Slit3/Robo信号在小鼠主动脉平滑肌细胞的表达及外源性Slit3对小鼠主动脉平滑肌细胞增殖、迁移的影响

【摘要】背景与目的：动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是影响人们生存和生活质量的重大疾病，多年来无数的专家和学者对AS的发生机制展开了全方位多层次的研究。尽管其发生机制尚未完全明确，但是多数学者认为血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)的异常增殖和迁移是AS重要病理特征之一。研究证实，VSMCs的增殖和迁移受多种炎症因子、生长因子的共同调控。新近研究发现，神经轴突导向分子Slit3具有促血管生长因子的功能，且与炎性反应密切相关，Slit3还可能以旁分泌和自分泌的机制去调节VSMCs的功能。本课题的目的在于检测Slit3/Robo信号在小鼠主动脉平滑肌细胞(mouseaorticsmoothmusclecells,MASMCs)的表达情况以及了解外源性Slit3蛋白对MASMCs增殖、迁移的影响，探讨Slit3/Robo促进MASMCs增殖、迁移的可能机制，为下一步研究Slit3与AS发病机制的关系奠定理论基础。方法：体外分离培养MASMCs，免疫荧光法鉴定，RT-PCR和免疫组化法检测Slit及Robo受体的表达情况；采用阴性对照组含BSA86ng/mL，实验组分别含外源性Slit30ng/mL、24ng/mL、40ng/mL、80ng/mL以及阳性对照组含PDGF10ng/mL的DMEM培养基刺激MASMCs，利用CCK-8法、细胞划痕法和Transwell小室观测外源性Slit3对MASMCs增殖和迁移的影响。结果：1、原代细胞培养、鉴定及Slit、Robo检测：成功培养出MASMCs，经鉴定证实为目的细胞，检测到MASMCs上存在Slit2、Slit3及Robo1、Robo4基因的转录及蛋白的表达。2、细胞增殖检测：外源性Slit3可促进MASMCs的增殖活性，在Slit340ng/mL细胞增殖活性最大，差异性具有统计学意义(P<0.05)。3、细胞迁移检测：外源性Slit3可促进MASMCs的迁移，在Slit380ng/mL细胞迁移效应最大，差异性具有统计学意义(P<0.05)。结论：1、在体外培养的MASMCs上有Slit2、Slit3及Robo1、Robo4基因及蛋白的表达。2、外源性Slit3可促进MASMCs的增殖与迁移。
【作者】倪伟；
【导师】刘涛；
【作者基本信息】川北医学院，内科学，2014，硕士
【关键词】Slit3；Robo1；Robo4；血管平滑肌细胞；增殖；迁移；PDGF；

【参考文献】
[1]刘金凤.多媒体电子教室系统的分析与设计[D].燕山大学,计算机技术,2012,硕士.
[2]马建红.小学数学计算教学与问题解决教学有效结合的研究[D].杭州师范大学,学科教育（专业学位）,2011,硕士.
[3]熊力.无取向硅钢在家用微电机中的应用研究[D].华中科技大学,电气工程,2013,硕士.
[4]曾铭衡.氧化锌压敏电阻器的交流特性[D].华南理工大学,材料工程,2013,硕士.
[5]尹芳,陈迪钊,刘佳佳,陈曲,孔海霞,伍超娟.氧化石墨烯的制备工艺及热稳定性[J].材料科学与工程学报,2013,03:336-340+408.
[6]宋宗莹,高春霞,张雪松.神华铁路运输统计系统分析与设计[J].综合运输,2014,02:68-73.
[7]和树宝.熔融结晶法分离胺类化合物的研究[D].青岛科技大学,化学工艺,2012,硕士.
[8]叶媚.南京老年人社区生活环境设计研究[D].南京航空航天大学,设计艺术学,2013,硕士.
[9]焦邵华,李娟,李卫,刘勇.大型火力发电厂电气控制系统的实现模式[J].电力系统自动化,2005,15:81-85+95.
[10]许西美.《所罗门之歌》中男性形象分析[D].安徽大学,英语语言文学,2013,硕士.
[11]张磊.中国国家建设的空间战略[D].复旦大学,政治学理论,2012,硕士.
[12]鲍淑燕.雅砻江下游河流阶地研究及其新构造运动意义[D].中国地质大学（北京）,第四纪地质学,2014,硕士.
[13]万涛.铁路物流中心选址布局规划问题研究[D].北京交通大学,2009.
[14]周小涵.通风对寒区隧道抗防冻的影响及合理设防范围研究[D].西南交通大学,建筑与土木工程,2012,硕士.
[15]张德忠.中国石油天然气总公司1990年地球物理勘探活动情况[J].石油地球物理勘探,1991,06:795-796.
