CD163在慢加急性乙型肝炎肝衰竭及原发性肝癌患者中的表达及临床意义

【摘要】中文摘要第一部分CD163在慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者中的表达及临床意义乙型肝炎病毒感染是一个重要的世界卫生问题。它被认为是各种肝脏急慢性疾病的主要病因之一。由于某些病因的急剧发展,一些慢性乙型肝炎(CHB)患者有可能发展为肝衰竭。我们将这些由慢性乙型病毒性肝炎发展而来的肝衰竭称为慢加急性乙型肝炎肝衰竭(ACHBLF),其在所有肝衰竭病因中所占比例高达70%。ACHBLF的发病机制尚不完全清楚,其死亡率高,预后差,因而降低肝衰竭患者的发病率和死亡率成为研究热点。寻找能预测肝衰竭的生物标志物能加强对患者的监测和治疗,降低ACHBLF患者的发病率和死亡率。目前大量临床研究发现,ACHBLF的发病可能与自身强烈的免疫反应有关,因此,充分理解ACHBLF发病过程的免疫应答十分重要。而CD163及sCD163是近期发现的与急性炎症反应过程密切相关的免疫因子。CD163的研究尚在起步阶段,CD163在ACHBLF患者的免疫过程中可能起到重要作用,但其在ACHBLF患者中扮演的角色尚不完全明确,对诊断及预后评估意义仍未确定,而这正是我们研究的重点及方向。目的：检测ACHBLF患者中外周血单个核细胞表面CD163及外周血血浆中sCD163的表达,明确其在急性炎性反应过程中扮演的角色及临床意义；为临床治疗ACHBLF患者寻找新的临床监测因子。方法：ELISA方法检测ACHBLF患者、CHB患者及正常对照组(HCs)血浆中sCD163的表达水平;流式细胞术检钡ACHBLF患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞CD163的阳性率和CD163平均荧光强度(MFI),应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测量ACHBLF患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞中CD163mRNA的表达。结果：1、外周血中CD163阳性的单个核细胞比率在ACHBLF患者中要明显高于CHB患者及HCs,具有显著性差异。外周血中CD163MFI在ACHBLF患者中较其他两组升高,但三组无显著性差异。2、CD163mRNA在ACHBLF患者中的表达要明显高于CHB及HCs,具有显著性差异。3、血浆中sCD163表达在ACHBLF患者中明显升高,且与患者预后有明显相关,在生存组患者中的血浆sCD163浓度要明显低于死亡组患者sCD163浓度,具有显著性差异。4、血浆中sCD163表达在ACHBLF患者中与反映患者预后的MELDScore呈正相关,与HBV-DNA正相关,凝血酶原活动度负相关,与总胆红素水平无相关。5、外周血中CD163阳性的单个核细胞比率在CHB患者中要明显高于HCs,具有显著性差异。6、CD163mRNA在CHB患者中的表达要高于HCs,但并不具有显著性差异。7、血浆sCD163表达在CHB患者中明显升高,高于HCs,但是升高幅度远远小于其在其ACHBLF患者中升高幅度,具有显著性差异。结论：作为在巨噬细胞表面特异表达的CD163在ACHBLF患者、CHB患者发病过程中起重要作用,本研究提示CD163与sCD163都可以作为ACHBLF患者有用的标志物,其中sCD163检测更为简单直接,组间差异更为明显,与疾病的严重程度明显相关。CD163与sCD163都可以作为肝衰竭患者预后的评价指标,与患者预后呈负相关。中文摘要第二部分CD163在原发性肝癌患者中的表达及临床意义感染乙型肝炎病毒的患者易罹患肝癌,有学者统计发现,慢性乙型肝炎及慢性乙肝后肝硬化患者罹患肝癌的几率是正常人的9-10倍。80%以上的原发性肝癌患者有乙型肝炎病毒感染,原发性肝癌(HCC)是肝脏的恶性肿瘤,在所有的恶性肿瘤中死亡率高达第5位,其五年生存率不足5%,这些数据表明,了解HCC的发病过程,进行早期诊断与风险评估对HCC患者非常重要,但是目前尚缺乏非常有效的早期预测手段及监测方法。