不同产地黄芩药材及其制剂连翘败毒片的指纹图谱研究

【摘要】指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药中所共有的、具有特异性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。其特点在于：通过指纹图谱的特异性,能有效鉴别样品的真伪或产地；及通过指纹图谱主要特征峰的含量或比例的制定,能有效控制样品的质量,确保样品质量的相对稳定。因此,在有效成分不完全明确的前提下,特定中药材或中成药的特征指纹图谱,对于有效地控制中药材或中成药的质量,具有重要的意义。目前指纹图谱已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。当前,国内外认可和研究较多的为高效液相色谱指纹图谱,它是现在应用最多的一类,具有分离效能高,分析速度快等优点。如运用DAD检测器,可得到三维图谱,因而适用于成分比较复杂且在紫外光区有吸收的药物的分析。其它指纹图谱技术的发展,也将对中药质量控制有深远的意义,现仅就中药材HPLC指纹图谱做一探讨。黄芩是我国著名的传统中药,是唇形科植物黄芩的干燥根。最早收载于《神农本草经》,列为草根药的上品。它含黄酮类、谷甾醇、苯甲酸、黄芩酶、淀粉等,其主要有效成份是黄酮类化合物,迄今已分离出约40种黄酮,如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A等。黄芩性寒,味苦归肺胆胃大肠经。具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效,可用于湿热泻痢、肺热咳嗽、热病烦渴、黄疸、目赤肿痛、积热吐血、胎动不安、痛肿疮疖等症。它具有多种药理作用,近年来国际上对黄芩的研究呈上升趋势。河北是黄芩的道地产区,其药效学实验显示其某些疗效确实较好。并以河北承德产黄芩质量最佳,被称为“热河黄芩”。连翘败毒片为传统的清热解毒、消肿止痛中药,临床主治疮疖溃烂、灼热发烧、流脓流水、丹毒疱疹、疥癣疼痒等症。近也有报道其具有抗内毒素及提高机体细胞免疫、体液免疫的作用。目的：1、建立河北省8个不同产地野生黄芩药材的指纹图谱,并进一步建立河北省黄芩药材的质量控制标准图谱体系。2、建立13个不同产地黄芩药材指纹图谱,分析其共有性和特异性,为鉴定黄芩的种源和质量提供依据。3、测定不同直径黄芩药材黄芩苷含量,分析黄芩苷含量与黄芩直径的关系,为鉴定野生黄芩的生长期提供依据。4、对黄芩复方制剂连翘败毒片做指纹图谱分析,并检测黄芩苷的含量,建立其质量控制标准。方法：1、采用水煎回流提取法对不同产地的黄芩药材进行提取,以四元流动相色谱检测体系,建立各黄芩样品的HPLC指纹图谱。2、采用多指标分析,对黄芩多种有效成分进行含量检测,并通过方法学验证,建立黄芩的质量评价体系。3、采用居群取样,对13个不同产地的每个产地的10-24个取样点的每根黄芩药材做指纹图谱分析,采用高相液相色谱法对不同产地黄芩药材做指纹图谱鉴别。4、对黄芩复方制剂连翘败毒片采用和黄芩一样的检测体系,建立10批样品的指纹图谱,并对其黄芩苷成分做含量测定,并通过方法学验证,建立连翘败毒片的质量评价体系。结果：1、在黄芩药材的指纹图谱中,70分钟内分离出15个共有指纹峰,其中8号是黄芩苷,12号是汉黄芩苷,13号是黄芩素,14号是汉黄芩素,15号是千层纸素A。2、8批河北不同产地的黄芩药材的共有峰的分离度良好,保留时间稳定,重现性好,且在不同种群间相互吻合较好,其对照指纹图谱按面积归一化法计算,15个共有峰的面积占总峰面积百分比分别为0.076%,0.176%,1.651%,0.941%,0.904%,0.202%,1.063%,60.519%,3.131%,8.986%,13.054%,3.481%,0.105%,2.360%和0.899%。