亚洲玉米螟中肠类钙粘蛋白和碱性磷酸酯酶与Cry1Ac抗性产生关系的研究

亚洲玉米螟中肠类钙粘蛋白和碱性磷酸酯酶与Cry1Ac抗性产生关系的研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-10-25 分类:参考文献 喜欢:2634
师大云端图书馆

【摘要】亚洲玉米螟是我国主要的玉米害虫,表达BtCry毒素的转基因玉米为其防治提供了新的途径。近年来已有关于鳞翅目害虫对转Bt玉米产生抗性的报道,而本实验室亦证实通过Cry1Ab、Cry1Ac持续汰选,可以获得亚洲玉米螟抗性种群,这些现象都说明亚洲玉米螟具备对Cry毒素产生抗性的可能性,而害虫对Cry毒素产生抗性将成为威胁该技术长期使用的主要原因。“多基因”策略是延缓抗性产生的重要途径之一,而研究不同Cry毒素在昆虫中肠上的受体则是该策略的基础。研究受体与抗性产生的关系,将为抗性监测和治理提供重要的科学依据。本文在实验室已克隆亚洲玉米螟中肠类钙粘蛋白(ofCAD)的基础上,进一步克隆了另一个Cry1Ac受体碱性磷酸酯酶(ofALP),并且从转录水平调节及突变2个方便研究了上述2个受体与Cry1Ac抗性产生的关系,得到以下主要结果。通过原核表达和配体杂交技术将Cry1Ab/Cry1Ac在类钙粘蛋白上的结合区域定位在1347~1562位氨基酸的肽段上,该肽段位于ofCAD序列的近膜区(MPR);通过高压汰选,得到具有较高抗性的Cry1Ac抗性个体,在抗性个体中首次发现了3个MPR的突变体,即有2-3个氨基酸替换突变的MPR1-r1和MPR-r3,以及既有氨基酸替换突变又有一个26个氨基酸缺失突变的MPR-r2,且1458T→S在3个突变中均发生。成功原核表达MPR-r2,利用免疫共沉淀的方法及与MPR多肽片段进行比较,明确了MPR-r2突变体与Cry1Ac的结合能力下降。通过与亚致死量的Cry1Ac毒素进行混合后饲喂敏感品系的亚洲玉米螟幼虫,发现MPR多肽片段存在增效作用,而在突变体中则丧失这一现象;通过荧光定量PCR,发现在Cry1Ac抗性品系幼虫中,钙粘蛋白的转录水平在1、2、4龄发生显著下调。通过RACE技术克隆了亚洲玉米螟敏感品系的碱性磷酸酶基因ofalp;通过免疫荧光技术明确了其主要分布在中肠后半部分上皮细胞的顶部、基部及细胞侧板;通过免疫共沉淀技术首次证实ofALP是Cry1Ac结合受体;该结合可以被GalNAc解离;原核表达的ofALP的Cry1Ac结合区域多肽片段具备与Cry1Ac结合的能力并且可以对毒素起到增效作用;通过荧光定量PCR技术比较未发现ofALP的转录水平在抗、敏感品系亚洲玉米螟中具有显著差异。本研究结果初步表明,亚洲玉米螟类钙粘蛋白的表达水平、MPR区域突变尤其是缺失突变可能是其对Cry1Ac毒素产生抗性的原因,为今后检测亚洲玉米螟田间种群抗性个体的分子标记提供了参考。ofALP是亚洲玉米螟幼虫中肠上Cry1Ac毒素的受体,未发现其表达量与抗性有显著的关系。
【作者】靳婷婷;
【导师】何康来;
【作者基本信息】中国农业科学院,农业昆虫与害虫防治,2014,博士
【关键词】亚洲玉米螟;类钙粘蛋白;碱性磷酸酯酶;Cry1Ac毒素;靶标害虫抗性;

