基于外翻肠囊法的补锌制剂生物利用率评价研究

【摘要】快速、高效、客观的评价各种微量元素补充剂的生物利用率,对于规范保健食品(剂)生产、消费和监管具有重要意义。以补锌制剂为例,市场经历了无机锌(硫酸锌为代表)、葡萄糖酸锌、甘草锌及氨基酸螯合锌、蛋白锌等有机锌过程,然而,对其生物利用率的评价无论是评价方法还是结果均十分混乱。如评价方法体内的有平衡试验法、同位素示踪法、原位结扎灌注肠段法、原位体肠灌流法；体外法则有体外灌注肠段法、外翻肠囊法、小肠刷状缘膜微粒法、细胞培养法等。本文以几种市售锌元素营养补充剂为研究对象,利用鸡回肠构建了外翻肠囊模型,通过灌注不同时间、不同浓度锌制剂的吸收效率,探索外翻肠囊法作为微量元素营养补充剂生物利用率评价方法的可行性及具体应用,以期为相关研究提供实验依据。本研究主要结果如下：1构建了基于肉仔鸡回肠的外翻肠囊模型。通过颈部宰杀肉仔鸡45只,解剖取其回肠,处理外翻后,制成肉仔鸡回肠外翻肠囊模型90只(一只回肠制成两只外翻肠囊)。选取无机锌(硫酸锌)、有机锌(氨基酸螯合锌)对模型进行评估。结果表明：(1)空白组与试验组浆膜液终体积并且无显著性差异(P>0.05),随时间变化趋势具有明显线性关系,线性拟合所得相关系数R2=0.909。(2)硫酸锌培养5、15、30、45、60min吸收率极显著增加(P<0.01),吸收率随时间变化经线性拟合后R2=0.990,并且肠囊在15min时对硫酸锌的吸收速率达到最大；氨基酸螯合锌在前30min内吸收率增加明显(P<0.01),随后变化趋于平缓,60min时再次出现增加的趋势,吸收率随时间变化经线性拟合后R2=0.947,在30min内肠囊对氨基酸螯合锌吸收效果较好。由此可知试验所构建的外翻肠囊模型具有较好的重复性、准确性,可用以评价不同补锌制剂的生物利用率。2补锌制剂在不同浓度、不同时间培养后的吸收规律。根据不同补锌制剂的单次推荐剂量设置本试验中灌注肠囊的四个锌浓度水平,分别为：5.28,14.12,20,32.4(μg/ml),培养肠囊10、20、30、40mmin。硫酸锌：吸收率都随着时间、浓度而增加。以锌浓度为32.4μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达8.74%-19.13%；当锌浓度为14.12μg/ml时,吸收率达到27.01%～45.52%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率达到63.61%-71.10%。由此可知,硫酸锌制剂在产品推荐摄入量下吸收效果最佳。肠囊对锌的扩散系数P在l0min时达到最大值为1.936±0.292cm2/min,此时肠囊对硫酸锌吸收最敏感。葡萄糖酸锌：4个浓度水平下,吸收率随着时间而增加。在锌浓度为32.4μg/ml时,培养时间超过20min后吸收率反而低于14.12和20μg/ml锌浓度水平。以锌浓度为14.12μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率达到18.30%-22.21%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率达到115.20%～121.11%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率达到138.23%～92.93%。由此可知,葡萄糖酸锌制剂在产品推荐剂量及锌浓度为20μg/ml时吸收效果都较好。P在10min时达到最大值为3.867±0.248cm2/min,此时肠囊对葡萄糖酸锌吸收最敏感。钙铁锌：较高的3个浓度水平之间,吸收率变化不显著(P>0.01),都随着时间表现为先增后减再增的趋势。以锌浓度为5.28μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为14.12μg/ml时,培养4个时间吸收率分别为89.84%、115.10%、75.38%、122.60%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率分别为122.85%、129.18%、97.74%、60.58%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到94.78%、127.44%、65.60%、101.92%。由此可知,钙铁锌制剂随着锌元素浓度的增加,其在肠囊中的吸收效果并不稳定。