经济及管理,2013,硕士.
[29]李博通,李永丽,李洪波,苏斌,李幼仪.同杆双回线短路故障复合序网分析法[J].电力系统自动化,2010,09:53-58.
[30]金美.移动交换网资源管理信息系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2012,硕士.
[31]王金艳.甲烷、氮气常压直接合成氨催化剂的制备及其性能研究[D].西北大学,化学工程,2014,硕士.
[32]葛玥.中国CFO的职责定位与能力要求研究[D].首都经济贸易大学,会计学,2013,硕士.
[33]李莹.基于随机网络演算的高速铁路无线网络性能评估[D].北京交通大学,2015.
[34]于玥.企业并购风险内部控制研究[D].河北大学,会计,2014,硕士.
[35]石岩.高中数学“271”教学模式实践研究[D].内蒙古师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[36]高钰洋.同声传译中的译语显化现象[D].北京第二外国语学院,日语语言文学,2014,硕士.
[37]叶维.食管癌患者肿瘤组织中BRCA1和β-tubulinⅢ的表达水平及与紫杉类耐药性的临床研究[D].蚌埠医学院,肿瘤学,2013,硕士.
[38]谢浪涛.特种设备安全及检验工作管理平台开发应用[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[39]蔡银平.通信运营商网络维护的一体化策略研究[D].吉林大学,企业管理,2013,硕士.
[40]陈序.铁路应急能力评价及对策研究[D].北京交通大学,2008.
[41]何平.西昌XX住宅项目施工过程管理研究[D].西南交通大学,项目管理,2012,硕士.
[42]程众爱.不同家居零售业态下的商店形象对感知价值的影响研究[D].浙江理工大学,企业管理,2014,硕士.
[43]梁钊.自动泊车的路径规划技术研究[D].河南科技大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[44]朱世伟.论安全的社会属性[J].中国安全科学学报.2003(09)
[45]孟英新.交互式电子白板在数学教学中的应用研究[D].河北师范大学,教育技术学,2012,硕士.
[46]吴步畅.径山茶多品种间拼配的可行性研究[D].浙江大学,农业推广（专业学位）,2012,硕士.
[47]孟晗.论灾民人格权的法律保护[D].贵州民族大学,民商法学,2013,硕士.
[48]陈磊,左亚尧,封朝永.语义不确定时态跨度的规范化处理及近似运算[J].计算机应用研究,2015,:.
[49]徐秋.富血小板血浆对牙周膜干细胞膜片生物活性影响的研究[D].遵义医学院,口腔临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[50]王启明.液晶空间光调制器相位调制特性研究及其应用[D].浙江大学,2008.