故可作为河北省黄芩的特征指纹。3、河北围场城边山上的黄芩药材的指纹图谱在保留时间4.4分钟有明显的指纹峰,峰高与参比峰汉黄芩苷比较大体是1：3,而其它各产地黄芩的指纹图谱在此保留时间无信号。4、黄芩药材直径与黄芩苷含量关系分析结果证明,随黄芩药材直径的增大,黄芩苷的含量逐渐降低。5、在连翘败毒片的指纹图谱中,70分钟分离出13个共有指纹峰,其中8号峰为黄芩苷,其黄芩苷的平均含量是4.36mg/片。结论：1、河北围场城边山上的黄芩药材的指纹图谱具有一个特异指纹峰,而其他各产地黄芩药材指纹图谱无此峰,仅其它特征峰的峰高比例有明显差异。2、随黄芩药材直径的增大,黄芩苷的含量逐渐降低,黄芩苷含量可作为判断黄芩生长期的一个因素。3、本文所建立的连翘败毒片的指纹图谱,以黄芩苷为参比峰,可作为连翘败毒片质量控制指标之一。
【作者】潘俊英；
【导师】刘永平；李守拙；
【作者基本信息】承德医学院，中药学，2011，硕士
【关键词】黄芩；产地；指纹图谱；高效液相色谱法；紫外分光光度法；

【参考文献】
[1]宋天棋.管弦乐《和声探赜》中的后简约主义音乐语言特征[D].沈阳音乐学院,音乐学,2013,硕士.
[2]金玉红.石墨烯及石墨烯基二元和三元纳米复合材料制备及其在超级电容器中的应用[D].北京化工大学,2013.
[3]杨静.清真词传播与接受研究[D].苏州大学,中国古代文学,2014,硕士.
[4]贾琳,李明.基于数据挖掘的电信客户流失模型的建立与实现[J].计算机工程与应用,2004,04:185-187.
[5]刘明兰,王运梅,李京兵.Bang-Bang大林算法在炉温微机控制系统中的应用[J].冶金自动化,1990,05:13-15+8.
[6]李轩.P2P流量控制系统的设计与实现[D].北京邮电大学,信息安全,2013,硕士.
[7]王敏洁.客体间的一致性效应对场景识别的影响[D].浙江理工大学,应用心理学,2013,硕士.
[8]杨云.侦查阶段辩护律师调查取证权探究[D].安徽大学,诉讼法学,2014,硕士.
[9]勾文芹.我国税收执法风险及防范研究[D].河北经贸大学,税务,2014,硕士.
[10]史书琴.空间交会近距离实时控制与仿真研究[D].哈尔滨工业大学,控制科学与工程,2014,硕士.
[11]喻艳.新中国劳动力产权制度变迁研究[D].广东财经大学,国民经济学,2014,硕士.
[12]李家鹏.生活垃圾渗滤液吸附堆肥品特性及其对植物生长的影响研究[D].长安大学,环境工程,2013,硕士.
[13]王晓波,严干贵,郑太一,范国英,王建勋,郭雷,董存,崔运海,周志强.双馈感应风电机组联网运行仿真及实证分析[J].电力系统自动化,2008,07:87-91.
[14]锡林高娃.兴安盟地区中小学民族音乐教育调查研究[D].内蒙古师范大学,中国少数民族艺术,2013,硕士.
[15]刘旭.影响大跨度斜拉桥动力特性的因素[D].长安大学,建筑与土木工程（专业学位）,2014,硕士.
[16]张振军.纯电动汽车自适应巡航控制系统控制策略研究[D].吉林大学,车辆工程,2013,硕士.
[17]王志国.歧北凹陷成岩作用数值模拟与储层孔隙度预测[D].大庆石油学院,矿产普查与勘探,2004,硕士.
[18]张克喜.MIMO系统中多小区间干扰抑制技术研究[D].重庆大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[19]李亚昕.素质导向高等职业教育课程模式研究[D].西南大学,教育学原理,2013,硕士.
[20]徐蕾,孙金生,王执铨.自适应滤波的研究新方向[J].控制与决策,1999,01:9-14.
