基于报告病毒和细胞活性的抗EV71和CA16病毒药物筛选方法的建立及应用

【摘要】手足口病(HFMD)是一种常见的儿科疾病，主要由肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CA16）感染引起。近年来，手足口病频繁爆发，已成为西太平洋地区最受关注的公共健康问题之一。当前仍没有上市的针对EV71和CA16的疫苗和抗病毒药物，因此，急需研究出有效的抗病毒疗法。本研究建立了一个以报告病毒和细胞活性检测为基础的两步筛选平台并应用于筛选EV71和CA16药物。首先，利用两种报告病毒，带有荧光素酶基因的假病毒和带有增强型绿色荧光蛋白基因的感染性病毒，对400种高度纯化的天然化合物库进行初筛。然后用传统的检测细胞活性的方法对初筛产生的候选化合物进行复筛，进一步确认它们的抗病毒活性。经过两轮筛选，得到了三种具有抗病毒活性的小分子化合物（木犀草素、高良姜素和榭皮素），其中木犀草素对EV71和CA16的抑制效果最强，我们对其进行了深入的研究。通过细胞病变（CPE）减少实验和空斑减少实验，得到的木犀草素的半数抑制浓度(IC50)均为10μM左右。初步机制研究表明，木犀草素作用于病毒的吸附后阶段，并抑制病毒RNA的复制。综上所述，本研究建立了一种两步法的抗病毒药物筛选系统，并为EV71和CA16抗病毒药物研究提供了一种前体化合物。
【作者】徐琳；
【导师】姜春来；苏维恒；
【作者基本信息】吉林大学，生物工程，2014，硕士
【关键词】肠病毒71型；柯萨奇病毒A16；木犀草素；报告病毒；高通量筛选；抗病毒药物研究；

【参考文献】
[1]卜炜.中国地方财政对烟草税收的依赖[D].中国社会科学院研究生院,税务（专业学位）,2014,硕士.
[2]唐琎,张闻捷,高琰,付明玉,蔡自兴.不同精度冗余数据的融合[J].自动化学报,2005,06:122-130.
[3]田志勇.不同层厚64层螺旋CT肺动脉造影在肺动脉栓塞中的诊断价值[D].兰州大学,影像医学与核医学,2013,硕士.
[4]韩守东,赵勇,陶文兵,桑农.基于高斯超像素的快速GraphCuts图像分割方法[J].自动化学报,2011,01:11-20.
[5]王晓.基于TMS320F28335光伏独立供电系统设计[D].西安科技大学,仪器仪表工程,2014,硕士.
[6]马治邦,史士东.煤炭直接液化技术研究[J].煤炭转化.1992(01)
[7]饶蕾.新兴技术领域商业模式识别研究[D].浙江大学,2007.
[8]王智佳.沟通理论视角下的初中教师批评行为研究[D].西南大学,基础教育学,2014,硕士.
[9]王辰.不同非稳条件下正弓箭步动作主要工作肌群用力特征的对比个例[D].北京体育大学,康复医学与理疗学,2013,硕士.
[10]谢征宇.高铁综合客运枢纽客流安全预警关键技术研究[D].北京交通大学,2012.
[11]郑军.切实纠正勘察设计工作不正之风[J].建筑设计管理.1996(01)
[12]王维波.利用特征波长探讨大气和海洋中太阳辐射光谱特征的变化规律[D].中国海洋大学,物理海洋学,2014,博士.
[13]郜辉.抑制酰基—辅酶A去饱和酶1对食管鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的影响及其分子机制探讨[D].郑州大学,肿瘤学,2013,硕士.
[14]胡胜泉.国际工程的浙企战略联盟研究[D].浙江工业大学,工商管理,2013,硕士.
[15]谭学琳.韩国京畿道地区高中汉语教材练习分析[D].广西师范大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[16]陈玥衣.思想政治教育的社会管理功能研究[D].北京交通大学,2014.
[17]陈美航.空间编队DS-UWB通信多用户检测与LDPC编译码研究[D].哈尔滨工业大学,信息与通信工程,2013,硕士.
[18]宋婕,吴蔚,苗青.济钢烧结生产过程控制系统的开发与应用[J].冶金自动化,2004,01:66-68.