【参考文献】
[1]刘志远.中国对虾贮藏保鲜过程中肌肉蛋白质组学研究[D].浙江工商大学,食品科学与工程,2013,硕士.
[2]孙萌.初中数学符号语言学习与教学探究[D].山东师范大学,教育(专业学位),2013,硕士.
[3]王慧.大学生化学实验技能学习方式的探查[D].扬州大学,课程与教学论,2012,硕士.
[4]郝秋红.小组互助式学习的学习动机研究[D].华中师范大学,现代教育技术,2014,硕士.
[5]赵佶.日本东北大学开发出导通截止比为1万的石墨烯FET[J].半导体信息,2012,05:30-31.
[6]曾阳艳.基于支持向量机的人脸识别方法研究[D].湖南大学,软件工程,2010,硕士.
[7]彭颖.2012-2013年长沙地区急性下呼吸道感染住院儿童病毒谱流行病学调查[D].湖南师范大学,儿科学,2014,硕士.
[8]刘亚楠.村民自治组织形态的理性分析[D].甘肃政法学院,民商法学,2012,硕士.
[9]要秀宏.面向对象方法在工业固体废物遥感影像分类中的应用研究[D].北方民族大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[10]刘小华.目的论视角下汉语流行语的英译[D].西北大学,英语笔译(专业学位),2014,硕士.
[11]靳慧丽.典型碳材料的理论研究[D].大连理工大学,2012.
[12]韩京伟,刘凯.商贸物流系统协调发展机制探析[J].中国流通经济,2014,06:31-35.
[13]万文露.电泳—烧结两步法制备氧化硅涂层及性能研究[D].沈阳理工大学,应用化学,2013,硕士.
[14]白银娜.西藏新型农牧区合作医疗的现状及困境对策探析[D].吉林大学,行政管理,2014,硕士.
[15]孙月洲.云制造车间资源调度与配置模型及优化研究[D].哈尔滨理工大学,机械设计及理论,2012,硕士.
[16]朵拉.非线性时变系统的弱Lyapunov形式的稳定性分析[D].华东师范大学,应用数学,2013,硕士.
[17]吴秀坤.纳版河流域土地利用方式对土壤活性有机碳和水稳性团聚体的影响[D].云南农业大学,植物营养学,2013,硕士.
[18]方娜娜.新疆师范大学教职工生活方式的调查与研究[D].新疆师范大学,体育(专业学位),2014,硕士.
[19]白学贤.郁达夫与佐藤春夫文学的比较研究[D].鲁东大学,日语语言文学,2014,硕士.
[20]徐刚,李忠义,张勇,张哲伟,陈继民,杜传军.超声引导下肾上盏径路经皮肾镜碎石术治疗鹿角形结石疗效及安全性分析[J].局解手术学杂志,2014,05:471-474.
[21]王道斌.基于天空偏振光的SLAM方法的研究[D].中国科学技术大学,检测技术与自动化装置,2014,博士.
[22]李自娟.c-myc在成釉细胞瘤中的表达及与人端粒酶逆转录酶的活性[D].中国医科大学,口腔基础医学,2004,硕士.
[23]陈贤阳,黄开胜,明国锋,陈凯阳,陈志江.风机用外转子永磁无刷直流电动机的优化分析[J].微特电机,2014,09:39-42.
[24]董海明.掺杂石墨烯系统电场调控的非线性太赫兹光学特性研究[J].物理学报,2013,23:373-377.
[25]王亮.DR和MRI在婴幼儿发育性髋关节脱位诊断中的应用[D].苏州大学,影像医学与核医学,2013,硕士.
[26]刘志峰.绿色产品综合评价及模糊物元分析方法研究[D].合肥工业大学,2004.
[27]魏颖.金庸武侠小说英译中“侠义”精神的再现[D].西北师范大学,英语语言文学,2013,硕士.
[28]慕春棣.对控制教育的挑战IFAC第四次控制教育研讨会(ACE’97)综述[J].自动化学报,1998,02:143-145.
[29]秦琳.清代“赃罪”法律责任研究[D].海南大学,法律史学,2014,硕士.
[30]柯贵珍.蚕丝蒸汽闪爆改性及其粉末超细化研究[D].东华大学,纺织材料与纺织品设计,2004,硕士.
[31]刘振斌.基于矩阵半张量积方法的混合值逻辑网络的控制与应用[D].山东大学,控制理论与控制工程,2014,博士.
[32]邝欣.成都市政策性农业保险财政支持研究[D].西南交通大学,公共管理,2013,硕士.
[33]阳诚武.长短叶片离心通风机的数值研究[D].东北大学,工程热物理,2010,硕士.
[34]曹冰.OBIX智能建筑服务集成平台的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程(专业学位),2012,硕士.
[35]何丹丹.认知风格对阅读策略及阅读水平影响的研究[D].安徽大学,英语语言文学,2014,硕士.
[36]杨美霞.基于城铁的异步电机无速度传感器控制技术研究[D].北京交通大学,电气工程(专业学位),2013,硕士.
[37]李波.血清淀粉样蛋白A1对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响及其机制的实验研究[D].山东大学,内科学,2014,博士.
[38]张墨.湖南旅游从业人员资格考试管理系统的设计与实现[D].山东大学,软件工程(专业学位),2013,硕士.
[39]杨丹丹.Poisson风险模型及其推广模型的破产概率[D].渤海大学,应用数学,2013,硕士.
[40]邱洋.济南公交网络状态监控系统的设计与实现[D].山东大学,计算机技术(专业学位),2013,硕士.
[41]孙晓洁.AM燃气有限公司服务管理提升研究[D].河南科技大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[42]丁雯雯.盐酸青藤碱对雄性大鼠生殖力及F1代胚胎发育影响的研究[D].湖南中医药大学,中药学,2013,硕士.
[43]王宇.超高层建筑结构健康监测系统研究与设计[D].哈尔滨工业大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[44]冯海燕.枯草芽孢杆菌XZI125改善米糠的功能活性成分并提高其营养价值的研究[D].南京农业大学,食品科学,2012,硕士.
[45]禚焕雯.基于加强层粘滞阻尼系统和摇摆墙结构的海洋平台振动控制初步研究[D].青岛理工大学,港口、海岸及近海工程,2012,硕士.
[46]张民.保险公司财务信息披露研究[D].首都经济贸易大学,金融学,2004,硕士.
[47]罗航乐.准分子激光上皮下角膜磨镶术后临床并发症的系列研究[D].南方医科大学,眼科学,2012,硕士.
[48]威廉A·施奈德,罗兰L·陈,米洛M·巴克斯.平点勘探[J].石油地球物理勘探,1976,S1:23.
[49]马婧智闻.高校学生社区思想政治教育研究[D].西安科技大学,思想政治教育,2013,硕士.
[50]孟凡长.人文关怀视域下高校新生思想政治教育[D].吉林大学,思想政治教育,2013,硕士.

相关推荐
更多