辣椒再生体系建立及器官发生的细胞组织学观察

【摘要】辣椒(Capsicum.annuumL.)是亚热带和温带国家辣椒属栽培最广泛的一个种,是一种重要的蔬菜作物,其在中国的种植面积居蔬菜作物第2位,有着重要的社会意义和经济意义。但辣椒对各种生物和非生物胁迫敏感,其产量和品质受威胁严重。要获得具有较强适应性的辣椒新品种,仅依靠传统的育种方法周期较长,而且辣椒的遗传背景相对狭窄,难以通过传统的育种方法获得目标性状改良的新品种。利用植物离体培养和遗传转化技术进行辣椒植株性状改良,培育新品种,可以克服物种间基因交流障碍,并且性状改良针对性强、目的明确,具有较高的研究价值和应用价值。通过离体培养实现植株再生,建立稳定、高效的离体再生体系则是遗传转化的先决条件。辣椒属于再生顽拗型植物,同烟草、番茄、马铃薯等其他茄科植物相比,植株再生率低,实现其离体再生相对较困难。辣椒离体再生有器官发生和体胚发生两种途径,器官发生是辣椒离体再生的常规途径。辣椒的离体再生受多种因素的影响,特别是添加物质的种类和浓度对辣椒离体再生的影响很大,但关于它们的影响作用及其相互作用大小的研究较少。而正交设计可以减少试验次数、缩短试验周期、迅速找到优化方案。本研究以辣味型辣椒黔椒五号和甜味型辣椒洛椒九号为试材,经初步试验筛选出最适外植体后引入正交试验设计,研究BA、IAA、AgNO3、GA3等添加物质对不定芽分化和伸长的影响大小及其之间的相互作用,找出最适宜外植体分化和伸长的添加物质组合,再经过生根试验,建立稳定的离体再生体系。然后在最适添加物质组合的培养条件下从细胞组织学上观察辣味型和甜味型器官发生过程,比较了辣味型和甜味型辣椒器官发生的异同。主要研究结果如下：1.带柄子叶为辣椒离体再生的最优外植体类型。2.黔椒五号带柄子叶外植体分化时,添加物质最优组合为BA6.0mg/L+IAA1.0mg/L+AgNO35.0mg/L,分化率81.18%。各因素对于黔椒五号带柄子叶外植体分化的影响大小为BA×IAA>BA>IAA×AgNO3>BA×AgNO3>IAA>AgNO3。3.洛椒九号带柄子叶外植体分化时,添加物质最优组合为BA5.0mg/L+IAA0.5mg/L+AgNO35.0mg/L,分化率为94.74%。各因素对于洛椒九号带柄子叶外植体分化的影响大小为AgNO3>BA>BA×IAA>IAA×AgNO3>BA×AgNO3>IAA。4.黔椒五号不定芽伸长时,添加物质最优组合为BA3.0mg/L+IAA0.5mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30mg/L,不定芽伸长力为47.52%。各因素对于黔椒五号不定芽伸长的影响大小为AgNO3>IAA×GA3>BA×IAA>IAA>BA×GA3>GA3>BA。5.洛椒九号不定芽伸长时,添加物质最优组合为BA3mg/L+IAA1.Omg/L+GA32.0mg/L+AgNO30mg/L,不定芽伸长力为19.35%。各因素对于洛椒九号不定芽分化的影响大小为BA×IAA>IAA>BA>AgNO3>GA3>IAA×GA3>BA×GA3。6.黔椒五号和洛椒九号两个辣椒品种的不定芽生根采用MS基本培养基+蔗糖30.0g/L最为合适。7.黔椒五号和洛椒九号器官发生是外起源。8.黔椒五号在培养6天维管束启动分裂,而洛椒九号维管束在培养3天启动分裂,较早。9.黔椒五号和洛椒九号外植体器官发生过程相近,先是维管束启动分裂,然后薄壁组织启动分裂,之后形成微管组织结节和分生组织结节。10.洛椒九号器官发生有细胞大小接近、近圆形、排列紧密的非胚性愈伤组织大量增殖过程,而黔椒五号未发现此过程。
【作者】臧顺；
【导师】王启军；
【作者基本信息】西南大学，蔬菜学，2014，硕士
【关键词】辣椒；器官发生；外植体；离体再生；细胞组织学；

【参考文献】
[1]朱新雯.“大跃进”运动中群众心理的探析与启示[D].华东师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2003,硕士.
[2]张智翔.钛酸铜钙/钛酸锶钡多层薄膜制备及电学性能研究[D].西北大学,微电子学与固体电子学,2013,硕士.
[3]杨霁,李剑,孙才新,王有元,杨眉.基于小波多尺度变换的局部放电图像识别方法[J].电力系统自动化,2005,22:69-72.
[4]付珍.著作追续权的立法构想[D].河北经贸大学,民商法,2012,硕士.
[5]陈杰明.基于GOOSE的10kV简易母线保护研究和应用[J].电力系统自动化,2011,04:96-99.
[6]张琳.舒伯特《三首钢琴曲D.946》的音乐特征与演绎分析[D].西安音乐学院,钢琴教学与演奏,2013,硕士.
[7]谢刚.复杂高镁低镍硫化矿生物浸出液中镍镁的分离研究[D].北京有色金属研究总院,有色金属冶金,2014,硕士.
[8]王薇.基于HTM的谣言传播个体记忆—预测模型研究[D].华中科技大学,系统工程,2013,硕士.
[9]潘春树.磁共振高分辨扩散加权成像在慢性胰腺炎的临床应用研究[D].第二军医大学,影像医学与核医学（专业学位）,2013,硕士.
