对虾白斑综合症病毒基因表达文库的构建和泛素连接酶WSV249的表达定位

【摘要】对虾白斑综合症病毒(WSSV)是对虾和其他甲壳类动物的重要病原体,目前已有4个毒株完成全基因组测序,其编码基因180个ORF,但对于大部分的基因的功能尚不清楚。为了深入开展WSSV功能基因组研究,本文构建了病毒基因表达库,可在原核细菌和真核细胞中进行相关研究。本实验采用ielp(-94+52)和T7启动子成功构建了穿梭载体,该载体可启动基因在E.Coli和HighFive细胞中表达。利用该载体成功克隆162个WSSV的基因,其中,在E.Coli中,共94个克隆可以表达。在HighFive细胞中,共102个克隆可以表达。该基因表达库的构建为今后相关基因功能的研究奠定基础。WSV249已被证明是E3连接酶,但还没找出其作用的底物及其泛素化途径。前期实验初步认为WSV249表达定位在核周及中心体。本实验利用构建的穿梭质粒,在昆虫细胞中表达WSV249并观察其在昆虫细胞HighFive的定位,发现其可能定位于中心体上。转移到哺乳动物细胞293T中与中心体共表达定位,确定WSV249在细胞中表达定位在中心体上。这一研究结果为今后寻找WSV249的泛素化底物指明方向。
【作者】陈信强；
【导师】杨丰；李钫；徐洵；
【作者基本信息】厦门大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】对虾白斑综合症病毒；WSSV基因表达文库；泛素连接酶；

【参考文献】
[1]成婷.路企直通运输车流组织优化研究[D].西南交通大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[2]邢学智.基于TTCN-3语言的测试理论与技术研究[D].中国科学技术大学,2010.
[3]黄青秀.理雅各英译《礼记》研究[D].福建师范大学,英语语言文学,2012,硕士.
[4]杨丹.偶极浮现区与光球层磁螺度注入的观测研究[D].中国科学院研究生院（云南天文台）,天体物理,2014,硕士.
[5]黄雪菊,郝常明,袁庆伟.提高数据仓库分析速度的方法探析[J].南昌工程学院学报,2005,03:50-52.
[6]王伯伟.昆明铁路局货运站整合研究[D].西南交通大学,交通运输工程,2013,硕士.
[7]曹一挥.基于多图谱医学图像分割的技术研究[D].中国科学院研究生院（西安光学精密机械研究所）,通信与信息系统,2013,硕士.
[8]张兴兰,欧阳奇.基于辐射图像处理技术的保护渣熔化速度测量新方法[J].冶金自动化,2010,03:25-29.
[9]张送.X发动机制造企业供应链管理研究[D].云南大学,高级管理人员工商管理（EMBA）,2012,硕士.
[10]钟安妮.麻辣型烘烤花生果加工研究与中试[D].江西农业大学,食品加工与安全,2012,硕士.
[11]张岚.后腹腔镜手术不同机械通气模式对血浆CC16及呼吸功能的影响[D].河北医科大学,麻醉学,2014,硕士.
[12]杨冬鑫.民间非法融资行为的刑法治理[D].西南大学,民商法学,2014,硕士.
[13]孙伟伟.拟南芥转录因子MYB44与葡聚糖合酶GSL5对抗桃蚜防卫反应的调控作用[D].南京农业大学,植物病理学,2012,硕士.
[14]郭晓燕.微电解—臭氧法处理活性黑5染料废水的研究[D].南京大学,环境科学,2013,硕士.
[15]张晓明.目的论视角下的儿童文学翻译[D].青岛大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[16]王熙.基于负荷曲线和多代理技术的含微电网配电网动态供电恢复[D].重庆大学,电气工程,2014,硕士.
[17]韩明涛.时间序列模式挖掘的算法研究[J].山东大学学报(工学版),2004,03:88-91.
[18]丁修苓.边缘修饰的锯齿型碳化硅纳米条带的电学和磁学性质研究[D].吉林大学,2014.
[19]单光坤.齿轮精度分析与设计的智能系统[D].沈阳工业大学,机械制造及其自动化,2003,硕士.
[20]周丽霞.铝合金在汽车冷却液中的腐蚀机理与防护技术研究[D].上海电力学院,应用化学,2013,硕士.
