吡格列酮和硫氢化钠对培养人脐静脉内皮细胞内胱硫醚-γ-裂解酶影响的相关性研究

【摘要】目的：探讨硫氢化钠和吡格列酮对体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）内胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）的相关研究。方法:(1)CCK-8法检测不同处理组HUVEC的细胞活性。(2)实时荧光定量聚合酶链反应法（real-timepolymerasechainreaction，RT-PCR）检测不同处理组HUVEC细胞中的CSEmRNA表达，(3)Western-blot法检测不同处理组HUVEC细胞中CSE蛋白的表达。(4)敏感硫电极法检测不同处理组HUVEC细胞的H2S含量，以此计算CSE酶的活性。结果:(1)随着浓度的增加（10μM～1000μM），Hcy浓度依赖性降低HUVEC细胞活性，并在1000μM表现出显著的毒性作用（P<0.01）；Hcy浓度依赖性减少HUVEC对CSEmRNA的表达和蛋白的表达；并且Hcy浓度依赖性降低HUVECCSE酶活性（P<0.05）。(2)在浓度范围（10μM～30μM）时，随着浓度增加，NaHS对细胞活性有提高作用。在浓度范围（50μM～1000μM）时，随着浓度增加，NaHS对细胞活性有降低作用（P<0.05）。(3)当30μMNaHS与1000μMHcy组共同作用时，HUVEC细胞活性表现出不受1000μMHcy影响，反之，细胞活性增加、细胞内CSEmRNA的表达和蛋白的表达增加，同时，CSE酶活性增加（P<0.05）。(4)10μM吡格列酮组有提高细胞活性的作用。而其他浓度组（1μM、100μM）没有此作用。当10μM吡格列酮与1000μMHcy组共同作用时，HUVEC细胞表现出不受1000μMHcy的影响反而提高了细胞活性，同时也提高了细胞内CSEmRNA和蛋白的表达水平，并且提高了CSE酶活性（P<0.05）。结论:①高Hcy（高浓度同型半胱氨酸）可致HUVEC损伤。②一定浓度的NaHS或PPARγ激动剂吡格列酮能降低高Hcy所致的HUVEC损伤。③NaHS和吡格列酮降低高Hcy所致的HUVEC的损伤与提高内源性H2S的产生有关。④NaHS和吡格列酮通过增加细胞内CSE的表达水平与活性来提高内源性H2S的产生。
【作者】刘会娟；
【导师】周春阳；
【作者基本信息】川北医学院，药理学，2014，硕士
【关键词】硫化氢；同型半胱氨酸；过氧化物酶体增殖激活受体；吡格列酮；胱硫醚-γ-裂解酶；

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