野生仙人掌多糖的分离纯化及结构初步分析

【摘要】本文以野生仙人掌(OpuntiadilleniiHaw.)为原料,对仙人掌多糖(OpuntiadilleniiHaw.polysaccharides,ODP)的提取、分离纯化及结构进行了研究,主要取得了以下主要结果：1.以野生仙人掌为原料,以热水浸提法提取粗多糖,采用单因素实验、响应面分析法优化提取野生仙人掌粗多糖的工艺,对其得率影响的因素依次为：时间>温度>液料比,最佳工艺条件为：温度93℃、时间3.5h、液料比62：1,重复三次,野生仙人掌粗多糖的得率为24.97%。2.采用三氯乙酸(TCA)法、Sevag法、蛋白质等电点法对仙人掌粗多糖进行脱蛋白研究,以蛋白脱除率、多糖损失率和抗氧化性损失率为指标。结果表明：三氯乙酸法脱蛋白效果最好,浓度为3%时,蛋白脱除率为80.28%,多糖损失率为5.98%,抗氧化性损失率为34.56%。3.采用DEAESepharoseFastFlow柱层析法纯化除蛋白后的仙人掌多糖。主要考查了洗脱方式、洗脱流速对仙人掌多糖纯化效果的影响。实验结果表明,在上样量为6mL,上样浓度为15mg/mL,洗脱流速为2mL/min时,用0.02mol/L、0.1mol/L、0.3mol/LNaCl分步洗脱,获得两个多糖组分,分别命名为ODP-Ⅰ和ODP-Ⅱ.4.采用SephacrylS-400凝胶柱层析法对ODP-Ⅱ进一步纯化研究。该试验中考查了流速,上样量及氯化钠浓度对凝胶纯化效果的影响。实验结果表明,0.015mol/L氯化钠洗脱,上样浓度为5mg/mL,上样1mL,流速为0.4mL/min,得到2个组分,分别命名为ODP-Ⅱa和ODP-Ⅱb。用紫外光谱扫描及凝胶层析法鉴定了组分ODP-Ⅱa,结果表明其为分子量均一的组分。5.采用SephacrylS-400凝胶层析法测得ODP-Ⅱa的分子量为934kD,并测得其糖醛酸含量为30.25%。根据碘-碘化钾试验以及刚果红试验可知,仙人掌多糖ODP-Ⅱa是具有多分支或侧链的大分子,并且不具有三螺旋构象。6.论文利用响应面分析法优化热水浸提野生仙人掌粗多糖的工艺,在此基础上综合比较三种脱蛋白方法的效果,利用柱层析的方法得到分子量均一的多糖,并对其结构进行了初步分析。为仙人掌多糖的深入研究提供了理论基础,对促进仙人掌多糖保健品和药品的开发,加快仙人掌工业化应用的步伐有重要意义。
【作者】朱苗；
【导师】张桂和；曾富华；
【作者基本信息】海南大学，食品科学，2014，硕士
【关键词】野生仙人掌；多糖；提取；分离；纯化；结构；

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