[16]赵红梅.我国外商直接投资宏观调控法律问题研究[D].山西大学,经济法学,2004,硕士.
[17]徐世涛.流场、河床及航行的动态演示系统[D].清华大学,水力学及河流动力学,2001,硕士.
[18]张薇.外资上市法律问题研究[D].华东政法学院,国际法,2003,硕士.
[19]凌瑜璐.文化视野下的城市化[D].中国艺术研究院,艺术学,2012,硕士.
[20]彭晓雷.关于美术馆公共教育之“馆校合作机制”的研究[D].首都师范大学,美术学,2013,硕士.
[21]段小凯.对社区葡萄糖调节受损人群进行糖尿病健康教育的意义[D].郑州大学,内科学（专业学位）,2013,硕士.
[22]周文姝,赵波,黄晓华,杨小弟.基于石墨烯-壳聚糖修饰电极电化学测定4-壬基酚[J].分析化学,2013,05:675-680.
[23]陈静.品牌权益的构成要素及其对顾客响应的影响[D].浙江大学,2007.
[24]夏庆国.磁电层状结构振动与有限元分析[D].宁波大学,固体力学,2012,硕士.
[25]谭以柯.现代时尚女装品牌服装设计及推广策略构建研究[D].湖南师范大学,设计艺术学,2013,硕士.
[26]陈根军,顾全.基于CIM的配电网一体化追踪拓扑[J].电力系统自动化,2009,03:59-63.
[27]焦在滨,杨黎明,宋国兵,姚旭,索南加乐.考虑频变参数补偿算法的长线距离保护[J].电力系统自动化,2013,02:102-107.
[28]吴晓园.基于格的全同态加密方案的研究与设计[D].西安电子科技大学,信息安全,2012,硕士.
[29]王君.长官庙油田稳产方案研究[D].西安石油大学,石油与天然气工程（专业学位）,2012,硕士.
[30]惠子南.小功率数字电源的研究[D].北京交通大学,2014.
[31]周君涛.新型催化体系下β-取代醇的合成研究[D].江苏科技大学,应用化学,2014,硕士.
[32]张微微.内部控制对员工服务质量及员工绩效的影响[D].哈尔滨工业大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[33]许勇,郑炳武,韩文功,姜玉成.三维地震勘探复杂小断块的地质效果[J].石油地球物理勘探,1987,03:284-291.
[34]李永航.刑讯逼供的证明机制研究[D].西南政法大学,诉讼法学,2012,硕士.
[35]吴秉钧.OSM射频同轴连接器的研制[J].宇航计测技术.1989(03)
[36]张学广,徐殿国.电网对称故障下基于activecrowbar双馈发电机控制[J].电机与控制学报,2009,01:99-103.
[37]陆雯.精密伺服转台系统先进故障诊断技术研究与实现[D].南京航空航天大学,2005.
[38]刘若飞.汽油机使用甲醇汽油混合燃料的燃烧和排放仿真及试验研究[D].浙江大学,动力机械及工程,2013,硕士.
[39]常歆可.中学生感恩教育研究[D].华中师范大学,学科教学,2013,硕士.
[40]杨波.微型桩在青银高速公路（河北段）沉降病害治理中的应用研究[D].西安科技大学,地质工程,2014,硕士.
[41]姜颖.朝鲜韩国文体论研究的对比研究[D].复旦大学,外国语言学及应用语言学,2012,博士.
[42]张幂.基于动态语言的系统描述、验证和综合[D].复旦大学,2009.
[43]周沁雅.《德国》杂志中的德国形象—议程设置及态度塑造策略分析[D].浙江大学,德语语言文学,2014,硕士.
[44]董晓航.意识流、诗意化与音乐性——论伍尔夫《到灯塔去》的艺术[D].吉林大学,比较文学与世界文学,2004,硕士.
[45]曹康,朱金.国内城市规划及规划相关期刊的评价研究——基于问卷访谈及统计分析[J].国际城市规划,2014,01:91-100.
[46]周正.双头双光点水松纸激光打孔设备的光路设计[D].华中科技大学,光学工程,2013,硕士.
[47]王亚敏.有意味的事物—现代主义艺术潮流中的斯坦利·斯宾塞[D].杭州师范大学,美术学,2007,硕士.
[48]吴双甜.软质可拆式屏芯在屏风设计中的应用研究[D].中南林业科技大学,工业设计工程,2014,硕士.
[49]赖巧燕.话语分析与汉维翻译[D].新疆大学,中国少数民族语言文学,2013,硕士.
[50]杨海凤.恩格斯《自然辩证法》的生态思想研究[D].曲阜师范大学,马克思主义哲学,2013,硕士.