与肿瘤相关的增高的巨噬细胞被认为在肿瘤的病因及不良预后中扮演了重要角色,其中最近引起人们广泛兴趣的是,巨噬细胞的M2分型副群具有抗炎的作用,而抗炎因子CD163是M2副群的特异性标记,且为巨噬细胞活化的标记物,它的高表达可促进肿瘤的血管生成,纤维组织细胞重组,影响组织重建过程,在某些肿瘤的病理过程及在急慢性肝脏炎症疾病中起着重要作用。其在大量炎症性疾病及肿瘤性疾病中的广泛发现,使其有望成为近年来非常有效且易于监测的临床指标。而且在前一部分试验中,通过对ACHBLF患者中外周血及血浆中CD163与sCD163表达水平的检测,我们明确了在急性炎症反应过程中CD163及sCD163的表达与临床预后的关系。在本实验中,我们选取了HCC患者作为研究对象,明确CD163及sCD163在HCC患者中的表达,明确其在HCC发病过程中的重要作用,了解其与临床指标及预后的联系,寻找新的发病机理及治疗方向。目的：探讨HCC患者中外周血单个核细胞CD163及血浆中sCD163的表达,可明确其在HCC疾病过程中扮演的角色及临床意义,为临床治疗HCC寻找监测因子,探寻新的发病机理及治疗方向。方法：ELISA方法检测HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs血浆中sCD163的表达水平；流式细胞术检测HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞CD163的阳性率和CD163平均荧光强度；应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测量HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs组外周血单个核细胞中CD163mRNA的表达。结果：1、外周血CD163阳性的单个核细胞比率在HCC患者中明显升高,组间有着显著性差异；CD163免疫荧光强度组间有显著性差异。2、HCC患者中,CD163mRNA表达明显升高,组间具有显著性差异。3、血浆中sCD163浓度在HCC患者中明显升高,组间具有显著性差异。4、外周血中表达CD163的单个核细胞比率在LC患者中要明显高于HCs,具有显著性差异。5、CD163mRNA在LC患者中的表达要高于HCs,组间具有显著性差异。6、血浆sCD163表达在LC、CHB患者中明显升高,高于HCs,LC患者血浆sCD163升高幅度远远大于其在其CHB患者中升高幅度,具有显著性差异。7、血浆sCD163表达水平与HCC患者的AFP、HBV-DNA、HBeAg无明显相关。8、根据意大利CLIP评分分析,sCD163浓度与评分之间不存在明显相关性,TNM分期,Ⅲ期存在远处转移及ChildC级的HCC患者的sCD163浓度要高于无远处转移Ⅰ、Ⅱ期患者,但是无显著性差异。结论：作为在巨噬细胞表面特异表达的CD163在HCC、LC患者发病过程中起重要作用,本研究提示CD163与sCD163都可以作为HCC及LC患者有用的标志物,其中sCD163检测更为简单直接,组间差异更为明显,与疾病的严重程度明显相关。但是sCD163与临床指标在HCC患者中均无明确相关,与患者预后的联系仍需进一步实验证实。中文摘要第三部分CD163综述CD163结构及表达形式单核细胞和巨噬细胞在人类免疫系统中发挥着重要作用。巨噬细胞可分为M1型亚群和M2型亚群,两种细胞分别有促炎和抗炎的作用。CD163是在已知的M2型巨噬细胞表面特异性表达的,属于清道夫受体半胱氨酸富集结构域家族B。它是一个有着130kD重量的Ⅰ型蛋白,共有5种同源异构体,结构中含有9个清道夫受体半胱氨酸富集结构域。CD13在体内共有两种存在形式：一种是以跨膜大分子的形式存在于单核巨噬细胞上；另一种是存在于血浆或其它组织液内,具有可溶性,即sCDl63。CD163的作用CD163可以特异地识别血红蛋白：结合珠蛋白复合体,是体内血红蛋白的特异性清道夫受体。通过清除游离的血红蛋白,CD163可起到调节人体免疫的作用。