胡椒叶抗氧化能力分析及其活性成分分离鉴定

【摘要】胡椒是世界上重要的香辛料之一,具有多种医疗保健价值,中国胡椒种植面积和产量分别居世界的第6位和第5位,其中海南省占据90%以上,但是胡椒加工产品多为初级产品,附加值低,限制了胡椒产业的发展。然而,胡椒叶却具有潜在的开发利用价值,胡椒果与胡椒叶都具有显著的抗氧化作用,同时胡较叶具有显著的抗动脉粥样硬化功能,而且人们对胡椒叶有食用实践,但人们对胡椒叶的活性因子并不清楚。另外,摘叶可以提高胡椒的产量,而且胡椒叶精油有可能代替价格较高的胡椒果精油。为了给胡椒叶开发利用提供理论依据,本文系统地分析了胡椒叶的抗氧化活性,探明了胡椒叶的精油成分并分离鉴定了胡椒叶醇提物中的抗氧化活性因子,具体如下：采用DPPH-清除能力检测方法与多酚含量测定方法以及ORAC(氧自由基清除能力)检测方法,系统地比较了胡椒叶与胡椒果(胡椒鲜果、白胡椒和黑胡椒)的抗氧化能力,并用HPLC分析比较胡椒叶与胡椒果所含物质种类的大致差别。结果表明胡椒叶的水和丙酮提取物的DPPH清除能力和多酚含量及ORAC值均高于胡椒果(胡椒鲜果、白胡椒和黑胡椒),其中胡椒叶的ORAC值为3639.05μmolTE/g。另外HPLC表明胡椒叶所含物质与胡椒果所含区别较大。总体表明胡椒叶中可能含有高抗氧化活性因子。先对胡椒的挥发性成分进行分析,采用水蒸气蒸馏法提取胡椒鲜果、黑胡椒、白胡椒和胡椒叶中的精油,得率分别为1.46%、1.77%、2.30%和1.25%。对精油进行GC-MS分析,分别鉴定出38、31、36和63种成分。6-榄香烯、3-蒈烯、D-柠檬烯、α-古巴烯、石竹烯和葎草烯在果与叶中含量均较高；蒎烯、月桂烯、α-水芹烯和间伞花素在果中含量较高,而在叶中含量较低；甘香烯、α-荜澄茄油烯、β-榄香烯、α-古芸烯、β-古巴烯、α-蛇床烯、花柏烯、4-异亚丙烯-7-甲基-6-亚甲基-2-辛烯酸甲酯和桉油烯醇在叶中含量较高,而在果中含量较低或没有。此外,采用电子鼻技术结合判别函数分析可有效区分胡椒果和胡椒叶。其中在叶中含量为38.54%的δ-榄香烯具有显著的抗肿瘤活性。为了确定胡椒叶活性成分的提取条件,采用系统溶剂提取法处理胡椒叶,确定了胡椒叶的乙醇提取液和水提取液具有较强的DPPH自由基清除能力和较高的多酚含量,并且乙醇提取液的ORAC值最高；通过对不同成熟度的胡椒叶的DPPH自由基清除能力和多酚含量的测定,表明胡椒老叶的多酚含量及抗氧化活性相对较高,采用不同浓度的乙醇水溶液室温浸提胡椒老叶,表明40%的乙醇水溶液提取液的清除自由基能力较强,黄酮含量较高,60%的乙醇水溶液提取液的多酚含量高。比较了两种不同干燥方式所得胡椒叶乙醇提取物的DPPH自由基清除能力和物质组成方式,冷冻干燥所得样品的清除自由基能力高于热风干燥,HPLC分析表明两种干燥方式所得样品物质组成差异较小。由于美国、欧洲、日本等国家的功能食品企业普遍采用ORAC作为功能食品的重要评价标准,本节以ORAC检测方法作为分离鉴定抗氧化活性物质的追踪方法。对胡椒叶乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,对乙酸乙酯部分和正丁醇部分采用硅胶色谱层析、凝胶色谱层析、反相色谱层析、薄层色谱层析及HPLC等色谱方法分离纯化得到活性目标物,通过核磁共振、质谱、红外光谱等手段鉴定、表征目标化合物,首次从胡椒中分离得到两种具有较高抗氧化活性的化合物扁柏脂素和野漆树苷,它们的ORAC值分别为16070μmolTE/g和10823μmolTE/g。
【作者】张水平；
【导师】王庆煌；赵思明；谷风林；
【作者基本信息】华中农业大学，食品科学，2014，硕士
【关键词】胡椒；DPPH自由基清除能力；多酚；ORAC(氧自由基清除能力)；精油；GC-MS；

【参考文献】
[1]安伟刚.多目标优化方法研究及其工程应用[D].西北工业大学,2005.
[2]李萍.稻瘟菌无毒基因AvrPiz-t遗传位点结构组成和动态变化及AvrPiz-t半胱氨酸残基功能分析[D].浙江大学,植物保护,2012,硕士.
[3]苑升旺.新民俗景观旅游区景观设计[D].内蒙古师范大学,设计艺术学,2013,硕士.
[4]周建文.优秀女子网球选手比赛每局第一分与最后一分的技战术特征分析[D].西南大学,体育教育训练学,2013,硕士.
[5]董舶洋.店堂告示法律效力研究[D].吉林大学,法律,2014,硕士.
[6]赵悦.葛兰西实践哲学及当代反思[D].黑龙江大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[7]范兆睿.产品侵权诉讼证明妨碍研究[D].山东财经大学,民商法学,2013,硕士.