[10]刘志远.大倾角煤层综放面倒架机理与再稳定技术研究[D].西安科技大学,采矿工程,2014,硕士.
[11]邱雯.企业人力资源管理模式研究[D].厦门大学,2002.
[12]李彬.解决北京农民工住房问题研究[D].首都经济贸易大学,区域经济学,2013,硕士.
[13]刘丽娜.三氧化二砷联合免疫抑制剂治疗再生障碍性贫血的初步研究[D].郑州大学,肿瘤学（专业学位）,2013,硕士.
[14]王冠英.临汾地区历代书院研究[D].山西师范大学,专门史,2014,硕士.
[15]翁沙羚.文晖大桥健康监测评估系统的研究与开发[D].浙江大学,2004.
[16]李先云.我国对外直接投资技术逆向溢出的实证分析[D].南京师范大学,政治经济学,2012,硕士.
[17]向利.从歌剧《乡村骑士》探析真实主义歌剧的真实性[D].湖南师范大学,音乐学,2013,硕士.
[18]周文君.成功智力理论下的小学语文作业设计[D].山东师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[19]易灵芝,王根平.基于电力系统线路信道的数据帧同步技术[J].电力系统自动化,2005,08:79-82.
[20]金凯东.哈行沈阳分行人力资源管理激励机制方案设计[D].哈尔滨理工大学,工商管理,2012,硕士.
[21]王敏.言语实践观照下的初中语文阅读教学设计研究[D].宁波大学,课程与教学论,2014,硕士.
[22]黄斌.利用GPS技术实现中国VLBI网高精度时频同步技术方案[J].宇航计测技术.1993(03)
[23]王耀锋,王红卫,张乃禄,李万民,杜宇平,苏煜.全数字直流调速器在辊道退火炉传动系统中的应用[J].冶金自动化,2003,S1:115-117.
[24]赵瑞元.大佛寺矿采空区自燃多指标气体早期预报技术研究[D].西安科技大学,安全技术及工程,2014,硕士.
[25]魏延伟.新型两亲聚合物复鞣加脂剂的制备及性能研究[D].齐鲁工业大学,皮革化学与工程,2014,硕士.
[26]徐满满.城际轨道交通引入枢纽地区车站选址方案比选研究[D].长安大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[27]安亭.抗战时期党的形势政策教育及其现实启示研究[D].延安大学,思想政治教育,2014,硕士.
[28]刘涛.语文情感教学的思考[D].华东师范大学,教育,2001,硕士.
[29]程海林.径向柱塞式液压马达等接触应力内曲线的研究[D].浙江工业大学,2004.
[30]王蕊.基于控制变换的代码混淆技术研究[D].中北大学,计算机技术,2014,硕士.
[31]王月.穴位按摩配合电针治疗急性周围性面瘫的临床疗效观察[D].黑龙江中医药大学,针灸推拿学（专业学位）,2014,硕士.
[32]王维维.帕金森病转基因小鼠血浆Ghrelin水平的变化及其机制探讨[D].青岛大学,生理学,2013,硕士.
[33]张凯.地下结构多尺度分析[D].大连理工大学,水工结构工程,2013,硕士.
[34]黄自元.扫描探针显微镜智能自动化策略研究及应用[D].上海大学,2004.
[35]宋艳艳.荀子法律思想及其当代价值研究[D].曲阜师范大学,思想政治教育,2013,硕士.
[36]齐佳妮.牙周炎患者种植二期术后牙龈愈合状况的研究[D].山东大学,口腔临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[37]刘晓强.祖师麻药材质量标准研究[D].山西医科大学,药物化学,2013,硕士.
[38]王成山,马立克.含风电场电源的配电系统三相潮流计算(英文)[J].电力系统自动化,2006,16:21-26.
[39]单丹丹.普通乡镇高中英语课堂教师语码转换实证研究[D].东北师范大学,课程与教学论,2012,硕士.
[40]黄苑琳.微表情在电影艺术呈现中的价值研究[D].西南交通大学,艺术学,2013,硕士.
[41]仝菲.媒介生态视域下的网络水军价值研究[D].安徽大学,新闻学,2013,硕士.
[42]陈瑞欣.多因素资产组合模型及其进化规划算法研究[D].西北工业大学,应用数学,2004,硕士.
[43]彭兆祺.经济转型期我国地区收入差距研究[D].北京交通大学,2009.
[44]李晓丹.睾酮与青少年分裂型人格障碍的相关研究[D].大连医科大学,精神病与精神卫生学,2012,硕士.
[45]KHALIDShehzad,NAFTELAndrew.基于轨迹系数特征空间表示法的含有异常情况的自动运动学习(英文)[J].自动化学报,2010,05:655-666.
[46]许少亚.两类多维倒向随机微分方程解的存在唯一性[D].中国矿业大学,应用数学,2014,硕士.
[47]李贞玉,唐存国,胡爽,王成静.离子液体负载型分子筛的制备及对染料的吸附[J].环境工程学报,2014,09:3848-3852.
[48]李依璘.不同容量单相逆变器并联控制技术研究[D].重庆大学,电气工程,2014,硕士.
[49]王晓荣,荣朝和,盛来芳.环状铁路在大都市交通中的重要作用——以东京山手线铁路为例[J].经济地理,2013,01:54-60.
[50]王光军,田大伦,闫文德,朱凡,项文化,梁小翠.改变凋落物输入对杉木人工林土壤呼吸的短期影响[J].植物生态学报,2009,04:739-747.