结核分枝杆菌蛋白Rv2185c和Rv3763调控NF-κB活性的分子机制初步研究

结核分枝杆菌蛋白Rv2185c和Rv3763调控NF-κB活性的分子机制初步研究

作者:师大云端图书馆 时间:2016-09-13 分类:硕士论文 喜欢:1856
师大云端图书馆

【摘要】结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病。该病是目前世界上单一致病菌感染导致病死率最高的疾病之一。近年来随着人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiencyVirus,HIV)的广泛流行以及多重耐药菌株的出现使得结核病变的复杂和难以防控。NF-κB(nuclearfactor-KB)是广泛存在于各种类型细胞中的一种转录因子,调控许多基因的转录,在免疫应答、炎症反应和细胞凋亡中发挥重要作用。MTB致病机制复杂,分泌蛋白、脂蛋白、跨膜蛋白等介导细菌与宿主的相互作用,与宿主接触过程中能破坏宿主组织,引起一系列级联反应,在MTB致病过程中起重要作用,并影响宿主免疫防御。MTB能通过调节NF-κB活性来调节细胞的坏死和凋亡,然而具体的机制不是很清楚。本研究以NF-κB信号转导途径为切入点,筛选调控NF-κB的MTB分泌蛋白、脂蛋白、膜蛋白,分析其调控NF-κB的信号转导途径以及生物学意义,从而为进一步阐明结核分枝杆菌的致病机制和免疫机理奠定基础。主要研究内容如下:1.目的基因的选择与真核表达质粒的构建通过生物信息学方法以及结核的蛋白质组学查找MTBH37Rv菌株的分泌蛋白、膜蛋白、脂蛋白,选择了160个蛋白基因作为候选基因。其中分泌蛋白135个,膜蛋白10个,脂蛋白15个。利用PCR和酶切的方法将候选基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1/V5-HisB中,成功构建了各目的基因的真核表达质粒。2.调控NF-κB活性的结核分枝杆菌蛋白筛选将构建好的160个真核表达质粒分别转染细胞,通过荧光素酶报告系统筛选能够调控NF-κB活性的结核分枝杆菌蛋白,结果证实MTBRv2185c蛋白(分泌蛋白)能显著激活NF-κB,并具有剂量依赖性和细胞特异性;而MTBRv3763蛋白(脂蛋白)显著抑制TNF-a诱导的NF-κB活性,呈剂量依赖性,但不具有细胞特异性。进一步构建MTBRv2185c、Rv3763不同区域缺失的突变体并对其调控NF-κB活性的能力进行研究,结果只有全长的MTBRv2185c具有诱导NF-κB活性的能力,而Rv3763的前30个氨基酸对于抑制TNF-α诱导的NF-κB活性至关重要。3.MTBRv2185c促进P65磷酸化将构建的表达MTBRv2185c的真核质粒转染细胞,转染30h后通过Western-blot检测NF-κBp65亚基磷酸化的变化情况。结果发现MTBRv2185c促进p65的磷酸化。4.Rv3763抑制TNF-α诱导的p65磷酸化将构建的表达MTBRv3763的真核质粒转染细胞,转染24h后用TNF-α刺激6h,并通过Western-blot检测NF-жBp65亚基磷酸化的变化情况。结果发现MTBRv3763抑制TNF-α诱导的p65磷酸化。
【作者】欧阳海平;
【导师】陈焕春;
【作者基本信息】华中农业大学,预防兽医学,2014,硕士
【关键词】结核分枝杆菌;天然免疫;核因子κB;Rv2185e蛋白;Rv3763蛋白;

