siRNA沉默人胃癌细胞COX-2基因对Notch信号通路影响的研究

【摘要】目的：1.研究siRNA沉默COX-2基因表达对人胃癌细胞增殖和凋亡能力的影响。2.研究siRNA沉默COX-2基因表达对人胃癌细胞Notch信号通路的影响及相关机制。方法：siRNA干扰技术沉默胃癌MKN45细胞COX-2基因,将实验分为三组,转染siRNA-COX-2的胃癌细胞为实验组,转染siRNAControl为阴性对照组,以未转染的MKN45细胞为空白组。应用荧光定量-PCR检测靶向沉默COX-2基因的表达和沉默效率,以及Notch信号通路相关基因的表达水平；蛋白免疫印记法检测COX-2,N1ICD,N2ICD和Hes1蛋白表达水平；细胞计数法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测分析各组细胞凋亡。结果：转染siRNA沉默COX-2基因可明显下调COX-2的表达量,实验组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),表达抑制率为(81.81+3.82)%；Notch信号通路下游基因Hes1mRNA表达水平也下调,差异有统计学意义(P<0.05),表达抑制率为(74.01±4.35)%;Notch1和Notch2mRNA表达水平无明显变化,与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)；沉默COX-2基因后COX-2,N1ICD,N2ICD和Hes-1蛋白表达明显受到抑制,实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞计数法检测在转染后第4天细胞增值能力明显下降(P<0.05)；沉默COX-2基因可提高细胞凋亡率,转染48小时后实验组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：靶向沉默COX-2基因抑制人胃癌细胞增殖和促进细胞凋亡可能是通过抑制Notch信号通路实现。
【作者】王璟；
【导师】刘宏斌；
【作者基本信息】兰州大学，外科学，2014，硕士
【关键词】胃肿瘤；环氧合酶-2；RNA干扰；Notch信号通路；

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