乙型脑炎病毒的适应性传代及规模化培养

【摘要】本研究目的是完成乙型脑炎病毒（Japaneseencephalitisvirus，JEV）在Vero细胞上的适应性、传代稳定性研究及病毒培养条件的优化。将JEV在Vero细胞上连续适应性传代20代次，通过检测各代次毒力，考察JEV在Vero细胞上的适应情况；结果显示，JEV在Vero细胞上适应性良好，所传各代次病毒滴度均大于8.5lgLD50/ml。以RT-PCR法扩增P3V0、P3V1、P3V5、P3V10、P3V15及P3V20代次病毒的E基因片段，测序分析，考察JEV在Vero细胞上的遗传稳定性；结果显示，E基因片段测序分析未发生碱基变化，传代稳定性良好。病毒静置培养状态下，实现培养规模放大，改变包括维持液pH值、培养温度、病毒感染复数（Multiplicityofinfection，MOI）及培养方式在内的相关影响因素，优化病毒培养模式；建立JEV二级毒种库，并进行全面检定。结果显示，当病毒维持液pH值为7.2~7.4、培养温度为34℃、病毒接种MOI为0.01或0.1且以单层接种法接种病毒时，病毒滴度最高。完成JEV在Vero细胞上的适应性传代培养，为实现Vero细胞基质的JEV疫苗研发奠定基础。
【作者】刘岩；
【导师】管清香；
【作者基本信息】吉林大学，制药工程，2014，硕士
【关键词】乙型脑炎病毒；Vero细胞；感染复数；毒种库；

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