氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞HGC-1表达的影响及调控机制研究

【摘要】目的：观察中药苦参提取物氧化苦参碱(Oxymatrine，OM)对人胃癌SGC-7901细胞人粒细胞集落刺激因子-1（HGC-1）表达的影响，并研究OM是否通过NF-κB信号通路调控体外培养的人胃癌SGC-7901细胞HGC-1表达。探讨氧化苦参碱抗肿瘤的作用机制，为应用于临床肿瘤的治疗提供部分理论基础。方法：用培养的人胃癌SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育培养48h，采用逆转录PCR（RT-PCR）检测氧化苦参碱对SGC-7901细胞HGC-1基因转录的影响；Westernblot检测氧化苦参碱对SGC-7901细胞HGC-1蛋白表达的影响；并裂解SGC-7901细胞提取核蛋白检测p65的核转位情况；此外，为探讨NF-κB与HGC-1基因表达的关系，在SGC-7901细胞与氧化苦参碱共培养时，加入25μMNF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（pyrrolidinedithiocarbamate，PDTC）共孵育后，并行RT-PCR检测其对HGC-1基因转录的影响。结果：（1）SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后，RT-PCR结果显示，HGC-1基因mRNA水平明显降低（p＜0.05），而对照组表达水平无明显变化（p＞0.05）。（2）SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后，Westernblot结果显示，HGC-1表达明显减弱（p＜0.05），而对照组表达水平无明显变化（p＞0.05）。（3）SGC-7901细胞与氧化苦参碱共孵育后即可检测出p65蛋白转移至核内减少，表明氧化苦参碱与SGC-7901细胞共孵育后能抑制NF-κB活性。NF-κB特异性抑制剂PDTC能进一步促进氧化苦参碱下调HGC-1基因表达。结论：（1）氧化苦参碱能下调SGC-7901细胞HGC-1的表达，且作用随着氧化苦参碱浓度的增加而增强。（2）氧化苦参碱通过抑制NF-κB活性，下调HGC-1基因的表达，这可能是氧化苦参碱抗癌的机制之一。
【作者】胡蘅芬；
【导师】廖爱军；
【作者基本信息】南华大学，内科学，2012，硕士
【关键词】氧化苦参碱；SGC-7901；人粒细胞集落刺激因子-1；NF-κB；

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