[8]王晓飞.氟康唑和小檗碱的真菌胞内含量及协同抗耐药机制研究[D].福建中医药大学,中药学,2013,硕士.
[9]郑月.基于纳米材料的生物传感技术在生化分析中的应用[D].湖南大学,2009.
[10]廖观祥.双侧姆趾皮瓣瓦合修复全拇指皮肤脱套伤的可行性研究[D].苏州大学,骨外科学（专业学位）,2014,硕士.
[11]张欣蓓.西安市第四污水处理厂工程项目后评估研究[D].西安建筑科技大学,市政工程,2013,硕士.
[12]范欣.资源禀赋影响经济增长的传导机制研究[D].吉林大学,西方经济学,2013,硕士.
[13]傅亚欣.金针菇菌柄基部多糖的提取、纯化及细胞免疫活性研究[D].南京农业大学,食品科学,2012,硕士.
[14]郭志杰.初任英语教师的教学适应性[D].华中师范大学,学科教学,2014,硕士.
[15]张玉宝.YCYL炼油厂技术人员的薪酬优化研究[D].西北大学,高级工商管理（EMBA）（专业学位）,2012,硕士.
[16]潘熙.移民背景下的四川宗祠建筑研究[D].西南交通大学,建筑历史与理论,2013,硕士.
[17]王瑞琦.中国石油资金管理模式创新研究[D].吉林大学,会计,2012,硕士.
[18]李媛.新型静止无功发生器SVG控制策略仿真研究[D].北京交通大学,2008.
[19]史明,施文忠.铁路局科技项目计划信息化管理的研究与实施[J].上海铁道科技.2006(05)
[20]曹慧.英语、法语、汉语被动语态之比较研究[D].武汉理工大学,外国语言学及应用语言学,2004,硕士.
[21]周渝生,曹传根,甘菲芳.高炉长寿技术的最新进展[J].钢铁.2003(11)
[22]张小明,凌大荣,刘梦雄,崔小宁.军队物资采购经济效益考核评价刍议[J].军事经济研究.2008(02)
[23]王静.中国工业部门资本能源替代研究[D].湖南大学,金融学,2013,硕士.
[24]郭仪.基于技术分析原理的机械化交易模式设计及验证[D].兰州大学,金融学,2013,硕士.
[25]周利军.论鲁迅小说母亲形象的塑造及其创作意识[D].华中师范大学,中国现当代文学,2014,硕士.
[26]付江云.基于音频分析的实时真空检测系统的研发[D].广东工业大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[27]肖寒.沈阳市浑南新区住宅地价变化及趋势预测研究[D].沈阳农业大学,土地资源管理,2013,硕士.
[28]吴超.基于FPGA的红外图像USB接口技术研究[D].北方工业大学,信号与信息处理,2014,硕士.
[29]徐伟.油桐属植物SSR分子标记的开发和种质遗传多样性的研究[D].扬州大学,植物学,2012,硕士.
[30]郭芸帆,彭海琳,刘忠范.基于石墨烯-拓扑绝缘体杂化结构的高性能透明导电薄膜的制备及其应用研究[A].中国化学会.中国化学会第29届学术年会摘要集——第33分会：纳米材料合成与组装[C].中国化学会:,2014:1.
[31]邱飞岳,吴裕市,邱启仓,王丽萍.基于双极偏好占优的高维目标进化算法[J].软件学报,2013,03:476-489.
[32]李欣遥.商业地产开发项目的风险管理[D].北京交通大学,2013.
[33]朱莎.发泡水泥复合屋面板负风压承载力的理论分析与试验研究[D].北京交通大学,2014.
[34]刘星.基于函数调用图的恶意代码同源分析[D].国防科学技术大学,软件工程,2012,硕士.
[35]沈巍麟.既有住宅改造综合评价体系研究[D].北京交通大学,2008.
[36]王洪庆.泄洪洞的紊流数值模拟及试验研究[D].西北农林科技大学,2006.
[37]马海真.临泽县黄家湾滩墓群发掘与分期研究[D].南京师范大学,考古学及博物馆学,2012,硕士.
[38]周旭东,王国栋.双向规划小脑模型神经网络CMAC学习控制[J].控制与决策,1997,02:192-191.
[39]顾若楠.小学课堂纪律的田野考察[D].华东师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[40]王罗强.基于化工企业特点的ERP导入策略探讨[D].湘潭大学,2002.
[41]梁月圆.软件自动化测试方法研究及系统开发[D].长安大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[42]仇剑科.基层法院绩效考核制度的局限与完善[D].内蒙古大学,法律,2014,硕士.
[43]凌立刚.商务智能在电信行业的应用[D].浙江大学,2003.
[44]章成志.www信息挖掘技术及其在农业信息领域中的应用[J].计算机与农业,2001,12:4-6.
[45]余江,周红阳,黄佳胤,赵曼勇,杨晋柏.影响直流100Hz保护的交流系统故障范围分析[J].电力系统自动化,2008,03:48-51.
[46]谢立华.黄尾密鲴与翘嘴红鲌杂交F_1的主要生物学特征研究[D].湖南师范大学,发育生物学,2014,硕士.
[47]杨斌.IEEE 802.11p协议分析与研究[D].南京理工大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[48]彭钧敏,王佳楠,叶旭东.不确定型网络系统的分布式自适应跟踪控制器(英文)[J].自动化学报,2013,10:1729-1735.
[49]吴丹.基于DEA的综合交通运输系统协调发展评价研究[D].北京交通大学,2009.
[50]林琳.岭南文化创意园建设的战略思考与项目策划[D].广东工业大学,工商管理,2014,硕士.