AhR对子宫内膜癌增殖与侵袭能力影响的实验研究

AhR对子宫内膜癌增殖与侵袭能力影响的实验研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-11-06 分类:参考文献 喜欢:2397
师大云端图书馆

【摘要】宫内膜癌(endometrialcarcinoma)别名为子宫体部癌,该肿瘤具备较强的侵犯肌层组织和周围扩散的能力,是源发自子宫内膜上皮组织的恶性肿瘤,是妇女生殖系统最为多见的恶性肿瘤之一,近年来发病率有上升趋势。常规治疗方法除了手术、放化疗外,缺少新的治疗手段,生存率和治疗有效率在很长时间内均无明显提高。目前,新型的肿瘤靶向治疗技术有望解决这一难题。近年来,肿瘤靶向治疗成为国际癌症研究的热点与难点,该技术代表着未来癌症治疗领域新的发展方向。肿瘤分子靶向治疗是选择具有恶性肿瘤细胞特异性的分子靶标,也就是肿瘤细胞本身特有的受体、激酶和分子结构等等特异性作用的靶向位点,利用作用于靶标的各种药物直接或间接阻断肿瘤细胞的信号通路,从而有效抑制细胞的生长增殖或者促进肿瘤细胞的凋亡,该方法不会破坏和影响正常组织细胞的功能与结构,对人体更为安全、有效,副作用与毒性反应均不明显,有利于在肿瘤治疗中的实际应用。新型靶向治疗证实均对一些恶性肿瘤有明显的疗效,但是目前针对子宫内膜癌还没有有效的靶向治疗目标和方向。芳香烃受体(Arylhydrocarbonreceptor,AhR)是一种配体激活性的转录因子,属于PER-ARNT-SIM(PAS)家族。没有与配体结合的芳香烃受体AhR在细胞质中以多聚体的形式存在,与配体结合以后,AhR会转移到细胞核内,随即与芳香烃受体的核转运蛋白(Arylhydrocarbonreceptornucleartranslocator,ARNT)结合,形成具有功能活性的转录因子复合物。特异性增强子序列和复合物结合,特异性增强子临近二恶英反应元件(Dioxinresponsiveelements,DREs)的靶向启动子,可以调控细胞色素P4501A1(CytochromeP4501A1,CYP1A1)以及其他的异型性靶基因的表达,从而化学污染物的不良影响。本课题通过组织芯片技术检测AhR在子宫内膜癌中的表达与分布规律,掌握AhR表达与病人病理信息的关系。在此基础上建立子宫内膜癌细胞系(Ishikawa细胞和EEC-1细胞)离体模型,深入研究并阐释AhR受体在子宫内膜癌细胞增殖与侵袭中的作用机制,为子宫内膜癌的新型靶向治疗提供新的思路和理论支持,具有重要的科研价值和社会意义。本课题研究分三个部分:(1)AhR在子宫内膜癌组织中表达分布及相关临床意义;(2)AhR对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响研究;(3)AhR配体3-MC对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响。1.AhR在子宫内膜癌组织中表达分布及相关临床意义本部分收集2008年5月至2011年10月在大连市多家医院行子宫切除或诊断性刮宫的子宫内膜组织标本200例。应用组织芯片技术,检测AhR在正常子宫内膜组织、子宫内膜增生组织、子宫内膜癌组织中的表达与分布规律,并对AhR与病理信息间的关系进行分析。同时,应用RT-PCR法和Westernblot法检测AhRmRNA和蛋白在人子宫内膜癌和癌旁正常组织中的表达情况,探讨AhR蛋白与子宫内膜癌发生、发展的关系,及其在临床中的应用意义。结果显示:AhR在正常增生子宫内膜组织、子宫内膜单纯及复杂性增生组织、子宫内膜不典型增生组织和子宫内膜癌组织中的阳性表达率分别为4%、12%、20%和52%。从正常子宫内膜组织、子宫内膜增生组织至子宫内膜癌组织,AhR蛋白的阳性表达率呈显著下降的趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。在子宫内膜癌组织中,AhR的表达强度与其手术—病理分期、组织学分级、淋巴结转移相关(P<0.05),而与其病理学分型、肌层浸润深度无明显相关性(P>0.05)。经RT-PCR及Westernblot法检测,AhRmRNA和蛋白在子宫内膜癌和癌旁正常组织中均有表达。AhR蛋白的分子量大小约95kDa,经与内参GAPDH校准后,AhR蛋白在肿瘤组织中的表达量约高于正常组织中AhR蛋白表达量的2倍(P<0.05)。因此,AhR在子宫内膜癌组织中高表达,可能在子宫内膜癌发生发展中起着重要作用,具有一定的临床意义。