[19]郭立伟,杨荃.全连续冷连轧机自动控制系统的设计与实现[J].冶金自动化,2006,02:56-60+67.
[20]李成.黄河流域史前至两汉小麦种植与推广研究[D].西北大学,考古学及博物馆学,2014,博士.
[21]刘丰收.平衡计分卡在企业绩效管理中的应用[D].首都经济贸易大学,企业管理学,2004,硕士.
[22]刘海龙.《吕氏春秋》中的“气”思想研究[D].安徽大学,中国哲学,2013,硕士.
[23]郭效东.帕金森病Parkin基因缺失突变的临床研究[D].第四军医大学,外科学,2004,硕士.
[24]蔡磊.乙酰丙酸绿色高效制备方法研究[D].浙江大学,化学工艺,2004,硕士.
[25]张娥.甩挂运输技术标准体系研究[D].长安大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[26]崔静.加氢反应器及塔设备裙座支撑区应力分析与结构优化[D].河北工业大学,化工过程机械,2004,硕士.
[27]李魁.小组工作中的异众者研究[D].华中科技大学,社会工作,2013,硕士.
[28]邓时铭.牛蛙T、B淋巴细胞的主要生物学特性研究[D].湖南农业大学,水产养殖,2004,硕士.
[29]胡国玺.三维实体曲面造型技术的研究及软件开发[D].大连理工大学,模式识别与智能系统,2003,硕士.
[30]李海冬.预制空心板体系梁桥受力性能试验研究[D].哈尔滨工业大学,交通运输工程,2014,硕士.
[31]杨伟萍.等式约束优化问题的柔性惩罚方法[D].苏州大学,运筹学与控制论,2014,硕士.
[32]郗元.砂轮不平衡量检测相关技术研究[D].长春工业大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[33]林智奋.人民币汇率与国际油价波动对我国上市航空公司股价的影响研究[D].华侨大学,金融学,2014,硕士.
[34]裴利梅.唇语识别技术的研究[D].江苏科技大学,机械电子工程,2014,硕士.
[35]赵佳佳.内极才情，外周物理[D].云南艺术学院,MFA,2013,硕士.
[36]洪镔.新经济下国企人力资源开发与管理探究——兼谈证券公司激励管理的新模式[D].吉林大学,行政管理,2004,硕士.
[37]刘杨.中职学生学业韧性及其与学业自我的关系研究[D].西南大学,应用心理学,2013,硕士.
[38]华大林.基于DW8051的SOC调试技术的研究与实现[D].西安电子科技大学,软件工程,2012,硕士.
[39]崔力科.《汉英·英汉地球物理勘探词典》已经出版[J].石油地球物理勘探,1993,01:119.
[40]侯纪蓉.染料及中间体生产中的治理方法三废(Ⅰ)[J].精细与专用化学品.1999(20)
[41]常欣.低温胁迫下茶树CsCBF1调控途径及其体外功能鉴定的初步研究[D].安徽农业大学,茶学,2012,硕士.
[42]李红岩.曲克芦丁对STZ糖尿病大鼠认知功能障碍及海马谷氨酸半胱氨酸连接酶亚单位GCLC、GCLM的影响[D].河北医科大学,内科学,2013,硕士.
[43]董文娟.穿山龙总皂苷对CIA大鼠关节滑膜血管新生相关因子及其受体的影响[D].承德医学院,病原生物学,2011,硕士.
[44]闫志娟.都市圈背景下北京新城发展研究[D].首都经济贸易大学,区域经济学,2014,硕士.
[45]肖龙,戴宗坤,杨炜.基于VPRS的信息系统风险分析[J].计算机应用,2005,07:1595-1597.
[46]夏大飞.高考数据隐私保护技术的应用研究[D].西南大学,计算机应用,2013,硕士.
[47]邵汉永,冯纯伯.严格正实线性多变量系统的鲁棒性分析及其输出反馈控制[J].控制与决策,2004,03:277-280+289.
[48]潘萍萍.基于二叉推荐树的可信评估模型研究[D].西安科技大学,计算机技术,2014,硕士.
[49]张辉.串联谐振软开关推挽电路研究[D].浙江大学,2008.
[50]黄泳均.电网不平衡下三相PWM整流器的控制策略研究[D].北京交通大学,2009.