miR-19在鸡毒支原体感染中的作用研究

miR-19在鸡毒支原体感染中的作用研究

作者:师大云端图书馆 时间:2016-08-08 分类:硕士论文 喜欢:3324
师大云端图书馆

【摘要】鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum,MG)是鸡慢性呼吸道疾病(Chronicrespiratorydisease,CRD)的病原。本病分布广泛,给养禽业带来严重的经济损失。MG进入鸡体后,首先通过细胞表面的黏附蛋白(proteinofMycoplasmagallisepticumadhesion,pMGA)吸附于宿主呼吸道黏膜相应的受体上,然后在局部大量繁殖,导致纤毛脱落,呼吸道组织受损及产生的病变是本病发病的主要环节。miRNA是一类长度为20-25nt的非编码小分子RNA,通过在转录后水平调控靶基因的表达而发挥作用。在不同的疾病或同一疾病的不同阶段,都有特异性的miRNA表达发生变化,因此,研究宿主感染病原前后组织中相关miRNA的变化及功能具有重要的作用,这不仅能够揭示该病的致病机理,而且能为miRNA基因疗法提供理论基础,具有十分重要的科学价值。MG感染鸡胚,肺组织样深度测序,结果比对发现,处理组中gga-miR-19的表达量显著上调,有研究发现,MG感染鸡胚,处理组中TLR-NF-κB信号通路的表达发生变化,说明miR-19可能参与MG感染过程,并在MG感染中发挥重要作用。为探讨miR-19在MG感染过程中的调控作用,本研究首先使用qPCR检测MG和gga-miR-19a在鸡胚感染后不同时期肺组织中的表达量,绘制MG的相对生长曲线,利用生物信息学预测候选靶基因,对靶基因功能进行初步分析,为阐明MG的致病机理提供科学依据。本研究主要成果如下:1、孵化9d的SPF胚蛋人工感染MG-HS,qPCR检测MG在感染鸡胚肺组织中的相对表达量,从12d到19d,肺组织中MG处于不断增长的趋势;19d时,MG的相对表达量极显著高于其它时期(p<0.01),MG载量达到最高值,20d时,MG的相对表达量与其它时期(19d除外)差异显著(p<0.05)。2、感染鸡胚的肺组织中,;ga-miR-19a的表达量与MG的相对生长曲线一致;通过miRDB和TargetScan对gga-miR-19a靶基因进行预测,结合功能分析,初步选定ZMYND11为gga-miR-19a在MG感染中调控的靶基因。3、双荧光素酶报告基因对生物信息学预测的靶基因在细胞水平进行验证,结果显示,gga-miR-19amimics能显著抑制ZMYND113’UTR双荧光素酶报告基因的表达p<0.05),这在细胞水平表明了ZMYND11可能是gga-miR-19a的靶基因。4、DF-1细胞中超表达gga-miR-19a,ZMYND11的相对表达量极显著下调(P<0.01);共转ZMYND113’UTR的双荧光素酶报告载体和gga-miR-19amimics,ZMYND11的相对表达量极显著下调p<0.01),这与双荧光素酶报告载体检测结果一致。5、感染MG的鸡胚孵化至12d、13d、19d及20d,肺组织中ZMYND11的相对表达量极显著下调p<0.01),同时期肺组织中gga-miR-19a的相对表达量极显著上调p<0.01),进一步验证ZMYND11是gga-miR-19a的靶基因,说明在MG-HS感染中,gga-miR-19a通过抑制ZMYND11的表达而发挥作用。6、感MG染的鸡胚孵化至18d、19d及20d,肺组织NF-kB信号通路中TNF-α、NF-kB的相对表达量极显著上调(P<0.01);孵化至12d时,NF-kB的相对表达量显著上调p<0.05),而TNF-α的相对表达量则无显著变化;孵化至13d时,NF-kB的相对表达量极显著上调(p<0.01),TNF-α的相对表达量显著上调(p<0.05);孵化至15d时,TNF-a的相对表达量极显著上调(p<0.01),而NF-kB的相对表达量无显著变化。
【作者】胡庆昌;
【导师】彭秀丽;
【作者基本信息】华中农业大学,动物遗传育种与繁殖,2014,硕士
【关键词】鸡毒支原体;gga-miR-19a;ZMYND11;

