铁皮石斛对高糖环境下HUVECs氧化应激损伤的保护作用

【摘要】
【作者】石梅兰；
【导师】李强翔；
【作者基本信息】南华大学，内分泌与代谢疾病，2012，硕士
【目的】：研究铁皮石斛多糖（polysaccharidesofdendrobiumcandidum,PDC）对体外高糖环境下人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs）氧化应激损伤的保护作用。
【方法】：以体外培养的人脐静脉内皮细胞株为对象，研究了铁皮石斛多糖对高糖诱导的内皮细胞损害的保护作用。HUVECs用高糖(33.3mmol/L)孵育48小时诱导损伤，同时用铁皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）处理细胞48小时。实验分为对照组、高糖组、不同剂量铁皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）组和高糖+不同剂量铁皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）组。采用MTT法检测细胞活力；收集细胞上清液检测培养液中超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活力和一氧化氮（nitrogenmonoxidum,NO）含量；采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)、细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）和钙离子水平。
【结果】：33.3mmol/l高糖环境下人脐静脉内皮细胞生长受到抑制，细胞线粒体膜电位（MMP）降低，细胞内钙离子浓度升高，活性氧（ROS）生成增加，超氧化物歧化酶（SOD）活力降低，一氧化氮（NO）生成减少。但是铁皮石斛多糖（PDC）能剂量依赖性的有效拮抗上述改变，且有统计学意义。（1）与对照组相比，高糖（33.3mmol/L）组HUVECs细胞活力显著降低（P<0.05），MMP显著性降低（P<0.01），细胞内钙离子浓度显著升高（P<0.01），细胞内ROS的水平显著增加（P<0.05），SOD活力显著性降低（P<0.05），培养液中NO水平显著性降低（P<0.05）。（2）与对照组相比，铁皮石斛多糖（50、100、200、400和800μg/mL）没有显著影响HUVECs的细胞活力（均P＞0.05）。（3）与高糖组相比，高糖+铁皮石斛（100、200和400μg/mL）组HUVECs细胞活力显著增加（均P<0.05），呈浓度依赖性；细胞内MMP显著性增加，呈浓度依赖性（均P<0.05）；细胞内钙离子浓度显著降低，呈浓度依赖性（均P<0.05）；细胞内ROS的水平显著降低（P<0.05）；SOD活力显著性增加（P<0.05）；培养液中NO水平显著性升高，呈浓度依赖性（均P<0.05）。
【结论】：铁皮石斛多糖抑制了高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤。
【关键词】铁皮石斛多糖；高糖；人脐静脉内皮细胞；钙离子；活性氧；超氧化物歧化酶；一氧化氮；

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