γ-羟丁酸钠对人胶质瘤细胞SHG-44放疗增敏的实验研究

【摘要】目的：探讨γ-羟丁酸钠（gamma-hydroxybutrate，GHB）对胶质瘤细胞SHG-44增殖抑制及放疗增敏机制研究。方法：以SHG-44细胞为研究对象，MTT法检测不同浓度GHB（2.5mmol/L、5mmol/L、7.5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用人胶质瘤细胞不同时间（24h、48h、72h）细胞增殖抑制率。Hoechst33258实验观察不同浓度GHB（5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用24h后细胞核变化。下列实验分为对照组、药物组、照射组、联合组（照射+药物）。流式细胞术（FCM）分析各组细胞周期、凋亡情况。克隆形成实验分析GHB联合不同剂量的X线照射对细胞存活率的影响，拟合存活曲线。细胞免疫荧光检测SHG-44细胞中HDAC1（Histonedeacetylase1，HDAC1）mRNA表达情况。RT-PCR检测各组细胞HDAC1mRNA、ATM（Ataxiatelangiectasia-mutatedgene）mRNA的转录水平。结果：MTT实验显示GHB明显抑制SHG-44细胞的生长，呈浓度和时间依赖性。Hoechst33258镜下观察时染色体浓缩，见强蓝色荧光。FCM检测联合组细胞周期S期细胞减少，G0/G1期细胞增多，凋亡显著。克隆形成实验显示联合组的D0、Dq及SF2各值低于照射组(1.764Vs2.237，1.251Vs1.873，0.561Vs0.769)，联合组SER为1.27。细胞免疫荧光测得HDAC1主要在SHG-44细胞核中表达。RT-PCR结果表明γ-羟丁酸钠能抑制HDAC1mRNA、ATMmRNA表达。结论：GHB通过诱导细胞凋亡，改变细胞周期，抑制肿瘤细胞损伤修复，抑制HDAC1、ATMmRNA表达，从而增强胶质瘤细胞放射敏感性。
【作者】王忠超；
【导师】楚建军；
【作者基本信息】苏州大学，肿瘤学，2014，硕士
【关键词】胶质瘤；γ-羟丁酸钠；放疗增敏；

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