miRNA424及其靶基因MEK1和FGFR1在胎儿生长受限中的作用机制研究

【摘要】第一部分miR-424在胎儿生长受限组和正常对照组胎盘组织中差异表达研究目的本研究分析胎儿生长受限组（FGR）和正常对照组胎盘组织中miR-424的表达水平，探讨miR-424与FGR的相关性，从而阐明miR-424在FGR中的作用，为胎儿生长受限发病机制提供新的思路和途径,为胎儿生长早期诊断分子指标的筛选奠定基础。方法选取25例胎儿生长受限组(实验组)和25例正常对照组胎盘组织，Trizol一步法提取组织中总RNA,鉴定总RNA的质量，RealTime-PCR分别测定胎儿生长受限胎盘和正常对照组胎盘组织中miR-424的表达水平与内参基因U6表达的相对值，分析miR-424和胎儿生长受限的相关性。结果①FGR组产妇年龄和孕前体重及孕周与正常对照组无显著性(P>0.05)，FGR组新生儿体重明显低于对照组(P<0.001)；②应用RT-PCR方法分别检测了胎儿生长受限组和正常对照组胎盘组织中miR-424的表达水平，与正常对照组胎盘组织比较，表达明显增加。((p=0.002)；③miR-424可以作为一个潜在的生物学标志物来区分FGR及正常对照组，其AUC为0.754，灵敏度为88.6%，特异性为68.0%。结论miR-424在胎盘滋养细胞上表达丰富，高表达水平是实现miRNA-424生物学功能的基础。生物学功能包括调控细胞的分化，增殖及血管生成。在胎儿生长受限组胎盘组织中表达水平明显升高的miR-424可能参与了胎儿生长受限的病理生理的发生和发展。第二部分miR-424的靶基因MEK1和FGFR1在胎儿生长受限中胎盘组织中差异表达研究目的探讨miR-424的靶基因MEK1和FGFR1在胎儿生长受限中的差异性表达，探讨靶基因丝裂原活化蛋白激酶激酶1（MEK1）和成纤维细胞生长因子受体1（FGFR1）与FGR的相关性，从而阐明在FGR中的作用，为胎儿生长受限发病机制提供新的思路和途径。方法采用RealTime-PCR测定25例胎儿生长受限患者胎盘组织中靶基因MEK1和FGFR1mRNA的表达水平基因与内参基因GAPDHmRNA表达的相对值，与25例正常胎盘组织中表达水平相比较。westernblotting方法检测miR-424的靶基因MEK1和FGFR1在5例胎儿生长受限及正常对照胎盘组织中表达水平，蛋白分析GAPDH作为阴性对照。结果①与正常胎盘组织比较，miR-424靶基因MEK1和FGFR1mRNA水平明显降低（P=0.036）。②westernblotting方法检测miR-424靶基因MEK1和FGFR1蛋白，与正常胎盘组织比较，MEK1和FGFR1蛋白水平明显降低.③半定量分析显示MEK1和FGFR1分别减少75%和60%。结论FGFR1和MEK1的功能涉及很多信号通路，参与细胞增殖，分化和血管生成，胎盘发育和胎儿生长过程中也存在MEK1和FGFR1mRNA水平的表达,MEK1和FGFR1mRNA水平的表达的降低和胎儿生长受限的发病机制相关，MEK1和FGFR1在胎儿生长受限的发生过程中可能起到一定的作用。第三部分miR-424和靶基因MEK1和FGFR1的相关性研究及其在胎儿生长受限中的临床意义。目的探讨miR-424与其靶基因MEK1和FGFR1的关系，阐明miR-424和靶基因MEK1和FGFR1的关系在FGR中的作用，探讨FGR的发病机制和病因研究。方法采用Spearman等级相关进行胎盘组织中miR-424和MEK1的相对表达水平的相关性分析和miR-424和FGFR1的相对表达水平的相关性分析，以及胎盘组织中MEK1与FGFR1表达之间的相关性。结果①miR-424与MEK1呈明显负相关趋势（Spearmanr=-0.667;p=0.001）。表达上调的miR-424抑制了MEK1mRNA的表达。②miR-424与FGFR1呈负相关趋势（Spearmanr=-0.250;p=0.080），但没有达到统计学意义。表达上调的miR-424抑制了FGFR1mRNA的表达。③FGFR1与MEK1呈显著的正相关(Spearmanr=0.34,P<0.0001)，具有统计学意义。FGFR1和MEK1mRNA的有协同作用。结论本研究结果表明，miR-424的异常高表达与FGR显著相关，在FGR的发生中，miR-424可能通过抑制FGFR1的转录后表达和MEK1转录和转录后表达而起作用，FGFR1和MEK1mRNA的低表达有协同作用。我们提出miR-424可能通过miR-424-FGFR1-MEK1-MAPK作用通路参与FGR的发生发展。这些发现可能为将来miR-424在FGR的预防和诊疗中提供新的靶点。
【作者】黄璐；
【导师】李德春；沈宗姬；
【作者基本信息】苏州大学，普外科（专业学位），2013，博士
【关键词】胎儿生长受限；胎盘；miRNA424；MEK1；FGFR1；MAPK；miR-424；临床作用；

【参考文献】
[1]朱鑫.隧道结构表面病害特征快速检测研究[D].西南交通大学,桥梁与隧道工程,2014,硕士.
[2]王华宜.基于Android平台的视频监控[D].华南理工大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[3]李文娟.黄芩中汉黄芩素的高速逆流色谱制备及其抗肿瘤作用[D].福建中医药大学,中药学,2014,硕士.
[4]袁媛.基于石墨烯的电化学传感器的制备及其在双酚A检测中的应用[D].常州大学,2014.