P在20mmin时达到最大值为1.063±0.212cm2/min,此时肠囊对钙铁锌吸收最敏感。甘草锌：在锌最大浓度32.4μg/ml时,吸收率随时间表现为先增后减的趋势。以锌浓度14.12μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达34.66%-47.35%；当锌浓度为20μg/ml时,吸收率可达119.82%～100.97%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到104.21%、101.40%、79.14%、76.21%。由此可知,甘草锌制剂在推荐剂量及锌浓度为20μg/ml时具有较好的吸收效果。P在l0min时达到最大值为3.447±0.230cm2/min,此时肠囊对甘草锌吸收最敏感。氨基酸螯合锌：在锌最大浓度32.4μg/ml下,吸收率随时间表现为先增后平再增再减的趋势。以锌浓度为20μg/ml(推荐量)下吸收率为100%。当锌浓度为5.28μg/ml时,培养4个时间吸收率可达27.77%-36.17%；当锌浓度为14.12μg/ml时,吸收率可达52.57%-62.64%；当锌浓度为32.4μg/ml时,吸收率分别达到131.27%、85.57%、106.36%、97.84%。由此可知,氨基酸螯合锌制剂在其推荐剂量下较为稳定,吸收效果较好。P在10min时达到最大值为3.256±0.420cm2/min,此时肠囊对氨基酸螯合锌吸收最敏感。综上所述,葡萄糖酸锌、甘草锌在肉仔鸡回肠中生物利用率较高,氨基酸螯合锌次之,硫酸锌和钙铁锌较差。
【作者】谭珏；
【导师】韩剑众；
【作者基本信息】浙江工商大学，食品科学与工程，2013，硕士
【关键词】肉仔鸡回肠；外翻肠囊法；补锌制剂；不同时间不同浓度；Zn吸收率；生物利用率；

【参考文献】
[1]温都日娜.一种基于本体的敏感词过滤方法研究[D].吉林大学,软件工程（专业学位）,2014,硕士.
[2]金炜炜.非真实成像的水墨画绘制模型若干技术研究[D].浙江工商大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[3]张锦.2013陶博会开幕式模拟汉英交替传译实践报告[D].山东财经大学,英语口译（专业学位）,2014,硕士.
[4]魏文武.从执行到决策——政府管制政策分析[D].上海师范大学,行政管理,2004,硕士.
[5]杨彩萍.A国有商业银行后台集中建设体系研究[D].中国地质大学（北京）,工商管理,2014,硕士.
[6]孙琳莉.三类本原有向图的广义scrambling指数与广义competition指数[D].中北大学,应用数学,2013,硕士.
[7]陈玺.天津市气象部门廉政风险防控管理研究[D].天津大学,公共管理,2013,硕士.
[8]刘源.山区高速公路挖方路基边坡稳定性分析及动态设计研究[D].吉林大学,交通运输工程,2012,硕士.
[9]于博.吉林银行长春一汽支行营销策略研究[D].吉林大学,工商管理,2014,硕士.
[10]王杰.仪式在社会工作中运用的理论探讨与实践反思[D].苏州大学,社会工作（专业学位）,2014,硕士.
[11]刘沁.航空公司货运自由销售定价策略研究[D].南京航空航天大学,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[12]王娜.新型活性饲用微生物添加剂研制及生物活性评价[D].东北林业大学,微生物学,2014,博士.
[13]谢小松.半刚接钢框架的抗震性能研究及工程应用[D].福州大学,水工结构工程,2004,硕士.
[14]尤小虎.新型城市交通诱导系统设计与实现[D].燕山大学,计算机技术,2013,硕士.
[15]崔洪涛.楼梯间防火卷帘安全性的数值分析与研究[D].大连理工大学,建筑与土木工程（专业学位）,2012,硕士.
[16]孙娜.唐代元日朝贺诗文研究[D].西北师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[17]袁琳.互联网支付与相关法律问题初探[D].华东政法学院,国际经济法,2003,硕士.
[18]石磊.赵本山乡村题材电视剧接受研究[D].辽宁大学,广播电视艺术学,2012,硕士.
[19]庞晴晴.永磁同步电机无传感器控制技术研究[D].中国矿业大学,电力电子与电力传动,2014,硕士.
[20]申卫军,彭少麟,邬建国,林永标.南亚热带鹤山主要人工林生态系统C、N累积及分配格局的模拟研究[J].植物生态学报,2003,05:690-699.