[21]喻华兵.仿生超疏水纳米材料/聚氨酯涂层的研究[D].太原理工大学,化学工程与技术,2014,博士.
[22]立早.中国地球物理学会物理模型试验学术讨论会在昆明举行[J].石油地球物理勘探,1986,03:332.
[23]孙妙迪.宪法视野下的警察权力[D].中国政法大学,宪法与行政法学,2014,硕士.
[24]韩德君.从女性主义叙事学解读凯特·肖邦的《觉醒》[D].安徽大学,英语语言文学,2013,硕士.
[25]常俊英.基于网络的家园共育交互平台的研究[D].辽宁师范大学,现代教育技术（专业学位）,2012,硕士.
[26]周吉.中部六省资源、环境与社会经济协调发展的评估研究[D].江西财经大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[27]赵惠文.枕形包装机横封器的性能研究[D].中北大学,机械制造及其自动化,2014,硕士.
[28]张富启.半导体封装质量改善研究[D].华南理工大学,工业工程,2014,硕士.
[29]李传霞.广州市四大公园观赏植物造景的初步研究[D].中南林学院,植物学,2004,硕士.
[30]石虹.地方高校协同创新研究[D].西北师范大学,公共管理,2013,硕士.
[31]刘扬.论不真正无因管理制度在我国的构建[D].湖南师范大学,民商法学,2013,硕士.
[32]周珂.“三自课堂”在高中数学教学中的初步实践与思考[D].华中师范大学,学科教学,2014,硕士.
[33]陈墅香.闽南校园湿地夏季降温效应[D].华侨大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[34]陈青青.基于专家调查法：专家学者对海外中国大学生的跨文化能力评价研究[D].华中科技大学,外国语学院英语语言文学,2013,硕士.
[35]朱保锋.基于WEB的餐饮管理系统设计与实现[D].郑州大学,电子与通信（专业学位）,2013,硕士.
[36]邬新乐.校园一卡通系统安全体系结构分析和设计[D].内蒙古科技大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[37]钦少君.烟台市大众户外运动开展现状及对策研究[D].山东体育学院,运动训练,2012,硕士.
[38]张新金.盾构法与浅埋暗挖法结合建造地铁车站关键技术研究[D].北京交通大学,2010.
[39]郭美丽.拟南芥隐性抗盐单基因突变体的筛选与鉴定[D].山西大学,植物学,2004,硕士.
[40]董晓.高职院校传统音乐教学的理论构建与实施策略研究[D].曲阜师范大学,艺术学,2013,硕士.
[41]高建忠.诸城农村集中居住研究[D].山东大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[42]刘朕哲.阳离子明胶纳米微球的制备及其性能研究[D].吉林大学,口腔医学,2013,硕士.
[43]朱红亚.多源气体泄漏扩散的实验及数值模拟研究[D].中国科学技术大学,2013.
[44]叶倩,崔宝同.具有间歇耦合的复杂动态网络量化同步分析[J].控制与决策,2013,05:731-735.
[45]王晓娇,李香俊,李磊磊,段辉敏,罗川南.纳米金修饰的磁性氧化石墨烯分子印迹电化学传感器测定双酚A[A].中国化学会.中国化学会第29届学术年会摘要集——第04分会：纳米生物传感新方法[C].中国化学会:,2014:1.
[46]张健.服装制造数据协同与辅助决策系统的研究与设计[D].苏州大学,计算机技术（专业学位）,2013,硕士.
[47]黄威.土地整治规划环境影响评价研究[D].吉林大学,土地资源管理,2013,硕士.
[48]郝卿.我国房地产业融资渠道研究[D].长安大学,会计（专业学位）,2014,硕士.
[49]王九欢.基于软集合理论的图书馆网站评价研究[D].重庆大学,图书馆、情报与档案管理,2014,硕士.
[50]陈广.知觉负荷、注意窗口对情绪面孔记忆的影响[D].山东师范大学,基础心理学,2013,硕士.