[21]卡佳.中俄能源合作研究[D].哈尔滨工业大学,企业管理,2014,硕士.
[22]侯巍巍,白金泉,吴翠敏.卟啉纳米材料的研究进展[J].化学试剂,2014,12:1057-1062.
[23]王刚.与复动力系统相关的(?)_b及Schroeder方程的研究[D].中国科学院研究生院（武汉物理与数学研究所）,应用数学,2014,博士.
[24]陈宏伟,耿光超,江全元.电气化铁路牵引供电系统车网耦合的潮流计算方法[J].电力系统自动化,2012,03:76-80+110.
[25]徐曼妮.我国系统集成企业营销策略研究[D].北京交通大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[26]程泉森.理解虚拟品牌社区中的众包开发[D].厦门大学,新闻与传播,2014,硕士.
[27]胡爱敏.设计阶段公路工程寿命周期成本的统筹[J].交通世界.2005(10)
[28]张云雪.欧盟肉制品安全监管制度研究[D].西南大学,民商法学,2014,硕士.
[29]张小玲.面向中小型企业的BI解决方案——基于MSAnalysisServices的OLAPC/S软件的开发[D].北方工业大学,2003.
[30]刘多.概述INAP与ISUP的配合[J].电信网技术.2000(01)
[31]刘举庆.石墨烯基导电薄膜及其有机半导体二极管器件的制备与性能研究[D].南京邮电大学,2011.
[32]唐英超.GSM&WCDMA室内分布系统设计[D].山东大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[33]杨乔乔.柏拉图前后期理念论思想比较研究[D].吉林大学,外国哲学,2013,硕士.
[34]王宁,李杰.大数据环境下用于实体解析的两层相关性聚类方法[J].计算机研究与发展,2014,09:2108-2116.
[35]杜文婧.我国木质林产品出口商品结构研究[D].北京林业大学,国际贸易学,2013,硕士.
[36]毛科技,戴光麟,夏明,邵奔,陈庆章.采用分层结构的WSN室内三维定位算法的研究和设计[J].小型微型计算机系统,2013,02:277-280.
[37]鲁陶.行业动态[J].山东陶瓷,2014,05:27-29.
[38]张刚.纳米硒和耐力运动对大鼠肝、肾功能的影响[D].华南师范大学,运动人体科学,2004,硕士.
[39]中国人民大学数据仓库与商务智能工程研究中心$$　　中国人民大学数据与知识工程研究所王珊、谢佳明、陈红、刘中蔚、邵琦洪、张宁.创建数据仓库：要面向三条路线[N].中国计算机报,2002-12-23B18.
[40]敬刘凯.浮筏隔振系统自适应前馈控制研究[D].中国舰船研究院,船舶与海洋结构物设计制造,2014,硕士.
[41]王晓东.宁夏电信CDMA网络彩信中心方案设计及工程实践[D].南京邮电大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[42]龙雨孜.上市企业再融资方式与经营绩效的研究[D].中南林业科技大学,企业管理,2014,硕士.
[43]李萍.新疆农民专业合作社的法律问题研究[D].新疆财经大学,经济法,2013,硕士.
[44]余孔捷,刘正才,黄杰,杨方,李耀平,卢声宇,张琼,徐敦明.高效液相色谱-串联质谱法快速检测鳗鱼及烤鳗中硝基呋喃类代谢物残留[J].食品与发酵工业.2007(07)
[45]赵倩.南京国民政府时期（1927-1949年）边疆中小学师资培养研究[D].西北师范大学,教育史,2013,硕士.
[46]张帅.中国军事管理革命的动因及其推进研究[D].首都经济贸易大学,行政管理,2013,硕士.
[47]岳喜凯.车辆气压储能制动能量回收系统的研究[D].中北大学,车辆工程（专业学位）,2014,硕士.
[48]赵海霞.传统企业e化转型研究[D].华东师范大学,情报学,2001,硕士.
[49]史吉鹏.始极片与种板表面缺陷检测及分选设备研究[D].兰州理工大学,材料加工工程,2013,硕士.
[50]王沛然.基于WindowsCE.NET的手持终端系统软件设计[D].浙江大学,2004.