雷公藤甲素对真菌酵母聚糖诱导人角膜基质成纤维细胞产生炎性因子及趋化因子的影响及机制

【摘要】目的:雷公藤甲素（Triptolide，TP）是中药雷公藤的一种主要成分，已证实具有多种药理作用包括抗炎、免疫调节和抑制细胞增殖等。酵母聚糖（ZymosanA）是真菌细胞壁的组成部分，具有侵染性质。本研究探讨TP对Zymosan诱导人角膜基质成纤维细胞产生促炎性因子的影响及机制。方法:体外培养人角膜基质成纤维细胞，利用TP、Zymosan对细胞干预处理；通过实时聚合酶链反应（Real-timepolymerasechainreaction，RT-PCR）分析和酶联免疫吸附分析（Enzyme-linkedimmunosorbentanalyses，ELISA）检测促炎性细胞因子白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）和趋化因子白细胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）、单核细胞趋化因子-1（monocytechemoattractantprotein-1，MCP-1）在mRNA水平和蛋白水平的表达；通过免疫印迹法（Westernblot）检测细胞中丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activatedproteinkinasesMAPKs）、核转录因子抑制蛋白（IkappaB-α,IκB-α）的磷酸化表达变化；通过LDH法检测TP对角膜基质成纤维细胞的毒性作用。结果：TP作用人角膜成纤维细胞对IL-6、IL-8、MCP-1的基础分泌无明显影响；Zymosan可诱导人角膜基质成纤维细胞中IL-6、IL-8、MCP-1在蛋白质水平和mRNA水平的表达；Zymosan能诱导角膜基质成纤维细胞胞外信号调节激酶（Extracellularsignal-regulatedkinase，ERK），氨基端激酶（c-JunN-terminalkinase，JNK），P38以及IκB-α的磷酸化。TP预处理细胞后，可抑制Zymosan诱导角膜基质成纤维细胞IL-6、IL-8、MCP-1的产生，并呈现时间和剂量依赖性；此外，TP可抑制Zymosan诱导的MAPKs及IκB-α的活化。TP对角膜基质成纤维细胞无毒性作用。结论：研究结果显示，TP能够抑制Zymosan诱导角膜基质成纤维细胞的炎症反应，其机制可能涉及对细胞内MAPKs及NF-κB通路的抑制。因此，TP可能抑制真菌性角膜溃疡时炎性细胞对角膜的浸润。
【作者】李京；
【导师】贾卉；
【作者基本信息】吉林大学，眼科学，2014，硕士
【关键词】雷公藤甲素；真菌酵母聚糖；真菌性角膜炎；细胞因子；炎症；

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