小蓟多糖的提纯、硫酸酯化及抗氧化活性研究

【摘要】小蓟是近年来新兴的一种食药兼用的野菜，因其富含多种活性成分，因而引起全世界的极大关注。由于小蓟具有多种生物活性，具有广泛的应用价值和前景，因而对其活性成分的提取分离就显得尤为重要。活性多糖分布广泛，主要来源于植物、动物、微生物等。多年来的药理研究表明多糖作为免疫调节剂，在抗肿瘤、抗病毒，抗感染、抗氧化、降血糖血脂等各个方面均有广泛的作用，而且安全低毒性，是现代医学与食品领域关注的研究热点之一。然而，目前对于小蓟多糖的研究却鲜有报道。本文以药食两用的传统中药材小蓟为实验材料，对小蓟多糖的提取、分离、纯化、硫酸酯化改性及抗氧化活性进行了研究。主要的结论如下：1.采用索氏回流法对小蓟粉末进行脱脂，利用热水-超声辅助法进行粗多糖的提取，并通过蒽酮-浓硫酸法测定其含量，结果：脱脂率为7.925%，小蓟多糖的含量为6.43%。并以脱蛋白率及多糖损失率为指标，分别考察了Sevag法与TCA法对小蓟叶片多糖的脱除蛋白效果，结果表明：Sevag法与TCA法脱除蛋白率分别为70.52%、73.01%，多糖损失率分别为16.29%、29.74%，Sevag法为小蓟叶片多糖脱除蛋白的优选方法。利用55%、75%、95%的乙醇分别对小蓟粗多糖进行沉淀，获得了三种级分的多糖（CSPS-Ⅰ、CSPS-Ⅱ、CSPS-Ⅲ），多糖得率分别为5.75%、7.01%、8.67%。2.以静态吸附法和动态吸附法分别考察了D101、D4020、AB-8、X-5四种大孔吸附树脂对小蓟多糖吸附和解析的纯化效果，结果显示：四种树脂对小蓟多糖的纯化效果以AB-8树脂纯化为最优，且动态吸附法的吸附率与解析率明显优于静态吸附法。在以上筛选实验的基础上，通过单因素实验和正交实验优化了AB-8树脂动态吸附纯化小蓟多糖工艺条件，最佳条件为：上样液浓度为2mg/mL，上样量为20mL，流速为2.0mL/min，洗脱剂pH值为7。3.采用浓硫酸法分别对CSPS-Ⅰp、CSPS-Ⅱp、CSPS-Ⅲp进行了硫酸酯化的修饰，得酯化产物为CSPS-Ⅰps、CSPS-Ⅱps、CSPS-Ⅲps，取代度分别为0.47、0.43、0.54。并且将酯化后多糖与粗多糖和纯多糖进行了清除·OH、O–2、NO2的体外抗氧化的对比研究，结果表明小蓟多糖具有一定的清除自由基的能力，对于不同的自由基，效果不尽相同，且呈一定的量效关系。一方面，硫酸酯化多糖对·OH和NO-2的清除率较粗多糖、纯多糖有明显提高，其次为纯多糖，粗多糖的清除率最低。而硫酸酯化多糖对O-2的清除率较粗多糖、纯多糖并没有明显的提高，相比较下，纯多糖的清除率高于粗多糖的清除率。另一方面，95%乙醇醇沉多糖抗氧化活性高于75%的级分，而55%级分的抗氧化活性最低。
【作者】聂倩；
【导师】闫桂琴；
【作者基本信息】山西师范大学，生态学，2014，硕士
【关键词】小蓟；多糖；纯化；硫酸酯化；抗氧化活性；

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