釉质基质蛋白对乳牙牙髓干细胞体外增殖、分化能力影响的研究

【摘要】背景：牙齿发育包括一系列至关重要的有序的相互作用，发生在口腔上皮与颅神经嵴间充质细胞之间。研究已经证实原发性上皮带在牙齿发育中的诱导作用，并且这些相互作用，包括生长因子、同源基因和转录因子的高度协调表达，逐步诱导牙原基在牙弓内形成一个具有特定大小、形状和位置的复杂矿化结构。有研究在小鼠体内标记一种基因来追踪神经嵴细胞的迁移与分化，结果证明在蕾状期，颅神经嵴源外胚间充质对于牙乳头和其周围的牙囊的形成有重要作用。研究证明，成牙本质细胞，牙本质基质以及大部分的牙髓组织都来源于颅神经嵴。牙齿损伤的机制包括诱导细胞凋亡，活化的免疫反应和牙齿组织生理的变化，在多数情况下，凋亡细胞迅速清除。并未诱发炎症反应。而牙齿组织重建的机制类似于牙齿发育的过程。髓腔的结构重建发生于牙齿修复性牙本质沉积。成牙本质层的细胞凋亡明显多于牙髓的其它部位。由于细胞凋亡而消失的成牙本质细胞层有可能产生死亡信号，导致同时临近的祖细胞消失。损伤发生后，干细胞从邻近的储存处转移至创伤修复区，此处出现大量的干细胞。成牙本质细胞和邻近的祖细胞由于细胞凋亡而消失，这引起牙髓干细胞迁移至损伤区域，在此处它们分化成成牙本质样细胞，从而保证牙髓的重建。目的：研究釉质基质蛋白（EnamelMatrixProteins，EMPs）对人脱落乳牙牙髓干细胞（stemcellsfromhumanexfoliateddediduousteeth，SHED）体外增殖分化能力的影响。方法：利用酶消化法联合组织块法获得脱落乳牙牙髓干细胞，并进行形态学观察。三氯乙酸法制备EMPs，用不同浓度的EMPs对SHED进行诱导，利用四唑盐比色法（MTT）检测并分析诱导后的SHED增殖活性的变化，检测经诱导后的培养液中碱性磷酸酶（ALP）。RT-PCR检测牙本质涎磷蛋白（dentinsialophosphoprotein,DSPP）及牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP-1）的mRNA表达。结果：人脱落乳牙牙髓干细胞呈集落生长，并且在体外具有一定的自我增殖能力。EMPs对乳牙牙髓干细胞的增殖无明显影响，而能够显著提高ALP的活性，并呈现一定的剂量依赖性。经EMPs诱导后，细胞相对高表达DSPP、DMP-1mRNA。结论：EMPs对于SHED向成牙本质样分化具有积极作用。
【作者】周惠；
【导师】黄洋；孙宏晨；
【作者基本信息】吉林大学，口腔临床医学，2014，硕士
【关键词】釉质基质蛋白；乳牙牙髓干细胞；增殖；分化；

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