【参考文献】
[1]卜翔.基于IEEE 802.15.4的实时通信系统调度研究[D].南京邮电大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[2]梁彪,潘铁胜,但春和.一种简单实用的高速线材飞剪控制方式[J].冶金自动化,2001,06:14.
[3]张明浩.行星齿轮式汽车座椅调角器精冲工艺研究[D].吉林大学,材料工程,2014,硕士.
[4]尕桑措.《霍岭大战》与《平家物语》比较研究[D].西北民族大学,历史文献学,2012,硕士.
[5]王雪雅.小麦秸秆降解发酵工艺的研究[D].河南科技大学,农产品加工及贮藏工程,2013,硕士.
[6]田春志,陈小宏,张国才,刘翠娟,李清仁,易维启.时间推移地震数据体匹配研究及分析[J].石油地球物理勘探,2002,06:635-639+660.
[7]辛勤,林励吾.中国催化三十年进展:理论和技术的创新[J].催化学报,2013,03:401-435.
[8]王希坤.推动学习型社会形成的科技动力机制研究[D].中共中央党校,科技哲学,2004,硕士.
[9]杜彬.新型移动业务网络多业务仿真平台的设计与实现[D].北京邮电大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[10]张镇川.我国商业秘密刑事保护与民事保护问题研究[D].外交学院,国际法,2014,硕士.
[11]商树春.试论永乐宫壁画《朝元图》的艺术特征[D].吉林大学,美术学,2014,硕士.
[12]丁元平.2009英国协会货物保险A条款的新发展及对我国的借鉴意义[D].大连海事大学,法学,2013,硕士.
[13]范振娥.我国创业板市场退出机制研究[D].河北经贸大学,金融学,2013,硕士.
[14]李宁.声音商标注册问题研究[D].湖南师范大学,法律(专业学位),2014,硕士.
[15]朱秀峰.主宾语位置“X的VP”的语法语义分析及相关问题[D].首都师范大学,汉语言文字学,2004,硕士.
[16]徐泽宇.第三人侵害劳动债权研究[D].华中师范大学,法律,2014,硕士.
[17]万景旺.根结线虫生防菌的筛选与应用研究[D].中国矿业大学,化学工程与技术,2014,硕士.
[18]李磊.RFID在医院供应室消毒物品动态追溯管理系统中的应用[D].南方医科大学,生物医学工程,2012,硕士.
[19]路阳.Fe_2O_3-Al_2O_3和Fe-Al_2O_3纳米复合粉末的制备及其表征[D].长春理工大学,凝聚态物理,2004,硕士.
[20]薛峙.基于PVM的SLIQ算法的并行化研究[D].重庆大学,2003.
[21]林鑫.旋转机械故障诊断中微弱信号特征提取方法研究[D].北京化工大学,控制工程(专业学位),2013,硕士.
[22]丁莲莲,朱学永.基于XML安全技术研究与应用[J].安徽电子信息职业技术学院学报,2004,Z1:33-34.
[23]王健.基于动态故障树的CRH2动车组制动系统可靠性分析研究[D].北京交通大学,2014.
[24]王伯俞.多孔宽拱桥的有限元计算和成桥试验[D].长沙理工大学,建筑与土木工程(专业学位),2013,硕士.
[25]张克旺.支持AOS应用的嵌入式操作系统研究[D].西北工业大学,计算机软件与理论,2004,硕士.
[26]白剑.宁夏引黄灌区小型U形渠道抗冻胀试验与衬砌结构研究[D].宁夏大学,水利工程(专业学位),2014,硕士.
[27]沈乐悦.佛堂古民居建筑的“形”与“型”[D].浙江工业大学,2014.
[28]王小毛.二苯甲酮合成技术及清洁生产研究[D].重庆大学,环境工程,2003,硕士.
[29]李洋洋.准能公司企业文化研究[D].内蒙古大学,工商管理,2013,硕士.
[30]师生波,李和平,王学英,李惠梅,韩发.高山植物唐古特山莨菪和唐古特大黄对强太阳辐射光能的利用和耗散特性[J].植物生态学报,2007,01:129-137.
[31]邹辉.地铁辅助电源及其监控系统的研究与实现[D].中南林业科技大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[32]王婧.牛巴贝斯虫1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合成酶的研究[D].中国农业科学院,基础兽医学,2014,博士.
[33]吴根斌.基于本体的文本资源信息检索服务研究[D].华东交通大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[34]熊菲.框—剪结构剪力墙的布置及合理刚度的研究[D].华中科技大学,结构工程,2013,硕士.
[35]董颖颖.高速公路交通流控制和交通事件检测的研究[D].浙江工业大学,2009.
[36]崔晶晶.川渝地区公共危机信息管理研究[D].重庆大学,公共管理,2014,硕士.
[37]王亚良,金寿松,董晨晨.应急物资储备选址与调度建模研究[J].浙江工业大学学报,2014,06:682-685+698.
[38]谭民.CIMS装配和拆卸生产线的可靠性分析[J].控制与决策,1994,04:266-270+300.
[39]张浩南.血管内皮功能损伤与冠心病的关系及阿托伐他汀钙对血管内皮功能的影响[D].吉林大学,临床医学(专业学位),2013,硕士.
[40]陈波.多肽作为识别元件及在其免疫分析伏马菌素B_1中的应用[D].南昌大学,营养与食品卫生学,2014,硕士.
[41]闫旭锋,方进,董春,刘延超.混合型高温超导飞轮储能系统磁悬浮力的仿真分析计算[J].低温与超导,2015,05:40-43.
[42]张楠.浅析人民币国际化问题及实现路径[D].苏州大学,金融(专业学位),2013,硕士.
[43]徐嘉蔚.无锡阳山创意桃园的规划设计研究[D].南京农业大学,风景园林,2013,硕士.
[44]尚文倩.文本分类及其相关技术研究[D].北京交通大学,2007.
[45]胡国毅.沉水植物对水流及底泥再悬浮特性影响研究[D].长江科学院,水力学及河流动力学,2014,硕士.
[46]方聪丽.本钢1700热连轧厂加热炉改造自动化仪表设计特点[J].冶金自动化,2008,05:58-62.
[47]徐小品.三相PWM整流器的研究[D].浙江大学,电机与电器,2004,硕士.
[48]潘霄雅.我国上市公司资本弱化影响因素研究[D].浙江财经学院,会计学,2013,硕士.
[49]佟月英.仿生触觉与常规方法检验肉品新鲜度的研究[D].吉林大学,2011.
[50]孙蕊.可调控型生物降解缓控释材料的制备和性能研究[D].上海工程技术大学,材料加工工程,2012,硕士.

相关推荐
更多