2.AhR对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响研究本实验部分将在子宫内膜癌细胞系(Ishikawa细胞和ECC-1细胞)中,检测AhR基因和蛋白的表达情况,同时应用RNA干扰技术、MTT法、Tanswell等方法,明确AhR对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响。结果显示:AhR在Ishikawa和ECC-1两种子宫内膜癌细胞系中均有表达,为一条95kDa的蛋白条带。经与GAPDH标准化校正后,AhR在两种细胞系中的表达量与在第一部分子宫内膜癌组织中表达相当(p>0.05),高出正常组织2倍(p<0.05)。分别应用特异性AhRsiRNA和混杂siRNA作用于Ishikawa和ECC-1细胞后,AhRsiRNA组AhR蛋白表达在24h、48h和72h都降低,有统计学差异(P<0.05)。应用MTT法检测AhRsiRNA对子宫内膜癌细胞增殖的影响发现,在Ishikawa和ECC-1细胞中,分别经特异性AhRsiRNA和混杂siRNA作用后,两种肿瘤细胞的增殖程度相一致,并无统计学差异(p>0.05)。应用Transwell法检测AhRsiRNA对子宫内膜癌细胞侵袭的影响发现,经特异性AhRsiRNA和混杂siRNA作用后,两种肿瘤细胞的侵袭程度相一致,并无统计学差异(p>0.05)。因此,无配体激活且AhR基因敲除后,子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭能力未受到明显影响。3.AhR配体3-MC对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭能力的影响。本实验部分将检测AhR配体3-MC对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭的影响,同时采用特异性siRNA将AhR基因敲除验证肿瘤细胞增殖与侵袭情况是否与AhR通路相关。结果显示:分别经不同剂量的3-MC处理后,Ishikawa和ECC-1两种肿瘤细胞的呈现出不同程度的增殖抑制现象,增殖抑制程度与3-MC剂量呈正相关关系(P<0.05)。分别经特异性AhRsiRNA和混杂siRNA作用后,3-MC抑制的肿瘤细胞增殖过程被阻断,各种肿瘤细胞增殖无统计学差异(p>0.05)。3-MC处理后的两种肿瘤细胞的侵袭能力未发生明显变化,并无统计学差异(p>0.05)。因此,3-MC抑制EC细胞增殖是由AhR通路介导的。
【作者】曲学玲;
【导师】贾玉杰;
【作者基本信息】大连医科大学,病理学与病理生理学,2014,博士
【关键词】芳香烃受体;子宫内膜癌;3-甲基胆蒽;组织芯片;增殖;侵袭;

【参考文献】
[1]宁波.唐代乐舞诗的意境研究[D].山西师范大学,文艺学,2014,硕士.
[2]张皓.突发事件中的微博意见领袖研究[D].上海社会科学院,新闻学,2012,硕士.
[3]张云飞.养老社会化视角下完善河南省养老服务体系的路径选择[D].郑州大学,社会保障,2013,硕士.
[4]王萍.耦合降水集合预报的洪水预报研究[D].大连理工大学,水文学及水资源,2013,硕士.
[5]王来高.基于DSP的两相异步电动机SVPWM控制的系统研究[D].合肥工业大学,电机与电器,2004,硕士.
[6]王兴强.高阶路由器芯片及网络结构性能分析[D].国防科学技术大学,计算机科学与技术,2012,硕士.
[7]王苗苗.用于船舶修理的便捷式移动终端系统设计与开发[D].华南理工大学,机械工程,2012,硕士.
[8]冯继兴.酪氨酸磷酸化蛋白和胞质动力蛋白在对虾白斑症病毒(WSSV)感染过程中的作用研究[D].中国海洋大学,水产养殖,2014,博士.
[9]刘鸿杨.交际教学法在基于计算机和网络的大学英语听说教学中的应用[D].广西师范大学,学科教学,2013,硕士.
[10]黄蓉.浅析迪赛品牌的品牌价值和设计传播的关系[J].艺术科技,2013,08:236.
[11]吴玓.山东瑞康医药公司基础医疗市场营销策略研究[D].山东大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[12]李智慧.《吴郡文编》研究[D].苏州大学,中国古代文学,2014,硕士.
[13]付瑾平.石油科技期刊的榜样[J].石油地球物理勘探,2005,03:259.
[14]周真.敏感性问题调查的方法[D].苏州大学,应用统计(专业学位),2013,硕士.
[15]佟菲.常态化户外徒步运动服装设计探究[D].长春工业大学,设计艺术学,2013,硕士.
[16]崔佳.我国高技术环境污染损害赔偿问题研究[D].天津大学,经济法学,2013,硕士.
[17]周新宇.面向协同锻件产品开发的知识管理系统研究与实践[D].机械科学研究院,2003.