【参考文献】
[1]戴文剑.新型农村社会养老保险农户参保行为及激励机制研究[D].南京农业大学,社会保障,2013,硕士.
[2]王鑫星.SANAA作品特征的建构解析[D].南京大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[3]梁建华.爱华德·艾尔比戏剧的荒诞派特色研究[D].广东外语外贸大学,英语语言文学,2004,硕士.
[4]李响.粉末挤压法制备泡沫铝发泡稳定性的研究[D].沈阳工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[5]陈燕.鄂尔多斯房地产市场的经济学研究[D].西北师范大学,政治经济学,2013,硕士.
[6]谭人杰.铁路分局运输调度数字空间信息系统研究[J].铁路计算机应用.2001(09)
[7]刘莎莎.地铁隧道施工对既有铁路路基稳定性影响研究[D].北京交通大学,2014.
[8]李自立.基于VRML的虚拟三维仓库管理系统研究[D].西南交通大学,机械设计及理论,2014,硕士.
[9]王有松.卫星姿态控制及地面仿真实现方法研究[D].哈尔滨工业大学,控制科学与工程,2014,硕士.
[10]邱春丽,许宏丽.一种散乱点云空间直接剖分算法[J].计算机科学,2014,02:157-160+173.
[11]金宏丽,宋爽,刘佳.北大行施食堂监督员制度实现消费者参与沟通监督[J].高校后勤研究.2007(04)
[12]贾敬国.钛掺杂钡铁氧体的制备及吸波性能研究[D].浙江大学,材料科学与工程,2013,硕士.
[13]雷金芳.个案社会工作在特殊困难儿童辅导中的应用[D].华中科技大学,社会工作,2013,硕士.
[14]韩凯.人民币汇率变动对我国物价的影响效应分析[D].山西财经大学,金融学,2014,硕士.
[15]朱慧.多元主体参与社区养老服务的机制研究[D].上海工程技术大学,社会保障,2013,硕士.
[16]龚羽霏.Abegg-舒曼《阿贝格变奏曲》的作品特征与演奏技巧[D].云南艺术学院,音乐学,2013,硕士.
[17]吴洲豪.基于对偶拓扑的城市路网复杂性案例研究[D].长安大学,交通运输规划与管理,2014,硕士.
[18]陈飞.应用于飞机电路板修理的专用程序存储器件读写装置的研制[D].南京航空航天大学,电力系统及其自动化,2014,硕士.
[19]桑卫国,李景文,陆兆华.山杨林林分密度效应动态模拟[J].植物生态学报,1998,05:58-64.
[20]王国静.混合Zigbee-Bluetooth无线网关记录仪系统的设计与实现[D].中国人民解放军医学院,生物医学工程,2013,硕士.
[21]魏锦超.基于Wii Remote控制器的皮影动画系统[D].西安电子科技大学,计算机系统结构,2012,硕士.
[22]程娟.透水混凝土配合比设计及其性能的实验研究[D].浙江工业大学,2007.
[23]方韬.离散单元法的研究及其在结构工程中的应用[D].浙江大学,结构工程,2004,硕士.
[24]胡威.巴赫金狂欢诗学的双重性研究[D].信阳师范学院,文艺学,2014,硕士.
[25]丁翠翠.积极心理学视野下的小学生问题行为转化研究[D].山东师范大学,教育(专业学位),2013,硕士.
[26]吴志广.利用废弃生物质开发园艺栽培基质的研究[D].浙江大学,园艺(专业学位),2013,硕士.
[27]权玹贞.汉语介词与韩语副词格助词对比分析及教学对策[D].山东大学,对外汉语,2013,硕士.
[28]张智尧.网络空间中诽谤罪与寻衅滋事罪认定研究[D].吉林大学,法律,2014,硕士.
[29]李勇娜.《宋书》比较句研究[D].南京师范大学,汉语言文字学,2012,硕士.
[30]徐东.金融投资决策模型研究[D].湖南大学,应用数学,2003,硕士.
[31]孟祥阳.基于产品创新的我国企业债券市场发展研究[D].安徽大学,金融,2013,硕士.
[32]胡燕.Banach空间中渐近非扩张非自身映射类Noor-型迭代的收敛定理[D].扬州大学,应用数学,2011,硕士.
[33]吴海珍.风险投资退出机制研究[D].中国政法大学,经济法学,2004,硕士.
[34]郭丁菊.功能对等理论与信达雅翻译论的比较研究[D].东北农业大学,英语语言文学,2013,硕士.
[35]赵向南.液压支架试验台测控系统的研究[D].中北大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[36]王静.走进财政法治:财政法与财政政策交织进化[D].华中师范大学,经济法学,2013,硕士.
[37]郑琦.银行自助柜员机系统的分析与设计[D].云南大学,软件工程,2012,硕士.
[38]汪洋.体验式培训企业的核心竞争力研究[D].对外经济贸易大学,工商管理,2004,硕士.
[39]田钰.基于EVA的企业全面预算管理体系研究[D].武汉理工大学,会计学,2012,硕士.
[40]曹云霞.南海问题及中国海洋战略研究[D].南京大学,国际关系,2013,硕士.
[41]张国军.高瓦斯矿井五阳煤矿通风系统优化技术研究[D].首都经济贸易大学,安全技术及工程,2013,硕士.
[42]米雄刚.GIS智能化母线的设计及实现[D].华东理工大学,控制工程,2014,硕士.
[43]赵杰.基于风电监测记录设备上位机软件的设计与实现[D].北京交通大学,电路与系统,2013,硕士.
[44]张艳秋,徐六通,王柏.数据集成中不一致性数据相似性比较的加权算法[J].计算机科学,2003,08:92+186.
[45]于萌萌.XBRL的应用对我国上市公司会计信息质量的影响研究[D].山东财经大学,会计学,2014,硕士.
[46]刘芬.今道友信自然美理论研究[D].西北大学,美学,2014,硕士.
[47]郭金武.A公司建筑项目成本管理研究[D].北京交通大学,2008.
[48]赵燕伟,洪欢欢,周建强,王欢,王宏伟,姜高超,陈建.产品低碳设计研究综述与展望[J].计算机集成制造系统,2013,05:897-908.
[49]任秋菊.大众传媒泛娱乐化对中学生的消极影响及应对研究[D].华中师范大学,思想政治教育,2014,硕士.
[50]康玉.埃德加·爱伦坡短篇小说中的陌生化艺术[D].安徽大学,英语语言文学,2013,硕士.

相关推荐
更多