CD163还可识别肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(TWEAK),并与其特异性结合,发挥抗炎作用,担当着革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌监控器的角色；在炎症反应刺激下,CD163可以和自己的配体结合,转导信号,促进单核细胞与上皮细胞的黏附,诱导炎性介质IL-10等炎症因子的释放。CD163与各种疾病的关系CD163及sCD163与免疫系统关系密切。大量的临床及实验室研究证实,CD163及sCD163与各种炎症性、肿瘤性、心脑血管疾病密切相关。在严重烧伤、急性肝衰竭等严重炎性疾病时,CD163明显升高,与预后有明显相关;在肝癌、淋巴瘤等恶性肿瘤中,亦可见CD163的明显升高,在淋巴结转移及治疗反应不佳的病人中尤为明显,提示CD163在肿瘤患者预后监测中的重要作用。糖尿病、高血脂、冠状动脉粥样硬化性心脏病等疾病中,CD163及sCD163均已被明确证实与疾病预后明显相关。CD163及sCD163在抗炎、促肿瘤方面的广阔前景,使其成为人们在未来研究的热门生物靶点,并已取得了初步成效。
【作者】叶红；
【导师】王凯；
【作者基本信息】山东大学，内科学（专业学位），2014，博士
【关键词】ACHBLF；CD163；sCD163；HCC；

【参考文献】
[1]于博.松辽平原玉米带高产田土壤结构性对冻结的响应及机理研究[D].吉林农业大学,植物营养学,2012,硕士.
[2]周鹏程.海外高层次人才引进财政政策研究[D].中共江苏省委党校,行政管理,2013,硕士.
[3]丁文彬.长沙市物流产业与区域经济发展互动关系研究[D].湖南科技大学,工商管理,2013,硕士.
[4]张利彪,周春光,刘小华,许相莉,孙彩堂.求解多目标优化问题的一种多子群体进化算法[J].控制与决策,2007,11:1313-1316+1320.
[5]蒲涛.医院管理若干问题研究[D].西南财经大学,MBA,2003,硕士.
[6]王静,何挺,李玉环.基于高光谱遥感技术的土地质量信息挖掘研究[J].遥感学报,2005,04:438-445.
[7]方梦园.程序性死亡分子-1信号通路对糖尿病视网膜病变调控机制的研究[D].南方医科大学,眼科学,2014,博士.
[8]潘炳力,邢雅丽,刘敬超,刘金龙,赵菁,张玉清,张永振.石墨烯改性聚苯硫醚涂层的摩擦学行为[J].摩擦学学报,2011,02:150-155.
[9]关文静.股指期货风险溢价现象的比较研究[D].复旦大学,金融学,2012,硕士.
[10]陈燕美.日本新闻翻译实践与研究报告[D].国际关系学院,日语,2013,硕士.
[11]彭曼辉.红外定位系统[J].冶金自动化,1993,01:58.
[12]马永硕.黄瓜营养体苦味基因Bi的克隆及功能解析[D].南京农业大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[13]谢玮,黄锐.可管可控的自组织业务组网新思路——iCOSA业务网络体系架构[J].电信网技术.2007(07)
[14]米朝辉.浙江龙泉青瓷在室内陈设艺术中的历史研究与运用[D].浙江理工大学,设计艺术学,2013,硕士.
[15]陈密.天津市部门预算管理问题研究[D].天津大学,公共管理,2013,硕士.
[16]荀冰畅.语文学科造句训练研究[D].西南大学,课程与教学论,2014,硕士.
[17]金上钟.浙江DG公司薪酬制度优化研究[D].浙江理工大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[18]张倩.分类存储下多倍深式货架堆垛机运行时间模型研究[D].华中科技大学,管理科学与工程,2012,硕士.
[19]邵志慧.初中教师自主学习调查研究[D].西南大学,课程与教学论,2013,硕士.
[20]郭志强.基于被动多传感器的机动目标跟踪算法研究[D].西安电子科技大学,模式识别与智能系统,2012,硕士.