[18]罗林聪.水平异形管降膜蒸发流动与传热强化机理及实验研究[D].山东大学,热能工程,2014,博士.
[19]丁宏谦.水相中铁(Ⅱ)催化的不对称芳基脲的氧化反应[D].东北师范大学,有机化学,2012,硕士.
[20]骆端.论司法解释溯及力认定与创新[D].湘潭大学,法律,2011,硕士.
[21]金玲,徐萌,刘畅,韩莉,王攀攀.中医益气养阴解毒复方联合化疗治疗非小细胞肺癌的系统评价[J].中国老年学杂志,2015,07:1837-1840.
[22]柯欣.制造毒品罪之疑难问题探析[D].西南政法大学,刑法学,2012,硕士.
[23]张宁.山东省金融结构演进对经济增长的影响研究[D].山东大学,财政学,2013,硕士.
[24]王严.基于单片机的无刷直流电机控制系统设计与实现[D].南京邮电大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[25]赵丽丽.猪源肠外致病性大肠杆菌Ⅵ型分泌系统基因vca0107基因缺失突变株的构建及生物学特性研究[D].华中农业大学,预防兽医学,2014,硕士.
[26]相金,任真,韦莹,杨俊柱,张胜义.硒/氧化石墨烯/二氧化钛复合薄膜的制备及光电转换性质[J].化学研究,2013,01:30-35.
[27]叶琳.改性豆渣对污水中染料物质的吸附研究[D].西南大学,环境工程,2014,硕士.
[28]金丽晶.信息技术支持下小学数学个性化学习模式的设计与实践研究[D].东北师范大学,现代教育技术,2012,硕士.
[29]戴希文.论我国生态用地法律保护制度[D].湖南师范大学,法律(专业学位),2013,硕士.
[30]李燕芳.《黑暗的心》的文体分析[D].山西师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[31]孙永建.高校毕业生非理性就业观研究[D].中共中央党校,思想政治教育,2014,博士.
[32]刘兵.1-苯基-1,2,4-三氮唑-5-酮系列衍生物的合成及其抗肿瘤活性的初步研究[D].天津医科大学,药物化学,2009,硕士.
[33]胡宝珠.基于无线蜂窝网络的多点协同通信能效性优化控制算法研究[D].燕山大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[34]王媛媛.外资寿险公司在我国的发展现状及前景研究[D].首都经济贸易大学,金融学,2013,硕士.
[35]徐晓燕.我国乳制品主要追溯系统的编码及应用[D].北京交通大学,2013.
[36]曾建国.医科大学生社会创业动机及其影响因素研究[D].中南大学,社会医学与卫生事业管理,2014,博士.
[37]任志伟.建筑安全生产政府监管博弈分析与路径选择[D].山东建筑大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[38]杨苏东,林少雄,田园,申承民,高鸿钧.石墨烯负载金属纳米粒子的制备及其电催化特性[A].中国真空学会.中国真空学会2014学术年会论文摘要集[C].中国真空学会:,2014:1.
[39]刘卫平,陆际光.基于Internet的智能超媒体教学系统[J].中南民族大学学报(自然科学版),2003,01:64-67.
[40]丁雪.弗雷格概念理论研究[D].河北大学,逻辑学,2014,硕士.
[41]包日格勒.浅析我国现行减刑制度[D].河北大学,法律(专业学位),2014,硕士.
[42]武鹏,徐群,沈忠旗,程浩忠.基于负荷监测系统的配电网故障测寻方法[J].电力系统自动化,2012,03:111-115.
[43]胡惟.郯庐断裂带渤海段新构造活动方式与深部背景[D].合肥工业大学,构造地质学,2014,硕士.
[44]杭利军.可移动式风蚀风洞数据采集处理系统的研究与开发[D].内蒙古农业大学,农业机械化工程,2004,硕士.
[45]赵鹏.加劲钢板深梁在水平荷载作用下的弹性屈曲性能研究[D].长安大学,结构工程,2014,硕士.
[46]范昊宁.姜黄素对人鼻咽癌细胞放射增敏作用及其机制研究[D].南方医科大学,中药学,2014,博士.
[47]左翼.警察心理韧性量表的编制[D].西南大学,基础心理学,2013,硕士.
[48]常燕玲.超长隔震结构抗震性能与抗倒塌能力研究[D].兰州理工大学,防灾减灾工程及防护工程,2013,硕士.
[49]孙明轩,何熊熊,陈冰玉.时变机器人系统的重复学习控制:一种混合学习方案(英文)[J].自动化学报,2007,11:1189-1195.
[50]孙成禹.球面波分解理论及其倾斜叠加方法的实现[J].石油地球物理勘探,2000,06:723-729+820.

相关推荐
更多