[21]王振文.液晶光子晶体光纤的电场传感特性研究[D].太原科技大学,光学,2013,硕士.
[22]孟培培.日本血吸虫神经递质章鱼胺受体（SjOAR）和延伸因子（SjEF）的鉴定及特性研究[D].河南科技大学,兽医（专业学位）,2013,硕士.
[23]唐静,邓有奇,马明生,李彬.飞翼气动优化中参数化和网格变形技术研究[J].航空学报.
[24]马淑敏.校企业合作中政府职能的研究[D].内蒙古师范大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[25]李赵红,侯建军,宋伟.基于等级结构的二值文本图像认证水印算法[J].自动化学报,2008,08:841-848.
[26]任章,徐德民.一种镇定倒立摆系统的新方法[J].控制与决策,1995,04:373-376.
[27]刘颖,赵珺,王伟,吴毅平,陈伟昌.基于数据的改进回声状态网络在高炉煤气发生量预测中的应用[J].自动化学报,2009,06:731-738.
[28]李晓龙.基于客户让渡价值的销售满意度测评研究[D].长安大学,企业管理,2014,硕士.
[29]陈林.论新疆维吾尔自治区体育产业发展现状[D].重庆大学,体育（专业学位）,2014,硕士.
[30]陈伟.基于聚乙二醇单甲醚甲基丙烯酸酯的环境响应型纳米凝胶的构建、载药与释药研究[D].华中科技大学,生物制药工程,2013,硕士.
[31]赵倩.Avastin联合黄斑格栅样光凝治疗糖尿病黄斑水肿的临床研究[D].郑州大学,眼科学,2013,硕士.
[32]赵杨.非线性几何规划算法研究[D].西安电子科技大学,电路与系统,2012,硕士.
[33]李向军,张华薇,郑思维,霍艳丽,张新萍.基于相对邻域熵的直推式网络异常检测算法[J].计算机工程.
[34]顾爱智.我国油气资源税费现状及优化建议[D].首都经济贸易大学,税务（专业学位）,2014,硕士.
[35]汪轶.小额信贷机构可持续发展问题研究[D].西南财经大学,金融学,2004,硕士.
[36]金海.无动物源性水牛精液冷冻保存稀释液的研究[D].华中农业大学,动物遗传育种与繁殖,2014,硕士.
[37]多鹏.六君消瘰汤加减治疗肺脾气虚证儿童腺样体肥大的临床观察[D].湖南中医药大学,中医五官科学（专业学位）,2014,硕士.
[38]韩闯.复合材料T型接头拉脱性能研究[D].哈尔滨工业大学,材料工程,2013,硕士.
[39]雷红艳,邹汉斌.基于反向矩阵的最大频集的交互式挖掘算法[J].计算机与现代化,2005,03:1-4.
[40]杨校春.基于GEO/LEO双层卫星网络的路由算法与仿真研究[D].大连大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[41]徐蔚茹.古筝乐曲中特殊音效的演奏技法与功能[D].中央音乐学院,古筝演奏,2012,硕士.
[42]张楠陈艳敏.常州推进石墨烯产业化进程[N].中国电子报,2014-11-18002.
[43]陈周斌.加快浙江省铁路网建设推进区域经济发展[J].上海铁道科技.2004(06)
[44]冯志良,熊云官,宣其达.关于JB/TQ423—90《钢制管壳式换热器产品质量分等》的几点说明[J].石油化工设备.1991(04)
[45]王勐.碘甲烷混合气体DBD放电特性的实验研究[D].大连理工大学,等离子体物理,2013,硕士.
[46]王蕾.人民币汇率变动对银行类股票价格影响的实证研究[D].西南大学,金融学,2014,硕士.
[47]刘志远.宝格德乌拉一带多金属矿勘查中综合物探模式的研究[D].石家庄经济学院,矿产普查与勘探,2013,硕士.
[48]赵阳.基于水足迹理论的昆明市水资源可持续利用研究[D].吉林大学,地质工程,2013,硕士.
[49]许文锋.基于增强型虚拟机的软件保护技术[D].广东工业大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[50]李彬,杨娇,唐良瑞,祁兵,孙毅,曾瑛.高效P圈保护技术在电力通信网中的应用[J].电力系统自动化,2013,20:83-87.