木糖葡聚糖作为胞外基质材料对HepG2细胞的影响
【摘要】目的:肝组织工程中胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)材料起着对种子细胞的支持、营养、信号交流等作用,是肝组织工程中的重要研究内容。本文以木糖葡聚糖(Xyloglucan,XG)为ECM材料,研究其对人肝癌细胞系HepG2细胞在细胞培养板上的贴壁性以及对微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率、胺清除速率、细胞增殖速率以及Cx32(Connexin32,间隙连接蛋白)、E-cadherin(Epithelial-cadherin,细胞黏附分子)表达的影响。方法:采用BCA法测定细胞在XG包被的细胞培养板上的贴壁率;采用HumanSerumAlbuminElisakit、AmmoniaAssayKit分别测定不同浓度XG微囊化细胞的清蛋白合成速率、对体系中NH4+的清除速率;采用BCA法检测微囊化细胞的增殖;采用反转录聚合酶链式反应(Reversetranscriptase-polymerasechainreaction,RT-PCR)技术探究最适XG浓度微囊化细胞中Cx32、E-cadherin的表达情况。结果:HepG2细胞在XG包被的细胞培养板上的贴壁率随着XG浓度的增加呈现增加的趋势,同时微囊内细胞数量随XG浓度的增加、培养时间的增加而增加,说明XG对细胞/基质间相互作用具有促进作用,可促进细胞的生长增殖;微囊化HepG2细胞的清蛋白合成速率与胺清除速率在XG浓度为1mg/mL时最大且较空白组高,说明XG对细胞的合成、胺代谢功能具有一定促进作用;加入XG的微囊内细胞表达Cx32、E-cadherin的时间较空白组提前,说明XG的存在促进了HepG2细胞功能的维持和体现。实验结果显示XG对微囊化HepG2细胞的增殖及肝脏功能的体现都具有一定的促进作用。
【作者】邓小杰;
【导师】祁超;
【作者基本信息】华中师范大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】肝组织工程;木糖葡聚糖;海藻酸钠;微囊化;清蛋白合成;尿素合成;
【参考文献】
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