秋水仙碱创制四倍体不结球白菜新材料

秋水仙碱创制四倍体不结球白菜新材料

作者:师大云端图书馆 时间:2017-11-18 分类:硕士论文 喜欢:2521
师大云端图书馆

【摘要】本文主要从同源四倍体不结球白菜的诱导、鉴定展开,并对二倍体和四倍体不结球白菜的主要农艺性状、营养品质、生理生化特性、抗坏血酸合成途径相关基因表达进行比较分析,同时对二、四倍体不结球白菜进行了核型分析,为多倍体不结球白菜的遗传育种及细胞遗传学奠定了一定的理论基础并提供了实践方法。1.用1.5g·L-1、2g·L-1这两种浓度的秋水仙素对子叶期不结球白菜生长点进行不同次数的处理来进行多倍体诱导,根据形态学、解剖学、细胞学特征、农艺性状和流式细胞仪进行倍性鉴定。结果表明,浓度为1.5g·L-1的秋水仙素处理6次的效果最好,四倍体加倍率达8.55%。与二倍体相比,四倍体叶片厚度、气孔大小、花器官大小、花粉粒纵横径、种子单粒径等方面表现出“巨大性”,但四倍体株高减小。四倍体十叶厚、种子直径、50粒重、花瓣长和宽、角果长、角果棱宽、角果喙长、角果横宽、花粉粒长和宽、气孔长和宽、气孔保卫细胞叶绿体数分别比二倍体增加23.2%、17.0%、31.3%、38.6%、66.3%、19.6%、26.5%、54.5%、16.1%、31.2%、34.9%、64.3%、44.0%和87.5%,差异都达极显著。四倍体的气孔密度显著降低。二倍体不结球白菜体细胞染色体数为2n=2x=20,四倍体染色体数为2n=4x=40。2.对二、四倍体不结球白菜的主要农艺性状、营养品质和生理生化特性进行了研究。结果表明:与二倍体相比,四倍体植株颜色呈深绿色,束腰,整个生育期叶片宽度和叶柄宽度都显著大于二倍体,而株高、叶数、叶柄长度和叶片长度比二倍体有所减少。四倍体可溶性糖、可溶性蛋白、干物质和有机酸分别比二倍体增加15.7%、14.6%、16.9%和16.2%,粗纤维比二倍体减少36.4%,差异均达极显著。四倍体的叶绿素含量、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性均显著高于二倍体。丙二醛含量显著低于二倍体。3.通过高效液相色谱仪对二、四倍体不结球白菜不同组织不同时期的抗坏血酸含量进行了测定,并利用实时定量PCR技术对不结球白菜中抗坏血酸L-半乳糖合成途径的6个相关基因的表达进行分析。结果表明:在幼苗时期,四倍体叶片中的还原性抗坏血酸和总抗坏血酸分别比二倍体高21.4%和10.8%,叶柄中的分别比二倍体高12.5%和10.3%,成熟时期四倍体叶片中的还原性抗坏血酸和总抗坏血酸分别比二倍体高10.3%和6.74%,叶柄中的分别比二倍体高25.9%和15.0%,差异都达极显著水平。实时定量PCR表明无论是在幼苗时期还是在成熟时期,BcVTC1,BcGME,BcVTC2,BcVTC4和BcGLDH这5个基因在叶片中和叶柄中的表达量都高于对照,而BcPMM没有明显变化。4.以不结球白菜品种‘特矮青’的花蕾为材料,采用常规压片法对花粉母细胞减数分裂终变期染色体进行核型分析,并与根尖有丝分裂中期的染色体核型进行比较。结果表明:二者的核型公式均为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,第3对具有随体,核型类型属于2A型,为基本对称型。长度在1.1-1.5mm的花蕾,容易获得减数分裂终变期的分裂相。5.以二、四倍体不结球白菜的幼嫩雌蕊及根尖为材料,采用常规压片法对其进行染色体核型分析。无论是二倍体还是四倍体,幼嫩子房中处于有丝分裂中期的细胞都比根尖的多,且中期染色体形态与根尖的染色体无明显区别,随体均清晰可见。两种材料获得的二倍体不结球白菜核型公式均为2n=2x=20=10m+8sm(2SAT)+2st,其中第1、2、3、4、6对为中着丝粒染色体,第5、7、8、9对为近中着丝粒染色体,第10对为近端着丝粒染色体,随体均位于第3对染色体上。核型分类均为2A型。四倍体不结球白菜的核型公式为2n=4x=40=20m+l6sm(4SAT)+4st,核型特征与二倍体大体相同,仅染色体长度变异范围比二倍体稍大些。
【作者】张宇;
【导师】张蜀宁;
【作者基本信息】南京农业大学,蔬菜学,2013,硕士
【关键词】不结球白菜;二倍体;四倍体;农艺性状;营养品质;实时定量PCR;核型分析;

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