[21]巫国谊.N-乙酰半胱氨酸对实验性肝损伤模型保护作用及其机制研究[D].重庆医科大学,内科学,2004,硕士.
[22]雷明广.FDI与产业结构调整相关性研究[D].山东财经大学,技术经济及管理,2013,硕士.
[23]王帅.受限高斯光束大气传输特性分析与数值模拟研究[D].南京理工大学,光学,2013,硕士.
[24]黄磊.MIMO米波雷达测高方法及跟踪处理技术研究[D].西安电子科技大学,信号与信息处理,2012,硕士.
[25]张宏,佘晓宇,马永强.鄂西渝东石柱复向斜上三叠统须家河组储层预测[J].石油地球物理勘探,2009,S1:115-120+168+3+2.
[26]郑荷花.丁酸钾对断奶仔猪生长性能的影响及机理研究[D].南京农业大学,动物营养与饲料科学,2012,硕士.
[27]蔡斯嘉.提案式政治参与研究[D].南昌大学,公共管理（专业学位）,2014,硕士.
[28]张花元.合金元素掺杂下镁合金广义层错能的第一性原理研究[D].吉林大学,材料加工工程,2014,硕士.
[29]刘洋,谢开贵,周家启,赵霞.大电力系统可靠性评估高性能计算平台设计与实现[J].电力系统自动化,2006,18:89-93.
[30]朱松源.爆炸危险场所区域划分的国际趋向及对我国危险区划分的建议[J].电气工程应用.1987(04)
[31]仓晨阳.车载MOST网络异步数据通信的研究与应用[D].吉林大学,软件工程,2013,硕士.
[32]何云川.预应力混凝土连续梁桥悬灌施工控制的研究[D].湖北工业大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[33]田新,刘连忠.新华社多媒体数据库系统采用数字水印版权保护技术[J].中国传媒科技.2002(07)
[34]丁明,韩平平.小世界电网的连锁故障传播机理分析[J].电力系统自动化,2007,18:6-10.
[35]李勇,董金明.网络教育系统中信息层计费实现[J].电子测量技术,2003,05:56-57.
[36]韩书葵,方跃法,槐创锋.4自由度并联机器人刚度分析[J].机械工程学报,2006,S1:31-34.
[37]魏海坤,徐嗣鑫,宋文忠.神经网络的泛化理论和泛化方法[J].自动化学报,2001,06:806-815.
[38]白冰.插竹筋水泥土挡墙试验与数值模拟研究[D].华侨大学,岩土工程,2014,硕士.
[39]任新妹.高中共青团工作对学生良好品德形成的有效性研究[D].华中师范大学,教育管理,2013,硕士.
[40]佟磊.基于模糊控制理论的型材在线定长切割系统研究[D].河北科技大学,机械电子工程,2013,硕士.
[41]于美晨.建国60年中国古代文化典籍外译书目研究[D].北京外国语大学,比较文学与世界文学,2013,硕士.
[42]张武,李文宁.天然气公司实施CRM初探[J].城市燃气,2005,07:28-33.
[43]祝兰兰.《简·爱》和《呼啸山庄》中主要女性哥特元素的比较研究[D].华东师范大学,英语语言文学,2013,硕士.
[44]赵欢让.宫崎骏动画电影美学研究[D].河北大学,艺术学,2014,硕士.
[45]童海斌.含对苯二甲双酰腙的锌、铜和镍配合物的合成、结构及性质研究[D].华侨大学,材料物理与化学,2014,硕士.
[46]程珺.老年骨质疏松症与肺纤维化的相关性研究[D].吉林大学,临床医学（专业学位）,2014,硕士.
[47]郭艳茹.机械管理系统的研究与实现[D].安徽大学,计算机技术,2013,硕士.
[48]石晶.数字化流行病学调查管理系统的设计与应用[D].河北医科大学,社会医学与卫生事业管理,2013,硕士.
[49]宿青龙.不同年龄段乳腺癌临床病理特征分析[D].大连医科大学,肿瘤学,2012,硕士.
[50]缪乾.有限政府理论视域下我国政府权力规范运行研究[D].南京师范大学,行政管理,2012,硕士.