蓝狐KIT、KITLG及EDNRB基因的克隆及与显性白毛色突变的相关性分析

【摘要】动物毛发之所以有色泽，是因为含有色素的缘故。色素的合成与表达范围、表达量多少以及环境等因素都决定了动物毛色的不同。哺乳动物体内的色素有多种，其中与毛色有关的主要是黑色素,黑色素的数量、结构、性质的多样性决定了动物毛色千差万别。黑色素根据性质又可分为黑/棕色优黑素和红/黄色褐色素两类。黑色素的生物合成及转运均是在黑色素细胞内经多种酶一系列的催化产生完成的，是一个复杂而又精细的生物过程，其中任一过程或环节发生改变都将可能导致动物毛色的变化。目前，对动物毛色突变分子遗传机制的研究主要通过候选基因法、连锁分析法和全基因组关联分析法。蓝狐是野生北极狐的毛色突变种，属于食肉目、犬科北极狐属，是世界上主要的毛皮动物之一。本试验根据黑色素生物合成通路及调控机制、国内外现有其它动物毛色突变研究，特别是小鼠、猪、马和羊的显性白毛色的研究进展，推测蓝狐显性白毛色突变可能与KIT、KITLG和EDNRB有关。本实验通过克隆野生型蓝狐及显性白毛色突变个体的KIT、KITLG和EDNRB核酸序列进行比较分析，得到了野生型蓝狐个体KIT、KITLG和EDNRB三种毛色候选基因全长编码序列。KITLG基因在野生型蓝狐皮肤组织中存在外显子6的选择性剪接。对显性白色突变个体KIT基因RT-PCR扩增及测序发现外显子12存在选择性剪接，该选择性剪接只在显性白个体中存在。对内含子11和12测序发现内含子12第1碱基处存在1个SNP（c.1867+1G>T），该SNP仅在显性白蓝狐中存在；另外在内含子12内部还存在一个碱基的插入或缺失多态性，但该多态性在两种毛色中均存在；采用PCR-RFLP对185个个体进行基因分型结果表明SNP（c.1867+1G>T）与显性白毛色完全相关。该实验不仅为进一步揭示蓝狐显性白毛色突变的生化机制奠定了基础，同时也为其它毛皮动物相关毛色突变提供了候选基因和研究思路。
【作者】侯佳妮；
【导师】闫守庆；
【作者基本信息】吉林大学，动物遗传育种与繁殖，2014，硕士
【关键词】蓝狐；KIT；KITLG；EDNRB；显性白毛色；

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