【摘要】易错PCR方法,建立了含有9654个转化子的突变体库。通过三丁酸甘油酯平板透明圈法、小量发酵和大量发酵法筛选突变体库。最终获得9个突变菌株,经发酵酶活测定发现酶活最高提高到原始菌株的1.24倍,没有达到预期的效果。同时利用易错PCR方法对疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyceslanuginosus)脂肪酶LN进行定向进化。采用易错PCR方法,建立了含有11736个转化子的突变体库。通过筛 […]

【摘要】过氧化氢酶(Hydrogenperoxide:hydrogen-peroxideoxidoreductase,EC1.11.1.6)是机体抗氧化体系的一种关键酶,可高效分解生理和病理条件下生命体产生的过氧化氢,减轻活性氧簇(Reactiveoxidativespecies,ROS)对组织造成的氧化损伤。本研究结果表明,过氧化氢酶以及机体ROS的含量与病毒性疾病的发展过程密切相关。病毒入侵导 […]

【摘要】毕赤酵母作为外源蛋白的表达系统,具有遗传操作简单,培养基成分明确且价格低廉,高效分泌表达能力,翻译后的修饰等突出优点,越来越多的被应用于外源蛋白的表达。低温培养增加外源蛋白产量的报道很多,但其背后的机制并不是很清楚。近年来,错误折叠蛋白与细胞内质网压力和细胞自噬等方面的研究提示,外源蛋白的错误折叠可能是影响蛋白分泌产量的一个主要因素。在本研究中,我们利用重组表达人白细胞介素-10(rhIL […]

【摘要】毕赤酵母能够在高效表达外源蛋白的同时，对外源蛋白进行翻译后的正确折叠和加工修饰，已成为目前表达外源蛋白尤其是人源药物蛋白所广泛采用的表达宿主之一。然而随着越来越多外源蛋白在毕赤酵母中分泌表达，发现某些外源蛋白在分泌表达过程中存在胞内聚集而导致分泌表达量较低，宿主蛋白酶对外源蛋白存在不同程度的降解等问题。本研究室前期研究结果也表明，采用相同的载体和宿主表达系统，在各自优化后的培养和表达条件下 […]

【摘要】背景乳糖不耐症是近年来引起广泛关注的一种疾病,大多数患者由于乳糖酶表达异常,在进食牛奶和乳制品后不能将乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,导致乳糖在肠道堆积并被肠道菌群发酵后,产生腹痛、腹胀、腹泻、恶心和呕吐等胃肠道症状及其他全身性症状。乳糖不耐症的患者出于对以上不适症状的恐惧,一般都拒绝食用牛奶和乳制品,从而丧失了一种优质的高蛋白质和高矿物质食品,他们当中的很多人因为维生素D和钙的摄入量不足,发生 […]