[5]张丁丁.深厚松散层底部含水层渗流与变形试验研究[D].西安科技大学,采矿工程,2013,硕士.
[6]付华.冀东发展集团人力资源管理改进研究[D].燕山大学,工商管理,2013,硕士.
[7]崔晓.卵巢卵黄囊瘤6例临床分析[D].大连医科大学,妇产科学,2012,硕士.
[8]朱文婕.数据仓库技术及应用[J].安徽电子信息职业技术学院学报,2004,Z1:265-266.
[9]安恒博.XX公司面向行业客户的营销模式研究[D].西北大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[10]沈财余.从软、硬件系统的集成发展论物探一体化[J].石油地球物理勘探,2003,S1:126-127+138.
[11]丁辰.广告翻译的语用失效和翻译技巧[D].武汉理工大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[12]王建.从《南方人物周刊》封面人物看公共人物形象的建构[D].兰州大学,新闻学,2013,硕士.
[13]付帅.网络视频监控系统的研制[D].南京邮电大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[14]张根社.企业家要树立市场经济的价值观[J].中国乡镇企业.2002(06)
[15]赵熊璐子.服务型企业员工情绪管理对工作绩效的影响研究[D].江西财经大学,企业管理,2013,硕士.
[16]皇甫瑶.继承回复请求权之研究[D].苏州大学,民商法学,2014,硕士.
[17]范心明,管霖,夏成军,饶宏,许树楷,李立浧.基于PCHD模型的柔性直流输电鲁棒控制[J].电力系统自动化,2013,15:40-46.
[18]孙珂,夏清.信息披露有效性与电力市场交易模式的选择[J].电力系统自动化,2008,06:60-65.
[19]石桥.基于世界城市的北京流通产业评价指标体系构建研究[D].北京物资学院,产业经济学,2012,硕士.
[20]邓美琛.无线传感器网络在设施农业中的应用研究[D].东华大学,控制工程（专业学位）,2014,硕士.
[21]章谦.高频激励下轮胎面内力学特性研究[D].吉林大学,车辆工程,2014,硕士.
[22]潘珉蕙.A企业的薪酬管理及探析[D].浙江工业大学,MBA,2012,硕士.
[23]王煜坤.我国高等院校体育类专业《学校体育学》课程设置及教学现状研究[D].西安体育学院,体育教育训练学,2013,硕士.
[24]胡靖偲.泰国学习者“V_(双)+N_(双)”动宾结构的习得研究[D].西南交通大学,语言学及应用语言学,2014,硕士.
[25]庞爱平.慢速求解第一类Fredholm积分方程的方法研究[D].哈尔滨工业大学,计算数学,2013,硕士.
[26]金首红.高校危机传播管理中的沟通机制和策略研究[D].浙江大学,2007.
[27]曹方蓝.媒介环境学视野下的中国文艺气质[D].兰州大学,文艺学,2013,硕士.
[28]孙凯.数字化智能型公共广播系统的设计[D].天津工业大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[29]鲁选会.关于西藏自治区电信公司人力资源管理战略性思考[D].四川大学,工商管理,2003,硕士.
[30]臧文静.极端气候条件下的建筑形态研究[D].北京建筑大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[31]马懿莉.江西省新型城镇化建设研究[D].华中师范大学,科学技术哲学,2014,硕士.
[32]吴磊.新疆和静县蒙古族长调民歌的考查研究[D].新疆师范大学,音乐学,2013,硕士.
[33]李威.细胞因子诱导的杀伤细胞治疗转移性肾癌的临床研究[D].郑州大学,肿瘤学（专业学位）,2013,硕士.
[34]黎金定.内部控制审计对会计信息质量的影响研究[D].天津财经大学,会计学,2012,硕士.
[35]樊涛.热锻分析软件的数值振荡及网格划分的研究[D].华中科技大学,材料加工工程,2013,硕士.
[36]于跃.基于工业现场总线的系统设计[D].西安理工大学,微电子学与固体电子学,2004,硕士.
[37]王小磊.硫化氢抑制高糖诱导的内皮细胞炎症的机制[D].山东大学,内科学,2013,硕士.
[38]陶奕熹.凯尔泰斯作品中的“恐惧”主题研究[D].西北民族大学,比较文学与世界文学,2012,硕士.
[39]张鸿烈,邓金华.用地震速度谱信息寻找地下油气藏的方法[J].石油地球物理勘探,1996,S2:53-59+151.
[40]王超.海峡两岸建立军事安全互信机制研究[D].南京大学,中国近现代史,2013,硕士.
[41]赵星光,蔡明,蔡美峰.岩石剪胀角模型与验证[J].岩石力学与工程学报,2010,05:970-981.
[42]马竹梧.工业炉窑自动化技术节能交流会在重庆召开[J].冶金自动化,1982,04:64.
[43]刘鹏.西柏坡红色旅游纪念品包装设计研究[D].河北科技大学,设计艺术学,2014,硕士.
[44]赵青.有关预测亏损上市公司被特别处理可能性的研究——现金流量指标应用[D].对外经济贸易大学,工商管理,2004,硕士.
[45]尹佳音.印迹型TiO_2光催化剂的制备及其光催化性能研究[D].东华大学,环境工程（专业学位）,2014,硕士.
[46]王阿鸣.石墨烯基纳米复合材料的制备及光电性质研究[D].安徽大学,2014.
[47]王纪荣.景德镇华风瓷厂93米煤气隧道窑调试简介[J].景德镇陶瓷.1988(03)
[48]韩智强.高墩大跨弯连续刚构桥冲击系数研究[D].长安大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[49]刘宏亮.C语言Web考试系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[50]闫青.以用户为中心的隐性知识转化及其实现研究[D].山东财经大学,管理科学与工程,2012,硕士.